一种用于检测EML4-ALK、ROS1和RET融合基因突变的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，具体地涉及一种通过文库构建并测序一次性检测EML4‑ALK，ROS1和RET融合基因突变的方法。本发明能在3小时内,由1‑2000个新鲜组织细胞，10pg‑20ng经提取的总RNA，或血浆游离RNA为起始，在ALK,ROS1,RET特异性引物与逆转录酶的作用下对其中包含融合型信息的mRNA进行逆转录并获得cDNA第一链，而后以模板转换技术在cDNA的3’端添加一段接头序列(带有分子标签)并进行cDNA二链生成，而后以接头区段为引物锚定位点进行指数扩增的同时在cDNA两端加上Illumina文库接头，以获得符合下游分析要求的高质量cDNA文库。