一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方及其配置方法

摘要

本发明公开一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方及配制方法，配方包括如下成分：香菇菌糠、小麦、玉米芯、石膏、石灰、硝酸钾、磷酸二氢钾、微生物复合菌剂，配方培养料含水量60～65％；本发明利用香菇菌糠作为主要原料来制作六妹羊肚菌栽培种，是一种变废为宝的有益途径，提高菌丝生长速度10％，在栽培料中适量加入无机氮源和微量元素，促进了菌丝生长，保持菌丝活力，促进菌核的形成，分生孢子产生量大，提高了羊肚菌栽培种的质量，我国香菇菌糠资源巨大，已经成为一种污染，本配方提供的栽培种配方可以有效降低菌种生产成本10％，发明方法制作过程简单，易于播种和推广，并且降低木屑的使用，有效解决菌林矛盾和菌糠污染。

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体说是一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌(Morchellasextelata)栽培种的配方及其配置方法。

背景技术

羊肚菌(Morchella spp.)类大多数为美味食用菌，位居世界四大野生名菌之首，分类学上隶属于子囊菌门(Ascomycota)，盘菌纲(Pezizomycetes)，盘菌目(Pezizales)，羊肚菌科(Morcellaceae)。野生羊肚菌在我国主要分布在云南、四川、青海、河南、陕西、甘肃、西藏、新疆、山西、吉林、辽宁、江苏等地区。商业化人工栽培的羊肚菌以黑色品系为主，主要包括梯棱羊肚菌(M.importuna)、六妹羊肚菌(M.sextelata)和七妹羊肚菌(M.septimelata)，其中六妹羊肚菌在品质和抗性方面的优势比较突出。随着羊肚菌栽培技术的不断突破和完善，羊肚菌栽培面积不断扩大。木屑是羊肚菌栽培种生产中常用的主要原料之一，木屑资源的逐渐减少急需替代原料的出现。

香菇栽培后的培养料经过香菇菌丝的酶解作用，产生了糖类、有机酸等物质，大量的菌丝和有益菌留在了菌棒上，因此菌糠中富含有机质和多种营养成分，还含有钙铁镁锌等微量元素，香菇是我国食用菌生产的主要菇种之一，香菇栽培量逐年增大，产生大量的菌糠，一部分用作有机肥、菌渣还田和饲料等利用，大部分被废弃或作燃料，得不到合理利用，既污染环境，又造成资源浪费，而且给规模化产区带来严重的生产隐患。

由于羊肚菌分解培养料的能力比较弱，木屑使用前需要经过堆积等处理，菌糠经过菌丝降解，内含有大量已分解但尚未利用的小分子营养物质，更容易被羊肚菌菌丝利用。若将这些菌糠有效利用，则可大大降低成本，提高经济效益。

目前香菇菌糠常用在羊肚菌栽培中改善土壤结构，没有利用香菇菌糠作为菌种生产原料的，缺少相关方面的应用。我们知道，羊肚菌栽培菌种制作是食用菌栽培前期主要工作，虽然其生产工艺及技术要求基本相同，但不同培养料配方，对栽培种的质量影响起关键作用。

发明内容

针对现有技术的上述不足之处，本发明提供一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌(Morchella sextelata)栽培种的配方及其配置方法，采用该方法，制作过程简单，降低生产成本，易于播种和推广，并且降低木屑的使用，有效解决菌林矛盾和菌糠污染。

本发明采用的技术方案是：

一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌(Morchella sextelata)栽培种的配方，按照重量百分比包括如下成分：香菇菌糠40～50份、小麦30～50份、玉米芯5～8份、石膏1～2份、石灰1～1.5份、硝酸钾0.2份、磷酸二氢钾0.1份、微生物复合菌剂0.04～0.05份，配方培养料含水量60～65％；

所述的一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方，所述香菇菌糠为香菇生产出菇后的菌棒，菌棒出菇过程中无污染或污染轻微，菌棒脱袋晒干后粉碎至粒径≦1cm。

所述的一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方，所述微生物复合菌剂采用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌和细黄链霉菌复合而成。

所述的一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方，所述微生物复合菌剂的制备为：

将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌和细黄链霉菌分别按微生物领域常规操作进行：活化→一级放大→二级放大→摇床放大；当有效活菌数为2.5～5亿/ml个数时进行载体吸附；载体上有效活菌数超过2.5亿/克具备混合条件；

将具备条件的附有菌种的载体配料，按载体的重量份配比为，枯草芽孢杆菌载体：地衣芽孢杆菌载体：植物乳杆菌载体：细黄链霉菌载体30：20：10：40，混合均匀；在无菌条件下，进行自然固态堆积发酵，当温度保持35～38℃，持续24～36小时，进行低温干燥，干燥温度不高于55℃，当含水量≤20％测定有效活菌总数和杂菌率；当有效活菌总数≥20亿/克，杂菌率≤10％，含水量≤20％时，常温常压真空包装，得微生物复合菌剂。

所述的一种利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方，所述六妹羊肚菌的种源，通过核糖体DNA转录间隔区(ITS)序列分析技术鉴定为六妹羊肚菌，并且经过室内栽培出菇验证其具有出菇性能，抗逆性强，菇蕾数量50～200个/平方米。

一种所述利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方的配制方法，包括如下步骤：

1)按配方量，将硝酸钾和磷酸二氢钾溶于水中，配成水溶液，备用；

2)按按配方量，将香菇菌糠、微生物复合菌剂、小麦、玉米芯、石膏、石灰拌匀，边搅拌边加入步骤1)配制的硝酸钾和磷酸二氢钾的水溶液，调节含水量至60～65％，堆积发酵3个月以上，发酵温度不要小于10℃，经过多次翻堆处理，进行强制通风，得培养料；

3)采用聚丙烯或聚乙烯袋装料，得菌袋；

4)采用常规方法灭菌、接种和培养。

所述的配制方法，步骤3)具体为：采用可调立式装袋机装袋，采用17cm*36cm*0.02cm聚丙烯折角袋，装培养料至袋口5cm左右，装袋高度17～20cm，装好的袋要松一些、料面平整、压实、拧口，再插入塑料棒，得菌袋。

所述的配制方法，步骤4)中所述的灭菌、接种，具体为：将菌袋高压灭菌，高压灭菌在0.14～0.15MPa下，灭菌2～3h；待菌袋内培养基冷却至30℃以下时，在无菌环境下将羊肚菌菌种接入菌袋，接种量为培养料干重的3％～5％。

所述的配制方法，步骤4)中所述的培养，具体为：将接种后的菌袋放在温度为22～25℃、相对湿度65％～70％的条件下，暗光环境培养10～20天菌丝即可长满菌袋；待菌丝满袋后，控制昼夜温度，白昼15～22℃，黑夜12～5℃，光照强度100～300勒克斯；7～10天菌丝即可扭结形成白色菌核，继续培养后菌核长大且颜色加深转成褐色或深褐色。

本发明的有益效果是：

1、本发明利用香菇菌栽培后的菌糠作为主要原料生产羊肚菌栽培种，拓宽了羊肚菌原料渠道，大大降低了成本，有效解决木腐菌发展与林业保护之间的矛盾，实现产业可持续发展。

2、本发明，在菌糠发酵时，加入复合微生物菌剂，提高了菌糠发酵的效率，有利于有益营养物质的积累。香菇菌糠经过复合微生物菌剂作用，养分分解利于羊肚菌菌种吸收，同时在堆腐熟发酵过程中产生代谢产物生长素能够促进羊肚菌菌丝生长，快速产生菌核，提高了羊肚菌栽培种的质量，分生孢子产生量大。

3、本发明，栽培种培养料中适量加入无机氮源和微量元素，促进了菌丝生长和菌核形成，提高了菌种质量。

4、由于羊肚菌菌丝分解培养料的能力比较弱，香菇菌糠中富含有机质和多种营养成分，还含有钙铁镁锌等微量元素，经过香菇菌丝的降解和微生物发酵作用，培养料中大量已分解但尚未利用的小分子营养物质为羊肚菌生长提供营养，因此栽培中的生长速度提高了10％，降低了培养成本10～15％。

5、本发明的培养基成分容易得到，配制方便，成本低廉，实际应用操作简单，易于推广，适用于辽宁省羊肚菌的规模化生产。

6、香菇是我国食用菌生产的主要菇种之一，大量菌糠的废弃和燃烧是生物质的极大浪费，本发明用香菇菌糠作为原料制作羊肚菌栽培种是一种变废为宝的有益途径，既解决了香菇菌糠大量堆积产生的环境问题和资源浪费，又解决了栽培原料价格持续增长而造成的羊肚菌菌种栽培成本过高的难题。

具体实施方式

实施例1利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方及其配置方法

(一)实施地区：辽宁锦州

(二)六妹羊肚菌种源，通过核糖体DNA转录间隔区(ITS)序列分析技术鉴定为六妹羊肚菌，并且经过室内栽培出菇验证其具有出菇性能，抗逆性强，菇蕾数量50～200个/平方米。

(三)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方：香菇菌糠40份、小麦50份、玉米芯7份、石膏2份、石灰1份、硝酸钾0.2份、磷酸二氢钾0.1份、微生物复合菌剂0.04份，调节配方培养料含水量为60～65％。按照重量配比香菇菌糠1000份与微生物复合菌剂1份的比例，向香菇菌糠中加入微生物复合菌剂进行有氧发酵。

1)配方中发酵后的香菇菌糠，是选用新鲜香菇菌糠，栽培过程中没有污染或者污染较轻，没有害虫，脱袋膜，粉碎至粒径≦1cm。

2)配方中小麦煮至没有白芯，挑出破皮的小麦。

3)配方中的玉米芯选择无霉变，粉碎至粒径小于0.5cm，拌料前进行预湿，使其吃透水。

4)配方中微生物复合菌剂由枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌和细黄链霉菌复合成。具体为：

步骤一、将枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、植物乳杆菌和细黄链霉菌分别按微生物领域常规操作进行：活化→一级放大→二级放大→摇床放大；当有效活菌数为2.5～5亿/ml个数时进行载体吸附；载体上有效活菌数超过2.5亿/克具备混合条件；

步骤二、将具备条件的附有菌种的载体配料，按载体的重量份配比为，枯草芽孢杆菌载体：地衣芽孢杆菌载体：植物乳杆菌载体：细黄链霉菌载体30：20：10：40，混合均匀；在无菌条件下，进行自然固态堆积发酵，当温度保持35～38℃，持续24～36小时，进行低温干燥，干燥温度不高于55℃，当含水量≤20％测定有效活菌总数和杂菌率；当有效活菌总数≥20亿/克，杂菌率≤10％，含水量≤20％时，常温常压真空包装，得微生物复合菌剂。

(四)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方的配制方法

步骤一、按配方量，将硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，备用。

步骤二、配料：按配方比例将香菇菌糠、微生物复合菌剂、小麦、玉米芯、石膏、石灰拌匀，边搅拌边加入硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，调节含水量达到60～65％，堆积发酵3个月以上；发酵温度不要小于10℃，经过多次翻堆处理，进行强制通风，得培养料。

步骤三、装袋：采用可调立式装袋机装袋，采用17cm*36cm*0.02cm聚丙烯折角袋，装培养料至袋口5cm左右，装袋高度17～20cm，装好的袋要松一些、料面平整、压实、拧口，再插入塑料棒，得菌袋。

步骤四、灭菌和接种：将菌袋高压灭菌，高压灭菌在0.14～0.15MPa下，灭菌2～3h；接种时要求环境清洁、干燥，并进行消毒处理。当菌袋内料温降至28℃时，在净化室内严格按无菌操作规程进行接种，及时用无菌海绵塞封口。

步骤五、菌丝培养：将菌袋放入严格消毒的培养室内培养，培养室搭建摆放菌袋的层架，再把菌袋放入周转筐单层摆放在层架上，通风良好，22～23℃，黑暗或有较弱的散射光。控制人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为22℃，黑夜温度为16℃，相对湿度70％，并控制白昼光照时间为12h，黑夜时间为12h，暗光培养。待菌丝满袋后，调节人工气候箱的昼夜温度，白昼温度为18℃，黑夜温度为12℃，光照强度300Lx，通过温差刺激与弱光照刺激，7天后菌袋中即形成白色的小菌核，继续培养菌核长大至5～8mm且颜色加深转成褐色或深褐色，至此羊肚菌的栽培种制作完成。

实施例2利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方及其配置方法

(一)实施地区：鞍山市岫岩满族自治县德圣食用菌专业合作社

(二)六妹羊肚菌种源同实施例1。

(三)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方：香菇菌糠50份、小麦40份、玉米芯7份、石膏2份、石灰1份，无机氮源硝酸钾0.2份、磷酸二氢钾0.1份、微生物复合菌剂0.05份，培养料含水量60～65％。

1)配方中的香菇菌糠同实施例1。

2)配方中小麦同实施例1。

3)配方中的玉米芯同实施例1。

4)微生物复合菌剂同实施例1。

(四)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方的配制方法

步骤一、按配方量，将硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，备用。

步骤二、配料：按配方比例将香菇菌糠、微生物复合菌剂、小麦、玉米芯、石膏、石灰拌匀，边搅拌边加入硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，调节含水量达到60～65％，堆积发酵3个月以上；发酵温度不要小于10℃，经过多次翻堆处理，进行强制通风，得培养料。

步骤三、装袋：采用卧式防爆袋装袋机装袋，采用12cm*24cm*0.04cm聚乙烯折角袋，装袋，装好的袋要松一些、袋口采用无棉盖体封口，得菌袋。

步骤四、灭菌和接种：将菌袋高压灭菌，高压灭菌在0.14～0.15MPa下，灭菌2～3h；接种时要求环境清洁、干燥，并进行消毒处理。当菌袋内料温降至28℃时，在净化室内严格按无菌操作规程进行接种，及时用无菌海绵塞封口。

步骤五、菌丝培养：同实施例1。

实施例3利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方及其配置方法

(一)实施地区：辽宁北镇市

(二)六妹羊肚菌种源同实施例1。

(三)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方：香菇菌糠50份、小麦40份、玉米芯7份、石膏2份、石灰1份，无机氮源硝酸钾0.2份、磷酸二氢钾0.1份、微生物复合菌剂0.05份，培养料含水量60～65％。

1)配方中的香菇菌糠同实施例1。

2)配方中小麦同实施例1。

3)配方中的玉米芯同实施例1。

4)微生物复合菌剂同实施例1。

(四)利用香菇菌糠的六妹羊肚菌栽培种的配方的配制方法

步骤一、按配方量，将硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，备用。

步骤二、配料：按配方比例将香菇菌糠、微生物复合菌剂、小麦、玉米芯、石膏、石灰拌匀，边搅拌边加入硝酸钾和磷酸二氢钾配成水溶液，调节含水量达到60～65％，堆积发酵3个月以上；发酵温度不要小于10℃，经过多次翻堆处理，进行强制通风，得培养料。

步骤三、装袋：采用卧式防爆袋装袋机装袋，采用12cm*24cm*0.04cm聚乙烯折角袋，装袋，装好的袋要松一些、袋口采用无棉盖体封口，得菌袋。

步骤四、灭菌和接种：将菌袋高压灭菌，高压灭菌在0.14～0.15MPa下，灭菌2～3h；接种时要求环境清洁、干燥，并进行消毒处理。当菌袋内料温降至28℃时，在净化室内严格按无菌操作规程进行接种，及时用无菌海绵塞封口。

步骤五、菌丝培养：同实施例1。