高通量筛选ALKBH5小分子抑制剂的方法

摘要

本发明涉及药物化学领域，具体公开了利用FDH酶联荧光原理和AlphaScreen技术分别筛选ALKBH5小分子抑制剂的方法。该方法先成功构建并原核表达纯化得到纯度较高的ALKBH5重组蛋白，合成m6A修饰的ssRNA作为底物。用FDH酶联荧光原理和AlphaScreen技术检测ALKBH5的活性并建立其小分子抑制剂筛选平台。FDH酶联荧光反应体系稳定，所用试剂便宜，易得，背景低；AlphaScreen反应体系稳定，受到样品的干扰非常少，假阳性假阴性均低，可去除天然产物自发荧光的干扰，灵敏度高；这两种方法均易于实现微型化，通量高且相互补充，可实现ALKBH5小分子抑制剂的筛选。