基于滚环扩增技术耦合切刻内切酶信号放大技术的新型超灵敏miRNA-122荧光传感器

摘要

MicroRNA-122 (miRNA-122)的异常表达与肝癌的发生、发展及转移紧密相关,发展简单、快速、高灵敏和高特异性的miRNA-122检测方法对于肝癌的早期诊断和预后评估具有非常重要的意义。本文报道了一种基于滚环扩增技术(RCA)耦合切刻内切酶信号放大(NESA)技术的新型荧光传感器并用于超灵敏和高选择性检测miRNA-122。该方法涉及了两个阶段的反应机制,第一阶段,目标物激活切刻内切酶辅助的聚合反应,用以实现目标物与次级目标物循环放大以及生成RCA引物;第二阶段,利用RCA耦合NESA反应,实现信号传导以及多重信号放大。实验结果证明,该传感器表现出对miRNA-122的非常高的灵敏度和特异性,检测下限达到3.9 aM,较之前报道的方法,灵敏度有明显的提高。另外,该方法整个过程只需一步反应,具有操作简便、成本低、检测时间短的优势。所以,所提出的基于RCA耦合NESA的荧光传感器有望建立一个简单而实用的生物传感新平台,并应用于miRNA检测以及癌症的早期诊断和预后评估。