靶向骨髓瘤BCMA抗原的转基因T细胞及其制备方法与应用

摘要

本发明公开了一种编码抗BCMA嵌合抗原受体的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。公开了一种包含有该基因重组表达载体。公开了一种靶向骨髓瘤BCMA抗原的转基因T细胞，为包含有上述重组表达载体的、且敲除了PD1基因或/和CTLA4基因的原始细胞，或染色体中整合有上述基因的、且敲除了PD1基因或/和CTLA4基因的原始细胞；其制备方法：gRNA、CRISPR‑cas9mRNA、HDR混合，电转重组T细胞。所述靶向骨髓瘤BCMA抗原的转基因T细胞在制备治疗多发性骨髓瘤的药物中的应用。本发明在carT构建中，引入了EGFR的识别序列，必要时可用EGFR单抗Cetuximab消除carT细胞，并且敲除了PD1、CTLA4基因，解除了其对carT细胞的抑制，增强了carT细胞克服肿瘤微环境抑制免疫细胞功能。