重组PRESCISSION酶在大肠杆菌中的生产方法

摘要

本发明公开了重组PRESCISSION酶在大肠杆菌中的生产方法，包括以下步骤：S1、PGEX‑4T‑1‑PRESCISSION蛋白酶表达质粒的构建；S2、PRESCISSION蛋白酶的诱导表达与鉴定；S3、PRESCISSION蛋白酶的纯化与鉴定。本发明应用大肠杆菌表达系统，通过设计表达载体，实现重组PRESCISSION蛋白酶在大肠杆菌中表达，再经过亲和层析、Superdex 75凝胶过滤层析等方法对目标蛋白酶进行提纯，大幅缩短了目标蛋白酶的纯化流程与纯化时间，同时提高了蛋白酶的纯度、得率和酶活，节省实验步骤并减少成本。本发明方法，为研发及生产其他蛋白类工具酶奠定了基础。