一种将TLR4应用于治疗脓毒症急性肾损伤的研究方法

摘要

一种将TLR4应用于治疗脓毒症急性肾损伤的研究方法，本发明涉及医疗技术领域；小鼠脓毒症性AKI模型的建立；动物成模的判定；标本收集；正常及脓毒症性AKI小鼠肾细胞原代培养；免疫组化(SP法)及半定量测定TLR4；Real‑time PCR检测脓毒症性AKI小鼠原代肾细胞VEGF、sFLT‑1、TNF‑α、TLR4mRNA表达改变；Western‑blot方法检测脓毒症性AKI小鼠原代肾细胞VEGF、sFLT‑1、TNF‑α、TLR4蛋白水平表达改变；构建VEGF基因真核表达质粒以及最佳沉默小鼠VEGF基因ShRNA表达质粒；实验分组；TLR4处理细胞；检测指标；验证TLR4靶向调控VEGF的表达；寻找与VEGF相互作用的蛋白质，探讨VEGF调节TLRs信号通路可能涉及的分子机制。其推测了VEGF与TLR4信号通路交互影响调控脓毒症急性肾损伤具有保护作用。