猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法及其引物

摘要

目的:建立一种猪瘟病毒荧光定量RT-PCR检测方法及其引物.方法:本实验建立的荧光定量RT-PCR检测方法包括引物的设计与合成、总RNA提取、反转录和荧光定量PCR检测步骤.对该方法进行特异性、敏感性和重复性试验.结果:成功设计合成引物,上游引物QCSFV-F,序列为:CCCTCCAGCGACGGCCG;下游引物QCSFV-R,序列为:ACTTAGACCACCCAGGGAG.本实验检测方法可特异性检测CSFV,方法重复性好、敏感性高,能检出模板最低浓度为101copies/μL,重复检测的变异系数均小于2％.可用于所有亚型CSFV毒株的快速检测.