一种检测人类基因CEBPA的PCR引物及检测方法

摘要

本发明提供了两对PCR引物，该PCR引物退火温度60℃；正反向引物Tm值相差不超过2℃；目的片段长度为867bp和632bp；引物长度19‑21bp；GC含量为40‑60％，碱基呈随机分布态势；同时其特异性良好，PCR产物不形成二级结构，尤其适用于针对CEBPA基因的PCR扩增。此基础上，本发明围绕引物特征基于第一代基因测序技术开发了针对CEBPA基因的检测方法，同时实现对引物性能的验证。该方法对反应体系成分、PCR反应条件进行了全新设计，所得产物通过琼脂糖凝胶电泳验证发现目的基因具有清晰条带，切胶回收后经纯化、测序分析发现，产物确切为CEBPA基因，证明实验结果良好。