三孢布拉霉负菌crgA基因及其克隆和应用

摘要

本发明公开了三孢布拉霉(Blakeslea trispora)负菌crgA基因、基因克隆方法与应用，属于基因工程技术领域。本发明根据三孢布拉霉正菌的crgA基因序列设计四对引物对成功克隆出三孢布拉霉负菌的crgA基因，并将两者的crgA基因进行了同源比对分析。而后对该基因进行敲除，在表型特征、关键酶基因转录水平、类胡萝卜素合成水平等方面将基因敲除株与野生株进行比较分析，初步显示了该基因在三孢布拉霉中起到负调控因子的作用。本发明通过基因工程技术克隆出三孢布拉霉负菌中的crgA基因，将有助于解析其在三孢布拉霉生产类胡萝卜素过程中的调控机制，有助于提高类胡萝卜素的产量，具有很好的应用前景。