一种源于猪胸膜肺炎放线杆菌的I‑F型CRISPR相关蛋白Csy4的制备方法及应用

摘要

本发明属于遗传工程领域，涉及一种来源于猪胸膜肺炎放线杆菌的I‑F型CRISPR相关蛋白Csy4的功能、制备方法及应用。本发明含以下步骤：将猪胸膜肺炎放线杆菌(actinobacilluspleuropneumoniae,App)来源的Csy4基因重组到pET28b载体上，构建pET28b‑Csy4重组质粒；将pET28b‑Csy4质粒转化入大肠杆菌并诱导表达，表达后破碎菌体，离心，采用亲和层析技术，纯化获得Csy4蛋白；本发明人采用核酸电泳迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)发现该Csy4蛋白与特定RNA具结合活性。