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一种编码易错DNA聚合酶及其制备方法

摘要

本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种编码易错DNA聚合酶及其制备方法。本发明易错DNA聚合酶的制备方法,包括以下步骤:(1)提取红球菌基因组DNA,测序,比对,得到易错DNA聚合酶基因序列SEQ ID NO:1;(2)克隆SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列,得到核苷酸片段;(3)将核苷酸片段和质粒pET32a进行连接,构建重组质粒;(4)将重组质粒转化到大肠杆菌感受态细胞E.coli BL21中,获得表达菌株;(5)利用LB液体培养基培养表达菌株,加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16‑20h,裂解菌体,纯化,获得重组易错DNA聚合酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提高了易错DNA聚合酶表达和纯化效率,以获得稳定、高活力的易错DNA聚合酶,提高易错效果。

著录项

  • 公开/公告号CN108949719A

    专利类型发明专利

  • 公开/公告日2018-12-07

    原文格式PDF

  • 申请/专利权人 山西医科大学;山西大学;

    申请/专利号CN201810831279.6

  • 发明设计人 刘承芸;杨秀清;

    申请日2018-07-26

  • 分类号C12N9/12(20060101);C12N15/70(20060101);

  • 代理机构14115 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙);

  • 代理人郭海燕

  • 地址 030001 山西省太原市迎泽区新建南路56号

  • 入库时间 2023-06-19 07:32:28

法律信息

  • 法律状态公告日

    法律状态信息

    法律状态

  • 2019-01-01

    实质审查的生效 IPC(主分类):C12N9/12 申请日:20180726

    实质审查的生效

  • 2018-12-07

    公开

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