公开/公告号CN106795163A
专利类型发明专利
公开/公告日2017-05-31
原文格式PDF
申请/专利权人 卢郡控股(开曼)有限公司;
申请/专利号CN201580029736.4
发明设计人 吉迪恩·夏皮罗;
申请日2015-06-03
分类号C07D487/04;A61K31/519;A61P25/24;A61P25/28;A61P25/16;
代理机构北京律盟知识产权代理有限责任公司;
代理人章蕾
地址 英国开曼群岛大开曼
入库时间 2023-06-19 02:21:55
法律状态公告日
法律状态信息
法律状态
2019-07-30
授权
授权
2017-06-27
实质审查的生效 IPC(主分类):C07D487/04 申请日:20150603
实质审查的生效
2017-05-31
公开
公开
背景技术
最初在中风和头部外伤中研发的非选择性NMDA受体拮抗剂最近在治疗抑郁症中显示临床效能。已显示非选择性NMDA受体拮抗剂氯胺酮在对标准单胺再摄取抑制剂疗法具有抗性的抑郁症中具有快速起效和效能(马修斯(Mathews)和萨拉特(Zarate),2013，临床精神病学杂志(J.Clin.Psychiatry)74:516-158)。然而，例如氯胺酮等非选择性NMDA受体拮抗剂具有一系列限制在人类中应用的非所需药理学活性。特定来说，解离性或精神性副作用对于非选择性NMDA受体拮抗剂来说尤其显著。最近，NR2B亚型选择性NMDA受体拮抗剂已在较宽范围的临床适应症中展示潜能。特定来说，NR2B拮抗剂也已在早期临床试验中展示抗抑郁活性(易卜拉欣(Ibrahim)等人，2012，中国临床心理学杂志(J.Clin.Psychopharmacol.)32,551-557；普瑞科恩(Preskorn)等人，2008，中国临床心理学杂志28,631-637)。此外，选择性NR2B拮抗剂具有因极大减弱的解离性副作用而优于例如氯胺酮等非选择性NMDA受体拮抗剂的优点。然而，迄今所描述的NR2B拮抗剂通常展现在其它药物性质方面的缺点，从而限制在人类药物疗法中的潜在用途。
发明内容
对于在一系列临床适应症(包括抑郁症)中的广泛应用范围和安全人类使用，需要经改良的NR2B亚型选择性拮抗剂。本发明尤其解决对在一或多个由药物动力学性能、经口活性、心血管安全性以及体外和体内治疗安全性指标量度所例示的方面经改良的NR2B受体拮抗剂的需求。
在一些实施例中，本发明涵盖如下见解：式I化学实体：
其中X、Y、Z、R1、R3、R4、R5及R6于本文中定义，是NR2B亚型选择性受体拮抗剂。式I化学实体和其医药上可接受的组合物可用于治疗与NR2B受体拮抗作用相关的各种疾病和病症。所述疾病和病症包括本文中所描述的那些。
附图说明
图1显示如实例2.4.1中所描述的强迫游泳测试的结果。
图2显示如实例2.4.2中所描述的强迫游泳测试的结果。
具体实施方式
化学实体的一般描述
在一些实施例中，本发明提供式I化学实体：
其中：
Y和Z中的一者是N，且另一者是C(R2)；
X是氢、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、-CO2R7、-CN、-SR7、-S(O)2R7、-NO2或-N(R7)(R8)，其中所述C1-C6烷基任选地经1到6个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到6个氟原子取代；
R1是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-CN、-NO2、-N(R7)(R8)、-CO2R7、-C(O)N(R7)(R8)或C3-C6环烷基，其中所述C1-C4烷基任选地经1到3个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到3个氟原子取代；
R2是氢、卤素、C1-C4烷基、环丙基或C1-C4烷氧基，其中所述C1-C4烷基任选地经1到3个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到3个氟原子取代；
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3；
R4是氢、-F、-Cl、C1-C3烷基或环丙基，其中所述C1-C3烷基任选地经1到3个氟原子取代；
R5是氢或-CH3；
R6是氢、-F或-CH3；
R7的每一实例独立地为C1-C4烷基；且
R8的每一实例独立地为氢或C1-C4烷基。
除非另外规定或自上下文显而易见，否则术语“化学实体”是指具有所指示结构的化合物，无论呈其“游离”形式(例如，若适用，“游离化合物”或“游离碱”或“游离酸”形式)还是呈盐形式、特定来说医药上可接受的盐形式，且此外无论呈固态形式还是其它形式。在一些实施例中，固态形式为非晶形(即，非结晶)形式；在一些实施例中，固态形式是结晶型。在一些实施例中，结晶型是例如多形体、假水合物或水合物。类似地，所述术语涵盖无论以固体形式还是其它形式提供的化合物。除非另外规定，否则本文中所进行的关于“化合物”的所有陈述均适用于如所定义的相关化学实体。
化学实体和定义
除非另外规定，否则单词“包括(includes)”(或其任何变化形式，例如“包括(include)”、“包括(including)”等)打算为开放式的。例如，“A包括1、2和3”意指A包括(但不限于)1、2和3。
除非另外规定，否则片语“例如”打算为开放式的。例如，“A可为例如氯或溴等卤素”意指A可为(但不限于)氯或溴。
本发明的化合物实体包括概述于上文中的那些，且进一步由本文所揭示的类别、子类和种类予以说明。除非另有指示，否则如本文所用的以下定义应适用。出于本发明的目的，化学元素是依照元素周期表，CAS版，化学物理手册(Handbook of Chemistry andPhysics)，第75版，内封面来鉴别，且具体官能团通常如本文中所描述来定义。另外，有机化学的一般原则以及具体功能部分和反应性描述于托马斯·索瑞尔(Thomas Sorrell)，有机化学(Organic Chemistry)，大学科学书籍出版社(University Science Books)，索萨利托(Sausalito)，1999；史密斯(Smith)和马奇(March)，马奇的高等有机化学(March’sAdvanced Organic Chemistry)，第5版，约翰威立父子公司(John Wiley&Sons,Inc.)，纽约(New York)，2001；拉若克(Larock)，综合有机转化(Comprehensive OrganicTransformations)，VCH出版公司(VCH Publishers,Inc.)，纽约，1989；和卡鲁思(Carruthers)，现代有机合成方法(Some Modern Methods of Organic Synthesis)，第3版，剑桥大学出版社(Cambridge University Press)，剑桥，1987中。
术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分意指完全饱和或含有一或多个不饱和单元的经取代或未经取代的直链或具支链单价烃链。除非另外规定，否则烷基含有1到7个碳原子(“C1-C7烷基”)。在一些实施例中，烷基含有1到6个碳原子(“C1-C6烷基”)。在一些实施例中，烷基含有1到5个碳原子(“C1-C5烷基”)。在一些实施例中，烷基含有1到4个碳原子(“C1-C4烷基”)。在一些实施例中，烷基含有3到7个碳原子(“C3-C7烷基”)。饱和烷基的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基，例如正戊基、正己基、正庚基、正辛基等的同系物和异构体。不饱和烷基是具有一或多个碳-碳双键或碳-碳三键者。不饱和烷基的实例包括烯丙基、乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-丙炔基和3-丙炔基、3-丁炔基等。术语“低碳烷基”是指具有1到4个(若饱和)或2到4个(若不饱和)碳原子的烷基。实例性低碳烷基包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基等。术语“烯基”是指具有至少2个碳原子和至少1个碳-碳双键的烷基。术语“炔基”是指具有至少2个碳原子和至少1个碳-碳三键的烷基。
术语“环烷基”本身或作为另一取代基的一部分是指完全饱和或含有一或多个不饱和单元的单环单价烃，但其并非具有附接到分子的其余部分的单一点的芳香族。在一些实施例中，环烷基含有3到8个环碳原子(“C3-C8环烷基”)。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、1-环己烯基、3-环己烯基、环庚基等。
术语“烷氧基”本身或作为另一取代基的一部分是指基团-O-烷基。
术语“卤素”或“卤基”本身或作为另一取代基的一部分是指氟、氯、溴和碘。
如本文所用术语“医药上可接受的盐”是指那些在合理医学判断范围内适用于接触人类和低等动物组织而不会产生过度毒性、刺激、过敏反应等且与合理效益/风险比相称的盐。医药上可接受的盐为业内所熟知。例如，S.M.伯奇(S.M.Berge)等人在医药科学杂志(J.Pharmaceutical Sciences)，1977,66：1-19中详细描述医药上可接受的盐，其是以引用方式并入本文中。本发明化合物的医药上可接受的盐包括衍生自适宜无机和有机酸和碱的那些。医药上可接受的无毒酸加成盐的实例是氨基与无机酸(例如，盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸)或与有机酸(例如，乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸)或通过使用业内所用的其它方法(例如，离子交换)形成的盐。其它医药上可接受的盐包括己二酸盐、海藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡萄糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、葡萄糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、已酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐、乳酸盐、月桂酸盐、月桂基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、果胶酯酸盐、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对-甲苯磺酸盐、十一烷酸盐、戊酸盐等。
衍生自适当碱的盐包括碱金属盐、碱土金属盐、铵盐和N+(C1-4烷基)4盐。代表性碱金属或碱土金属盐包括钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐等。若适宜，其它医药上可接受的盐包括无毒铵、季铵和胺阳离子，其是使用例如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、低碳烷基磺酸根和芳基磺酸根等抗衡离子来形成。
除非另有说明，否则本文中绘示的结构也打算包括所述结构的所有异构体(例如对映异构体、非对映异构体和几何(或构象))形式；例如，每一不对称中心的R和S构形，Z和E双键异构体，和Z和E构象异构体。因此，本发明化合物的单一立体化学异构体以及对映异构体、非对映异构体和几何(或构象)混合物均属于本发明范围内。除非另有说明，否则本发明化合物的所有互变异构体形式均属于本发明范围内。另外，除非另有说明，否则本文绘示的结构也打算包括仅在一或多个同位素富集原子存在时不同的化合物。例如，包括分别用2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、17O、18O、36Cl或18F代替氢、碳、氮、氧、氯或氟的具有本发明结构的化合物属于本发明范围内。根据本发明，所述化合物可用作例如分析工具、生物分析中的探针或治疗剂。另外，纳入较重同位素(例如氘(2H))可提供由更强代谢稳定性产生的某些治疗优势，例如延长体内半衰期或降低剂量需求。
化学实体的实例性实施例
在一些实施例中，本发明提供式I化学实体：
其中：
Y和Z中的一者是N，且另一者是C(R2)；
X是氢、卤素、C1-C6烷基、C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、-CO2R7、-CN、-SR7、-S(O)2R7、-NO2或-N(R7)(R8)，其中所述C1-C6烷基任选地经1到6个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到6个氟原子取代；
R1是氢、卤素、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、-CN、-NO2、-N(R7)(R8)、-CO2R7、-C(O)N(R7)(R8)或C3-C6环烷基，其中所述C1-C4烷基任选地经1到3个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到3个氟原子取代；
R2是氢、卤素、C1-C4烷基、环丙基或C1-C4烷氧基，其中所述C1-C4烷基任选地经1到3个氟原子取代且所述C1-C4烷氧基任选地经1到3个氟原子取代；
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3；
R4是氢、-F、-Cl、C1-C3烷基或环丙基，其中所述C1-C3烷基任选地经1到3个氟原子取代；
R5是氢或-CH3；
R6是氢、-F或-CH3；
R7的每一实例独立地为C1-C4烷基；且
R8的每一实例独立地为氢或C1-C4烷基。
在一些实施例中，X是氢。
在一些实施例中，X是-CN。
在一些实施例中，X是-SCH3、-SCH2CH3、-SO2CH2CH3、-SO2CH3或-SO2CF3。
在一些实施例中，X是-NO2。
在一些实施例中，X是-N(R7)(R8)。
在一些实施例中，X是-N(CH3)2、-NH(CH3)或-N(CH3)(CH2CH3)。
在一些实施例中，X是氟或氯。
在一些实施例中，X是C1-C4烷基。
在一些实施例中，X是-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2或-CH2CF2CF3。
在一些实施例中，X是C1-C4烷氧基。
在一些实施例中，X是-OCH3、-OCF3、-OCHF2或OCFH2。
在一些实施例中，X是C3-C6环烷基。
在一些实施例中，X是环丙基。
在一些实施例中，R1是氢。
在一些实施例中，R1是氟或氯。
在一些实施例中，R1是C1-C4烷基。
在一些实施例中，R1是-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2或-CF3。
在一些实施例中，R1是C1-C4烷氧基。
在一些实施例中，R1是-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，R1是-CN或-NO2。
在一些实施例中，R1是CO2R7。
在一些实施例中，R1是-CO2CH3或-CO2CH2CH3。
在一些实施例中，R1是-C(O)N(R7)(R8)。
在一些实施例中，R1是-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或-C(O)N(CH3)(CH2CH3)。
在一些实施例中，R1是C3-C6环烷基。
在一些实施例中，R1是环丙基。
在一些实施例中，R2是氢。
在一些实施例中，R2是氟或氯。
在一些实施例中，R2是C1-C4烷基。
在一些实施例中，R2是-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2或-CF3。
在一些实施例中，R2是环丙基。
在一些实施例中，R2是C1-C4烷氧基。
在一些实施例中，R2是-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，R3是氢。
在一些实施例中，R3是氟或氯。
在一些实施例中，R3是-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，R4是氢。
在一些实施例中，R4是氟或氯。
在一些实施例中，R4是-CH3。
在一些实施例中，R4是环丙基。
在一些实施例中，R5是氢。
在一些实施例中，R5是-CH3。
在一些实施例中，R6是氢。
在一些实施例中，R6是-CH3。
在一些实施例中，R6是氟。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(II)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(II)的一些实施例中，
X是氢、CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IIa)化学实体：
其中R1和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IIa)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(III)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(III)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IIIa)化学实体：
其中R1和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IIIa)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IIIb)化学实体：
其中R1和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IIIb)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IV)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IV)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IVa)化学实体：
其中R1和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IVa)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(IVb)化学实体：
其中R1和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(IVb)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(V)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(V)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(Va)化学实体：
其中R2和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(Va)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VI)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VI)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VIa)化学实体：
其中R2和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VIa)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VIb)化学实体：
其中R2和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VIb)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VII)化学实体：
其中R1、R2、X和R3中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VII)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；
R1是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2、-CN、-NO2、-CO2CH3、-CO2CH2CH3、-C(O)N(CH3)2、-C(O)NH(CH3)或环丙基；
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2；且
R3是氢、-F、-Cl、-CH3、-CF3或-OCH3。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VIIa)化学实体：
其中R2和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VIIa)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
在一些实施例中，式(I)化学实体是式(VIIb)化学实体：
其中R2和X中的每一者如式(I)的实施例(上文文献)中所描述或如本文实施例中所描述(二者单独和组合)。
在式(VIIb)的一些实施例中，
X是氢、-CN、-SCH3、-SO2CH3、-SO2CF3、-NO2、-N(CH3)2、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CF2CF3、-CH(CF3)2、-CH2CF2CF3、-OCH3、-OCF3、-OCHF2、-OCFH2或环丙基；且
R2是氢、-F、-Cl、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CF3、环丙基、-OCH3、-OCF3、-OCHF2或-OCFH2。
实例性式I化学实体显示于下表1.C到8.C中。
表1.C
表1.C
表1.C
表2.C
表2.C
表3.C
表3.C
表4.C
表4.C
表5.C
表5.C
表6.C
表7.C
表7.C
表8.C
表8.C
药理学
谷氨酸盐(GLU)是哺乳动物脑和中枢神经系统(CNS)中的基本兴奋神经递质。此内生性神经递质的作用是通过将GLU结合到谷氨酸盐受体(GLUR)并激活来调介，所述谷氨酸盐受体大致分为代谢型G蛋白偶联GluR(mGluR)和配体闸控型离子通道或离子型GluR。基于选择性受体激动剂的作用在药理学上将离子型GLUR分为3种主要类型：NMDA(N-甲基D-天冬氨酸选择性)、KA(海人酸选择性)和AMPA(α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异噁唑丙酸)受体，其结构和药理学功能最近已进行详细综述(S.F.特雷纳利斯(S.F.Traynelis)等人，药理学评论(Pharmacology Reviews)，2010,62,405-496)。电生理学研究已展示NMDAR为经受通过内生性Mg2+产生的电压依赖性通道阻断的阳离子离子通道。在存在甘氨酸作为协同激动剂的情况下通过谷氨酸盐激活NMDAR可打开受体离子通道。此进而允许Na+和Ca2+流入到细胞中，从而在神经元中生成兴奋性突触后电位(EPSP)和Ca2+激活的第二信使信号传导路径。通过对Ca2+的渗透性，NMDA受体的激活调控例如学习和记忆等神经元通讯和突触可塑性的长期变化。
自从用选择性配体进行初始药理学表征，分子生物学和克隆研究已使得能够在分子水平上详细表征NMDAR(保莱蒂(Paoletti)等人，2013，自然·评论：神经科学(Nat.Rev.Neurosci.)14:383-400)。因此，NMDAR为包含2个NR1亚单位和2个NR2亚单位的异四聚体。NR1亚单位含有针对甘氨酸协同激动剂的结合位点，而NR2亚单位含有针对谷氨酸盐的结合位点。来自不同基因的NR1的多个剪接变体和NR2的4种同种型(NR2A、NR2B、NR2C和NR2D)的存在产生NMDAR的不同分子阵列。NMDAR的药理学和电生理学性质根据特定NR1同种型和NR2亚型组成而有所变化。此外，NR2亚型同种型在细胞类型和脑区域间以不同方式表达。因此，与NR2亚单位相互影响选择性的化合物可在特定脑区域中发挥具体药理学作用且具有以较高程度的特异性和选择性治疗CNS疾病的潜能(例如vz副作用)。例如，NR2B亚型在小脑中相对于其它脑结构(库尔坎迪(Cull-Candy)等人，1998，神经药理学(Neuropharmacol.)37:1369-1380)的低表达指示针对此亚型较低的运动副作用。
已广泛研究NMDA受体拮抗作用治疗各种CNS疾病(包括中风、癫痫、疼痛、抑郁症、帕金森氏病(Parkinson’s Disease)和阿兹海默氏病(Alzheimer’s disease))的潜能(保莱蒂等人，自然·评论：神经科学14:383-400；圣可若(Sancora)，2008，自然·评论：药物发现(Nature Rev.Drug Disc.)，7,426-437)。NMDA受体提供多个用于研发受体抑制剂的药理学切入点。NMDAR离子通道孔的直接阻断剂代表一个可在不同体外和体内CNS疾病模型(包括癫痫、疼痛和神经变性/中风)中展示效能的拮抗剂化合物家族。然而，来自此类别的化合物(如由苯环利定(phencyclidine)(PCP)、MK-801和氯胺酮所例示)通常分类为跨越NMDA受体亚型的多样性的非选择性。
在人类中非选择性、高亲和力NMDAR拮抗剂通常与严重临床副作用(包括幻觉、烦躁和缺乏协调)相关。然而，氯胺酮(即最初经批准用于麻醉的静脉内药物)(哈斯(Haas)等人，1992，麻醉进展(Anesthesia Prog.)，39,61-68)最近已展示作为抗抑郁药疗法的临床效能(卡塔利尼奇(Katalinic)等人，2013，澳大利亚和新西兰精神病学杂志(Aust.N.Z.J.Psychiatry)，47,710-727)。与标准血清素再摄取抑制剂(SSRI)药物疗法所需要的大约6周相比，急性氯胺酮疗法的抗抑郁作用基本上立即起效。因此，药物的静脉内投与显示快速起效和可利用持续间歇投与维持的持久效能(萨拉特(Zarate)等人，2006，普通精神病学文献(Arch.Gen.Psychiatry)63,856-864)。最终，已显示氯胺酮在对标准药物疗法具有抗性的抑郁症(包括双相抑郁症(萨拉特等人，2012，生物精神病学(Biol.Psychiatry)，71,939-946))的情形下有效(穆尔(Murrough)等人，2013，美国精神病学杂志(American J.Psychiatry)，170,1134-1142)。然而，作为具有严重副作用(詹尼(Gianni)等人，1985，精神病医学(Psychiatric Medicine)，3,197-217；库兰(Curran)等人，2000，成瘾(Addiction)，95,575-590)和潜在慢性毒性(哈代(Hardy)等人，2012，临床肿瘤学杂志(J.Clin.Oncol.)30:3611-3617；诺普斯(Noppers)等人，2011，疼痛(Pain)152:2173-2178)的静脉内药物，氯胺酮疗法效用有限且受限于急性或间歇投与。为具有较宽应用范围和作为用于抑郁症和其它CNS疾病的疗法的效用，需要可慢性投与的具有减少的副作用的口服活性选择性NMDA拮抗剂。
已确定艾芬地尔(Ifenprodil)(即血管舒张剂α1-肾上腺素能拮抗剂药物)具有在NR2B>1-肾上腺素能活性最佳化的NR2B选择性拮抗剂类似物(保萨(Borza)等人，2006，药物化学当前论题(Current>
已如由B.鲁帕(B.Ruppa)等人(K.B.鲁帕等人，药物化学年度报告(AnnualReports in Medicinal Chemistry)，2012,47:89-103)所综述来描述的其它NR2B拮抗剂包括MK0657(J.A.麦考利(J.A.McCauley)等人，第3届英国-瑞典药物化学研讨会(3rd>瑞典(Sweden)，2007年3月11日-14日；L.莫尼(L.Mony)等人，英国药理学杂志(British J.of Pharmacology)2009,157:1301-1317；还参见国际专利公开案第WO 2004/108705号；美国专利第7,592,360号)和下式LX化合物(国际专利公开案第WO 2006/113471号)(包括下文所绘示的具体类似物LX-1)。
如由河合(Kawai)等人(M.河合等人，生物有机化学与药物化学通讯(Bioorganicand Medicinal Chem.Lett.)2007,v17:5533-5536)和布朗(Brown)等人(布朗等人，生物有机化学与药物化学通讯2011,v21:3399-3403)所述，已充分确定具有碱性胺部分的NR2B拮抗剂所呈现的在克服hERG和CYP2D6安全性责任同时维持NR2B体外和体内功效方面的困难。hERG通道的化合物抑制和心电图(ECG)的相关QT延长代表公认的严重人类心血管安全性风险(汉考克斯(Hancox)等人，分子药理学(Molecular Pharmacology)2008, 73:1592-1595)。QT延长可导致尖端扭转型(TdP)心律不整，其可变性成心室性心博过速和猝死。
包括CYP2D6的人类代谢细胞色素P-450酶的化合物抑制代表因药物-药物相互作用(药物代谢手册：概念和应用(Drug Metabolism Handbook：Concepts andApplications)，阿拉(Ala)F.纳萨尔(Nassar)编辑，版权2009约翰威立父子公司，霍博肯(Hoboken),NJ)导致的在人类药物安全性方面的风险。因此，可通过抑制CYP2D6的化合物来降低为CYP2D6的底物的药物的清除率。由于给定CYP2D6药物底物的累积所致，结果可为毒性或副作用超载。CNS药物(包括抗抑郁药物)在已确定CYP2D6底物中特别突出。因此，CYP2D6抑制对于NR2B拮抗剂药物来说极不需要，尤其考虑到复方投药法或多种药物疗法在CNS适应症(包括抑郁症)中的常见应用时如此。CY2D6底物的实例包括来自SSRI类别的抗抑郁药(例如氟西汀(fluoxetine)、帕罗西汀(paroxetine)和氟伏沙明(fluvoxamine))、度洛西汀(duloxetine)、来自SSNI类别的抗抑郁药、多种抗精神病药物(包括氟哌啶醇(haloperidol)、利培酮(risperidone)和阿立哌唑(aripiperazole))、多种β-阻断剂抗高血压药物(包括美托洛尔(metaprolol)、普萘洛尔(propranolol)、噻吗洛尔(timolol)和阿普洛尔(alprenolol))和阿兹海默氏病抗胆碱酯酶抑制剂药物多奈派齐(donepezil)(弗洛克哈特(Flockhart)DA(2007).“药物相互作用：细胞色素P450药物相互作用表(DrugInteractions：Cytochrome P450Drug Interaction Table)”，印第安纳大学医学院(Indiana University School of Medicine)，在2014年5月28日可于<<http://medicine.iupui.edu/clinpharm/ddis/>>获得)。
MK0657和紧密相关的类似物(利物顿(Liverton)等人，药物化学杂志2007,v50:807-819)代表一代在人类经口生物利用度方面经改良的NR2B拮抗剂。然而，已在患有帕金森氏病的患者中的公开临床效能试验研究中描述MK0657在经口投药后的药物相关收缩压以及舒张压升高心血管副作用(艾迪(Addy)等人，临床药学杂志(J.Clin.Pharm.)2009,v49:856-864)。据报道在健康老年个体的安全性研究中单一剂量的MK0657后也观测到类似血压作用。化合物LX-1展示在动物中的经口生物利用度且缺乏可使在人类中的经口生物利用度受损的酚基。然而，如本文所述，具有碱性哌啶氮原子的化合物LX-1展现IC50<10μM(约4.5μM)的人类hERG通道抑制，并展现人类CYP2D6代谢酶抑制活性(IC50为约1.0μM)。
为了较宽应用范围和安全人类使用，需要经改良的NR2B选择性拮抗剂，如最新综述(K.B.鲁帕等人，药物化学年度报告2012,47:89-103)中所述。业内需要在由药物动力学、吸收、代谢、排泄(ADME，例如经口活性)、经改良效能、脱靶活性、经改良相对治疗安全性指标和与慢性经口疗法的相容性例示的一或多个方面经改良的NR2B拮抗剂化合物。
所提供的化学实体是NR2B受体的拮抗剂并具有在一或多种医药药物性质方面的技术优点，例如经口生物利用度、药物动力学参数、ADME性质(例如，CYP抑制)、心脏离子通道(例如，hERG)活性和其它非NMDA脱靶副作用介导受体。在一些实施例中，本发明涵盖如下发现：所提供的化学实体可展现较低的人类CYP2D6抑制和/或较低的hERG抑制，同时展现强效人类NR2B受体抑制拮抗作用，且因此有利于在人类中应用。
在一些实施例中，所提供的化学实体具有相对于NR2A的NR2B功能性NMDA受体选择性(“NR2B选择性”，测定为比率NR2A>50/NR2B>50，其中IC50值是根据实例2.1的程序来测量)≥300。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B选择性≥250。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B选择性≥200。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B选择性≥150。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B选择性≥100。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B选择性≥50。
在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG活性(测定为根据实例2.2的程序测量的hERG>50)≥5μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG>50≥10μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG>50≥15μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG>50≥20μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG>50≥25μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有hERG>50≥30μM。
在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B功能拮抗剂活性(测定为根据实例2.1的程序测量的NR2B>50)≤100nM和hERG活性(测定为根据实例2.2的程序测量的hERGIC50)≥5μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和hERG>50≥10μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和hERG>50≥15μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和hERG>50≥20μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和hERG>50≥25μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和hERG>50≥30μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和hERG>50≥5μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2BIC50≤50nM和hERG>50≥10μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和hERG>50≥15μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和hERG>50≥20μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和hERG>50≥25μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和hERG>50≥30μM。
在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B功能拮抗剂活性(测定为根据实例2.1的程序测量的NR2B>50)≤100nM和CYP2D6抑制(测量为根据实例2.3的程序测定的CYP2D6IC50)≥2μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和CYP2D6IC50≥3μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和CYP2D6IC50≥4μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和CYP2D6IC50≥5μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和约5μM到10μM的CYP2D6IC50。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤100nM和CYP2D6IC50≥10μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和CYP2D6IC50≥2μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和CYP2D6IC50≥3μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和CYP2D6IC50≥4μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2BIC50≤50nM和CYP2D6IC50≥5μM。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和约5μM到10μM的CYP2D6IC50。在一些实施例中，所提供的化学实体具有NR2B>50≤50nM和CYP2D6IC50≥10μM。
用途、调配物和投与以及医药上可接受的组合物
在一些实施例中，本发明提供组合物，其包含本发明化学实体或其医药上可接受的衍生物和医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂。本发明组合物中化学实体的量使得可有效地显著抑制生物样品或患者中的NR2B。在一些实施例中，本发明组合物中化学实体的量使得可有效地显著抑制生物样品或患者中的NR2B。在一些实施例中，本发明组合物经调配用于投与需要所述组合物的患者。在一些实施例中，本发明组合物经调配用于经口投与患者。
如本文所用术语“患者”意指动物，优选地哺乳动物，且最优选地人类。
术语“医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂”是指不会破坏调配所用化学实体的药理学活性的无毒载剂、佐剂或媒剂。可用于本发明组合物中的医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂包括离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、血清蛋白(例如人类血清白蛋白)、缓冲物质(例如磷酸盐)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、胶质二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。
“医药上可接受的衍生物”意指在投与受试者后能够直接或间接提供本发明化学实体或其抑制性活性代谢物或残余物的本发明化学实体的任一无毒酯、酯盐或其它衍生物。
如本文所用术语“其抑制性活性代谢物或残余物”意指其代谢物或残余物也是NR2B的抑制剂。
本发明组合物可经口、非经肠、通过吸入喷雾、经局部、经直肠、经鼻、经颊、经阴道或通过植入型储药器投与。如本文所用术语“非经肠”包括皮下、静脉内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、肝内、病灶内和颅内注射或输注技术。优选地，经口、腹膜内或静脉内投与组合物。本发明组合物的无菌可注射形式可为水性或油性悬浮液。这些悬浮液可根据业内已知技术使用适宜的分散或湿润剂和悬浮剂进行调配。无菌可注射制剂也可为于无毒非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或悬浮液，例如呈于1,3-丁二醇中的溶液形式。可用的可接受媒剂和溶剂尤其是水、林格氏溶液(Ringer’s solution)和等渗氯化钠溶液。此外，通常采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。
出于此目的，可采用任何温和不挥发性油，包括合成单酸甘油酯或二酸甘油酯。脂肪酸(例如油酸和其甘油酯衍生物)可用于制备可注射物，如同天然的医药上可接受的油一般，例如橄榄油或蓖麻油，其尤其呈其聚氧乙烯化形式。这些油溶液或悬浮液也可含有长链醇稀释剂或分散剂，例如羧甲基纤维素或类似分散剂，其通常用于调配包括乳液和悬浮液在内的医药上可接受的剂型。也可将其它常用表面活性剂(例如吐温(Tween)、司盘(Span)和通常用于制造医药上可接受的固体、液体或其它剂型的其它乳化剂或生物利用度增强剂)用于调配目的。
本发明的医药上可接受的组合物可以任何经口可接受剂型经口投与，所述剂型包括胶囊、片剂、水性悬浮液或溶液。在供口服使用的片剂的情形下，常用载剂包括乳糖和玉米淀粉。通常还添加润滑剂，例如硬脂酸镁。对于以胶囊形式经口投与来说，有用稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。在需口服使用水性悬浮液时，可将活性成份与乳化剂和悬浮剂组合。若需要，还可添加某些甜味剂、调味剂或着色剂。
或者，本发明的医药上可接受的组合物可以直肠投与的栓剂形式来投与。这些组合物可通过将药剂与适宜非刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在环境温度下为固体但在直肠温度下为液体，且因此可在直肠中融化而释放药物。所述材料包括可可脂、蜂蜡和聚乙二醇。
本发明的医药上可接受的组合物也可经局部投与，尤其在治疗靶包括可通过局部施用易于达到的区域或器官(包括眼睛、皮肤或下肠道的疾病)时。易于制备针对这些区域或器官中的每一者的适宜局部调配物。
可以直肠栓剂调配物(参见上文)或适宜灌肠调配物来实现下肠道的局部施用。也可使用局部经皮贴片。
对于局部施用，可将所提供的医药上可接受的组合物调配于含有悬浮或溶解于一或多种载剂中的活性组份的适宜软膏中。用于局部投与本发明化合物的载剂包括矿物油、液体矿脂、白矿脂、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可将所提供的医药上可接受的组合物调配于含有悬浮或溶解于一或多种医药上可接受的载剂中的活性组份的适宜洗剂或乳膏中。适宜载剂包括矿物油、山梨醇酐单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡基酯蜡、鲸蜡硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
对于眼部使用，可将所提供的医药上可接受的组合物调配为于等渗、pH经调节的无菌盐水中的微粒化悬浮液，或优选地调配为于等渗、pH经调节的无菌盐水中的溶液，其含或不含防腐剂，例如氯苄烷铵。或者，对于眼部使用，可将医药上可接受的组合物调配于软膏(例如矿脂)中。
也可通过经鼻气溶胶或吸入来投与本发明的医药上可接受的组合物。所述组合物是根据医药调配领域熟知的技术来制备，且可将其制备为盐水溶液，其采用苯甲醇或其它适宜防腐剂、吸收促进剂(用于增强生物可用度)、碳氟化合物和/或其它常规增溶剂或分散剂。
最优选地，本发明的医药上可接受的组合物经调配用于经口投与。所述调配物可与或不与食物一起投与。在一些实施例中，本发明的医药上可接受的组合物不与食物一起投与。在其它实施例中，本发明的医药上可接受的组合物是与食物一起投与。
本发明化合物的可与载剂材料组合以产生呈单一剂型的组合物的量将根据多种因素而变化，包括所治疗宿主和特定投与模式。优选地，所提供的组合物应经调配，以使得可向接受这些组合物的患者投与介于0.01mg/kg体重/天到100mg/kg体重/天的抑制剂之间的剂量。
也应了解，用于任一特定患者的具体剂量和治疗方案可取决于多种因素，包括所采用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、投与时间、排泄速率、药物组合和治疗医师的判断以及所治疗特定疾病的严重程度。组合物中本发明化合物的量也将取决于所述组合物中的特定化合物。
化学实体和医药上可接受的组合物的用途
NR2B受体拮抗剂的人类治疗应用已汇总于以下综述中：特雷纳利斯等人(S.F.特雷纳利斯等人，药理学评论，2010,62:405-496)、贝纳特(Beinat)等人(C.贝纳特等人，当前药物化学(Current Medicinal Chemistry)，2010,17:4166-4190)和莫尼等人(L.莫尼等人，英国药理学杂志，2009,157:1301-1317)。NR2B的拮抗作用可用于治疗多种疾病和病症，包括抑郁症、疼痛、帕金森氏病、亨廷顿氏病(Huntington’s disease)、阿兹海默氏病、大脑缺血、创伤性脑损伤、癫痫和偏头痛。
可在体外或体内分析在本发明中用作NR2B的拮抗剂或中枢神经系统(CNS)疾病或病症的治疗的化学实体的活性。可使用CNS疾病或病症的动物模型(例如啮齿类动物或灵长类动物模型)进行本发明化合物的效能的体内评价。可使用例如自组织分离的表达NR2B的细胞系或重组表达NR2B的细胞系执行基于细胞的分析。另外，可执行生物化学或基于机制的分析，例如测量cAMP或cGMP水平、北方墨点(Northern blot)、RT-PCR等。体外分析包括测定细胞形态、蛋白质表达和/或细胞毒性、酶抑制活性和/或利用本发明化学实体治疗细胞的后续功能结果的分析。代替体外分析量化抑制剂结合到细胞内的蛋白质或核酸分子的能力。抑制剂结合可通过在结合之前对抑制剂进行放射性标记、分离抑制剂/靶分子复合物和测定所结合放射性标记的量来测量。或者，抑制剂结合可通过运行竞争实验来测定，其中将新抑制剂与结合到已知放射性配体的经纯化蛋白质或核酸一起培育。分析在本发明中用作NR2B的拮抗剂的化合物的详细条件陈述于下文实例中。上述分析具有实例性且并不打算限制本发明范围。所属领域技术人员可了解，可对常规分析作出修改以研发获得相同结果的等效分析。
如本文所用术语“治疗(treatment、treat和treating)”是指逆转、减轻、延迟疾病或病症或其一或多种症状的发作或抑制其进展，如本文所描述。在一些实施例中，治疗可在已罹患一或多种症状后投与。在其它实施例中，治疗可在不存在症状下投与。例如，治疗可在症状发作前(例如，根据症状的历史和/或根据遗传或其它易感因素)投与易感个体。治疗也可在已消退症状后继续进行以例如预防或延迟其复发。
所述化学实体和组合物可根据本发明方法使用可有效治疗或减轻CNS疾病或病症的严重程度的任何量和任何投与途径来投与。
在一些实施例中，所述化学实体和组合物可根据本发明方法使用可有效治疗或减轻与NR2B相关的疾病或病症的严重程度的任何量和任何投与途径来投与。
在一些实施例中，所述化学实体和组合物可根据本发明方法使用可有效治疗或减轻CNS疾病或病症的严重程度的任何量和任何投与途径来投与。
在一些实施例中，所述疾病或病症是伴随或不伴随焦虑症的抑郁症，例如单次发作和复发性抑郁病症、神经官能性抑郁症、治疗抗性抑郁症(TRD，即对其它药物疗法不具反应的重度抑郁病症)。
在一些实施例中，所述疾病或病症是急性情感病症，例如选自双相情感病症，包括双相I型和双相II型躁狂病症。
在一些实施例中，所述疾病或病症是疼痛，例如选自由多种来源(包括炎症、神经损伤、糖尿病神经病变和疱疹后神经痛)造成的疼痛状态。在一些实施例中，所述疾病或病症与顽固性疼痛相关，例如偏头痛、纤维肌痛和三叉神经痛。
在一些实施例中，所述疾病或病症选自睡眠病症和其后遗症，包括失眠、嗜睡病和自发性睡眠过多。
在一些实施例中，所述疾病或病症选自特征在于神经元兴奋过度的CNS病症，例如癫痫、抽搐和其它痉挛病症。
在一些实施例中，所述疾病或病症是帕金森氏病。
在一些实施例中，所述疾病或病症是亨廷顿氏病。
在一些实施例中，所述疾病或病症是与包括以下在内的病症相关的认知功能障碍：精神分裂症、阿兹海默氏病、额颞叶失智症、匹克氏病(Pick’s disease)、路易氏体病(Lewy body disease)和其它老年性失智症(例如，血管型失智症)。
在一些实施例中，本发明提供治疗本文所述病症的方法，其包含连同一或多种医药剂一起投与本发明化学实体。可与本发明化学实体组合使用的适宜医药剂包括选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)，例如用于治疗抑郁症；多巴胺(dopamine)代替疗法方案和多巴胺激动剂，例如用于治疗帕金森氏病；典型抗精神病药物；非典型抗精神病药物；抗痉挛剂；刺激剂；阿兹海默氏病疗法；抗偏头痛剂；和抗焦虑剂。
适宜SSRI包括西酞普兰(citalopram)、达泊西汀(dapoxetine)、依地普仑(escitalopram)、氟西汀、氟伏沙明、吲达品(indalpine)、帕罗西汀、舍曲林(sertraline)、维拉佐酮(vilazodone)和齐美利定(zimelidine)。
适宜多巴胺代替疗法方案包括用DOPA脱羧酶抑制剂(例如卡比多巴(carbidopa))代替L-DOPA。
适宜多巴胺受体激动剂包括阿林多尔(aplindore)、阿扑吗啡(apomorphine)、溴隐亭(bromocriptine)、卡麦角林(cabergoline)、西拉多巴(ciladopa)、二氢麦角隐亭(dihydroergocryptine)、麦角乙脲(lisuride)、帕多芦诺(pardoprunox)、培高利特(pergolide)、吡贝地尔(piribedil)、普拉克索(pramipexole)、罗匹尼罗(ropinirole)和罗替戈汀(rotigotine)。
适宜典型抗精神病药物包括氯丙嗪(chlorpromazine)、硫利达嗪(thioridazine)、美索达嗪(mesoridazine)、左美丙嗪(levomepromazine)、洛沙平(loxapine)、吗茚酮(molindone)、佩吩嗪(perphenazine)、氨砜噻吨(thiothixene)、三氟拉嗪(trifluoperazine)、氟哌啶醇(haloperidol)、氟奋乃静(fluphenazine)、氟哌利多(droperidol)、珠氯噻醇(zuclopenthixol)、氟哌噻吨(flupentixol)和普鲁氯嗪(prochlorperazine)。
适宜非典型抗精神病药物包括氨磺必利(amisulpride)、阿立哌唑(aripiprazole)、阿森奈平(asenapine)、布南色林(blonanserin)、氯噻平(clotiapine)、氯扎平(clozapine)、伊洛培酮(iloperidone)、鲁拉西酮(lurasidone)、莫沙帕明(mosapramine)、奥氮平(olanzapine)、帕潘立酮(paliperidone)、哌罗匹隆(perospirone)、喹硫平(quetiapine)、瑞莫必利(remoxipride)、利培酮(risperidone)、舍吲哚(sertindole)、舒必利(sulpiride)、齐拉西酮(ziprasidone)、佐替平(zotepine)、联苯芦诺(bifeprunox)、匹莫范色林(pimavanserin)和戊卡色林(vabicaserin)。
适宜抗痉挛剂包括卡巴马平(carbamazepine)、乐命达锭(lamotrigine)、托吡酯(topiramate)和双丙戊酸钠(divalproex)。
适宜刺激剂包括阿得拉(Adderall)(安非他命(amphetamine)、右苯丙胺(dextroamphetamine)混合盐)、派醋甲酯(methylphenidate)、右苯丙胺、右哌甲酯(dexmethylphenidate)和赖右苯丙胺(lisdexamfetamine)。
适宜阿兹海默氏病疗法包括乙酰胆碱酯酶抑制剂，例如利凡斯的明(rivastigmine)、多奈派齐(donepezil)、加兰他敏(galanthamine)和石杉碱甲(huperazine)；α-7烟碱激动剂，例如恩森斯林(encenicline)；和减少Aβ42的药物，例如BACE抑制剂、γ分泌酶调节剂和β类淀粉肽抗体。
适宜抗偏头痛药物包括麦角胺(ergotamine)和例如舒马普坦(sumitriptan)等5-HT1D激动剂曲普坦(triptan)。
适宜抗焦虑药物包括苯并二氮呯受体调节剂，例如安定(diazepam)、阿普唑仑(alprazolam)、氯羟安定(lorazepam)和氯硝西泮(clonazepam)。
连同本发明化学实体一起使用的其它适宜药剂包括美金刚(memantine)和莫达非尼(modafinil)。
根据个体的物种、年龄和一般状况、感染严重程度、特定药剂、其投与模式等，所需确切量可随个体而变化。本发明化学实体优选地调配为剂量单位形式以便于投与和统一剂量。本文所用表述“剂量单位形式”是指适于欲治疗患者的药剂的物理离散单位。然而，应理解，本发明的化学实体和组合物的总日用量将由主治医师在合理医学判断范围内决定。任一特定患者或生物体的具体有效剂量水平将取决于多种因素，包括所治疗病症和病症的严重程度；所用具体化学实体的活性；所用具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所用具体化学实体的投与时间、投与途径和排泄速率；治疗持续时间；与所用具体化学实体组合或同时使用的药物；和医疗技术中熟知的类似因素。如本文所用术语“患者”意指动物，优选地哺乳动物，且最优选地人类。
根据所治疗感染的严重程度，本发明的医药上可接受的组合物可以下列方式投与人类和其它动物：经口、经直肠、非经肠、脑池内、阴道内、腹膜内、经局部(如通过粉剂、软膏或滴剂形式)、经颊(如经口喷雾或鼻喷雾)等。在某些实施例中，本发明的化学实体可以约0.01mg/kg个体体重/天到约50mg/kg个体体重/天且优选地约1mg/kg个体体重/天到约25mg/kg个体体重/天的剂量水平每天一或多次经口或非经肠投与，以获得所需治疗作用。
用于经口投与的液体剂型包括医药上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除活性化合物以外，液体剂型可含有业内常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特定来说，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和山梨糖醇酐的脂肪酸酯和其混合物。除惰性稀释剂外，经口组合物还可包括佐剂，例如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
可注射制剂(例如无菌可注射水性或油性悬浮液)可根据已知技术使用适宜的分散或润湿剂和悬浮剂来调配。无菌可注射制剂也可为于无毒非经肠可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液、悬浮液或乳液，例如呈于1,3-丁二醇中的溶液形式。可用的可接受媒剂和溶剂尤其是水、林格氏溶液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。此外，通常采用无菌不挥发性油作为溶剂或悬浮介质。出于此目的，可采用任何温和不挥发性油，包括合成单酸甘油酯或二酸甘油酯。此外，可使用例如油酸等脂肪酸来制备可注射物。
可注射调配物可例如通过细菌截留过滤器过滤或通过纳入灭菌剂来进行灭菌，所述灭菌剂呈可在使用前溶解或分散于无菌水或其它无菌可注射介质中的无菌固体组合物形式。
为延长本发明化学实体的作用，通常需要自皮下或肌内注射来减缓所述化学实体的吸收。此可通过使用具有较差水溶性的结晶或非晶形材料的液体悬浮液来实现。因此，化学实体的吸收速率取决于其溶解速率，且此溶解速率进而可取决于晶体大小和结晶形式。或者，通过将化学实体溶解或悬浮于油媒剂中来实现非经肠投与的化学实体形式的延迟吸收。通过在生物可降解聚合物(例如聚乳酸-聚甘醇酸)中形成化学实体的微囊基质来制备可注射储积形式。根据化学实体与聚合物的比率和所用特定聚合物的性质，可控制化学实体的释放速率。其它生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。储积可注射调配物也可通过将化学实体装入与身体组织相容的脂质体或微乳液中来制备。
用于直肠或阴道投与的组合物优选地为栓剂，其可通过将本发明化学实体与适宜非刺激性赋形剂或载剂(例如可可油、聚乙二醇或栓剂蜡)混合来制备，所述赋形剂或载剂在环境温度下为固体但在体温下为液体，且因此可在直肠或阴道腔内融化并释放活性化学实体。
经口投与的固体剂型包括胶囊、片剂、丸剂、粉剂和颗粒。在所述固体剂型中，将活性化学实体与以下物质混合：至少一种医药上可接受的惰性载剂，例如柠檬酸钠或磷酸二钙和/或a)填充剂或增量剂，例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；b)粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶(acacia)；c)保湿剂，例如甘油；d)崩解剂，例如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；e)溶液阻滞剂，例如石蜡；f)吸收促进剂，例如季铵化合物；g)润湿剂，例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯；h)吸收剂，例如高岭土和膨润土；以及i)润滑剂，例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠，和其混合物。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，所述剂型也可包含缓冲剂。
在使用例如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用类似类型的固体组合物作为填充剂。片剂、糖衣锭、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型可制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣和医药调配领域熟知的其它包衣。其可任选地含有遮光剂且也可为任选地以延迟方式仅或优先在肠道的某一部分中释放活性成份的组合物。可用包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。在使用例如乳糖(lactose或milk sugar)以及高分子量聚乙二醇等赋形剂的软质和硬质填充明胶胶囊中，也可采用类似类型的固体组合物作为填充剂。
活性化学实体也可呈具有一或多种如上文所述赋形剂的微囊封形式。片剂、糖衣锭、胶囊、丸剂和颗粒的固体剂型可制备有包衣和外壳，例如肠溶包衣、释放控制包衣和医药调配领域熟知的其它包衣。在所述固体剂型中，可将活性化学实体与至少一种惰性稀释剂(例如蔗糖、乳糖或淀粉)混合。所述剂型除惰性稀释剂以外也可包含额外物质(如同正常实践一般)，例如压片润滑剂和其它压片助剂(例如硬脂酸镁和微晶纤维素)。在胶囊、片剂和丸剂的情形下，所述剂型也可包含缓冲剂。其可任选地含有遮光剂且也可为任选地以延迟方式仅或优先在肠道的某一部分中释放活性成份的组合物。可用包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。
用于局部或经皮投与本发明化学实体的剂型包括软膏、膏糊、乳膏、洗剂、凝胶、粉剂、溶液、喷雾剂、吸入剂或贴片。若需要，可在无菌条件下将活性化学实体与医药上可接受的载剂和任何所需防腐剂或缓冲剂混合。眼用调配物、滴耳剂和滴眼剂也涵盖于本发明的范围内。此外，本发明涵盖使用经皮贴片，其具有提供化学实体到身体的受控递送的额外优点。所述剂型可通过将化学实体溶解或分散于适当介质中来制备。也可使用吸收增强剂来增加化学实体透过皮肤的通量。可通过提供速率控制膜或通过将化学实体分散于聚合物基质或凝胶中来控制速率。
如本文所用术语“组合(combination、combined)”和相关术语是指依照本发明同时或依序投与治疗剂。例如，本发明化学实体可与另一治疗剂于单独单位剂型中同时或依序投与或于单一单位剂型中一起投与。因此，本发明提供包含式I化学实体、额外治疗剂和医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂的单一单位剂型。
所提供化学实体和额外治疗剂(在如上文所述包含额外治疗剂的那些组合物中)二者可与载剂材料组合产生单一剂型的量将根据所治疗宿主和特定投与模式而变化。优选地，本发明组合物应经调配，以使得可投与介于0.01mg/kg体重/天到100mg/kg体重/天之间的剂量的所提供化学实体。
在包含额外治疗剂的那些组合物中，所述额外治疗剂和本发明化学实体可协同作用。因此，所述组合物中额外治疗剂的量将小于仅利用所述治疗剂的单一疗法中所需的量。在所述组合物中，可投与介于0.01μg/kg体重/天到100μg/kg体重/天之间的剂量的额外治疗剂。
存在于本发明组合物中的额外治疗剂的量将不超过在包含所述治疗剂作为唯一活性剂的组合物中正常投与的量。优选地，本文所揭示组合物中额外治疗剂的量将在包含所述药剂作为唯一治疗活性剂的组合物中所正常存在量的约50％到100％范围内。
在一些实施例中，本发明提供包含至少一种式I化学实体和医药上可接受的载剂、佐剂或媒剂的药剂。
在一些实施例中，本发明提供式I化学实体的用途，其用于制造用以治疗CNS疾病或病症的药剂。
一般合成方法
式I化学实体可根据方案1或方案2和/或使用业内已知方法来合成。
方案1
a.碱(例如二异丙基乙胺)、有机溶剂(例如正丁醇)、热 b.可选官能团转化 c.移除Z保护基团(例如对于Z＝THP为HCl)
在方案1中所绘示的方法中，在第一步骤中，可通过通式XI的吡啶中间体(其中X’、R1’、R2’和R3’是如上文针对X、R1、R2和R3所定义，或独立地为其经适当遮蔽等效物)对通式X中间体(其中Z是氢或适宜保护基团(例如THP(2-四氢吡喃基))且R4、R5和R6是如上文所定义)的哌啶氮烷基化来制备式XII化合物。通式XI的烷基化中间体中的Y基团代表例如卤素(氯、溴或碘)等阴离子离去基团或例如甲磺酸根、甲苯磺酸根、三氟甲磺酸根(OSO2CF3)或全氟丁磺酸根(OSO2CF2CF2CF2CF3)等磺酸根基团。烷基化反应可在适宜质子(例如异丙醇、正丁醇)或非质子(例如CH2Cl2、DMF、DMSO、CH3CN)溶剂中在环境到160℃、优选地50℃与100℃之间的温度(例如40℃到80℃)下在适宜碱(例如三乙胺、二异丙基乙胺)存在下实施。在式X中间体具有Z＝H且式XI中间体中的X’、R1’、R2’和R3’是如上文针对X、R1、R2和R3所定义的情形下，式XII的烷基化产物是式I化合物。或者，在一或多个可选步骤中，含有一或多个X’、R1’、R2’或R3’取代基作为经适当遮蔽基团的式XII化合物可使用业内已知方法转化以产生其中X、R1、R2和R3是如上文所定义的式XIII化合物(例如针对其中X’＝NO2的式XII化合物，氢化步骤产生其中X＝NH2的式XIII化合物)。其中Z是保护基团的式XIII中间体可使用业内已知方法(例如当Z＝THP保护基团时，使用适宜有机溶剂中的HCl水溶液)转化成式I化合物。
合成式I化合物的代替方法绘示于方案2中。
方案2
a.碱或布赫瓦尔德反应(Buchwald reaction)介导的胺偶合反应条件 b.可选步骤，例如官能团转化和移除Z保护基团 c.碱、R5X>
在第一步骤中，式XX中间体(其中式XI中间体中的X’、R1’、R2’和R3’是如上文针对X、R1、R2和R3所定义或独立地为其经适当遮蔽等效物)与式XXI的吡唑并嘧啶中间体(其中Z是氢或适宜保护基团，R4是如上文所定义且Y是适宜离去基团)的碱或布赫瓦尔德反应介导的偶合产生式XXII化合物。在某些情形下，碱介导的偶合是适宜的且可在有机溶剂(例如NMP、DMF、DMSO、CH3CN)中在50℃到180℃、优选地70℃与120℃之间的温度下在适宜叔胺碱(例如三乙胺、二异丙基乙胺)存在下实施。在某些情形下，使用钯催化剂的布赫瓦尔德条件可用于所述偶合反应。为制备其中R5是甲基的式XIII中间体，可用适宜碱(例如NaH)在适宜非质子有机溶剂(例如DMF)中处理式XXII化合物，然后在适宜温度下添加甲基化试剂(例如碘甲烷或硫酸二甲酯)。可使用业内已知方法(例如当Z＝THP保护基团时，使用适宜有机溶剂中的HCl水溶液)将其中Z是保护基团的式XIII中间体转化成式I化合物。
通式XI的中间体吡啶(其中X’、R1’、R2’和R3’是如上文针对X、R1、R2和R3所定义或独立地为其经适当遮蔽等效物)可根据方案3和/或使用业内已知方法合成。
方案3
a.Cu、DMSO 80℃ b.NaBH4、EtOH>2O、Et2O、DIPEA>
式XXXI的起始2-溴或2-氯吡啶可购得，或使用业内已知方法、例如通过山德迈尔(Sandmeyer)反应自相应2-氨基吡啶合成。式XXXI化合物与2,2-二氟-2-碘乙酸乙酯在升高温度下在无水DMSO中的铜介导偶合产生通式XXXII中间体。在适当条件(例如使用乙醇中的硼氢化钠)下的后续酯基团还原产生通式XXXIII的相应醇。通式XXXIII化合物中的醇基团可使用业内已知方法转化成适宜离去基团(例如碘离子或三氟甲烷磺酸根)。例如，在0℃下在含有N,N-二异丙基乙胺的醚溶剂中利用三氟甲磺酸酐处理可用于制备式XI的三氟甲烷磺酸酯(Y＝OSO2CF3)。式XI中间体对式XXXIV的4-Boc氨基哌啶的烷基化产生式XX化合物。所述烷基化反应可在适宜非质子(例如CH2Cl2、DMF、DMSO、CH3CN)溶剂中在-10℃到100℃的温度(优选地0℃到80℃)下在适宜碱(例如三乙胺、二异丙基乙胺)存在下实施。
通式X中间体(其中X’、R1’、R2’和R3’是如上文针对X、R1、R2和R3所定义或独立地为经适当遮蔽等效物)可根据方案4和/或使用业内已知方法合成。
方案4
a.碱或布赫瓦尔德反应介导的胺偶合反应条件 b.使用烷基化条件(例如碱、R5I)可选引入R5基团>2/Pd-C/EtOH移除Cbz
在第一步骤中，式L的起始经4-氨基-N-苄基氧基羰基保护的哌啶可与式XXI中间体在碱或布赫瓦尔德反应条件下偶合，以获得通式LI中间体。在可选第二步骤中，可通过烷基化反应引入R5基团，以获得其中R5不为氢的通式LII中间体。在最后步骤中，可通过催化氢化或业内已知的代替方法移除Cbz保护基团，以获得通式X中间体。
其中R4是C1-C3烷基或环丙基的通式XXI中间体可根据方案5和/或使用业内已知方法合成。
方案5
a.R4MgBr、醚>2Cl2、p-TsOH
在第一步骤中，使4,6-二氯嘧啶-5-甲醛与格任亚(Grignard)试剂(例如R4MgBr，如将使用业内已知条件自相应溴化物R4Br衍生而来)反应，以获得通式LIII醇。在业内已知用于自苄基仲醇例如使用戴斯-马丁(Dess>2或CrO3制备酮的条件下氧化式LIII中间体获得式LIV中间体。用肼处理式LIV中间体获得通式XXI化合物，其中R4是C1-C3烷基或环丙基且Z是氢。后者可利用二氢吡喃在非质子有机溶剂(例如CH2Cl2)中用酸催化剂(例如对甲苯磺酸)处理，以获得通式XXI化合物，其中R4是C1-C3烷基或环丙基且Z是四氢吡喃基保护基团。
实例
如下文实例中所绘示，在某些实例性实施例中，根据以下程序制备化学实体。应了解，尽管一般方法绘示某些本发明化学实体的合成，但以下方法和所属领域技术人员已知的其它方法可适用于所有化学实体和这些化学实体中每一者的子类和种类，如本文所述。
温度是以摄氏度给出。若无另外说明，则所有蒸发均是在优选地介于约15mmHg与100mmHg之间的减压下执行。中间体和最终产物的结构是通过标准分析方法(例如质谱和NMR光谱法)来证实。
缩写：
aq 水性
Boc叔丁氧基羰基
Cbz苄基氧基羰基
DCM二氯甲烷
DCE1,2-二氯乙烷
DIPEAN,N-二异丙基乙胺
DMFN,N-二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
Et2O>
EtOAc乙酸乙酯
EtOH 乙醇
eq 当量
h小时
HPLC 高效液相色谱
LC 液相色谱
Me 甲基
MS 质谱
MS(ESI)质谱电喷雾离子化
NMPN-甲基-2-吡咯烷酮
NMR核磁共振
PEG聚乙二醇
rt 室温
Tf 三氟甲磺酸酯
Tf2O>
TFAA 三氟乙酸酐
THF四氢呋喃
TLC薄层色谱
实例1.化学实体.
实例1.A.中间体.
实例1.A.1.中间体1：4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶
向异嘌呤醇(2.0g,15mmol)于甲苯(20mL)中的悬浮液中添加POCl3(7mL,74mmol)和DIPEA(6mL,32mmol)。将混合物加热到85℃同时搅拌2hr。使混合物冷却，浓缩到一半体积并倾倒到2M>2HPO4(200mL)中。在室温下将混合物搅拌过夜并过滤。用EtOAc洗涤滤块，且用EtOAc萃取滤液。用盐水洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥并浓缩，以提供浅橙色粉末状标题化合物(1.6g,70％)。对于C5H3ClN4，MS(ESI)计算值：154.0；观测值：155[M+H]。1H>
实例1.A.2.中间体2：4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶
向4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(35g,226mmol)于THF(1L)中的溶液中添加二氢吡喃(31mL,340mmol)和p-TsOH.H2O(4.3g,22.6mmol)。将溶液加热到回流。在搅拌1h后，添加另一批二氢吡喃(16mL,175mmol)。再搅拌1h后，将溶液浓缩并通过硅胶上的柱色谱(DCM/EtOAc＝2％到10％)纯化，以提供白色粉末状标题化合物(50g,90％)。对于C10H11ClN4O，MS(ESI)计算值：238；观测值：239[M+H]。1H>3)δ8.80(s,1H),8.20(s,1H),6.11-5.99(m,1H),4.16-4.05(m,1H),3.85-3.74(m,1H),2.69-2.57(m,1H),2.24-2.11(m,1H),2.05-1.94(m,1H),1.87-1.71(m,2H),1.71-1.59(m,1H)。
实例1.A.3.中间体3：N-(哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺
步骤1：4-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)-哌啶-1-甲酸苄基酯
在N2气氛下，将4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(5.0g,21mmol)、4-氨基哌啶-1-甲酸苄基酯(5.9g,25mmol)和DIPEA(7.5g,43mmol)于异丙醇(100mL)中的混合物加热到85℃。在85℃下搅拌过夜后，将所得溶液冷却到室温并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(25％的DCM/EtOAc)纯化浓缩物，以提供白色粉末状标题化合物(6.4g,70％)。对于C23H28N6O3，MS(ESI)计算值：436；观测值：437[M+H]。1H>3)δ8.41(s,1H),7.93(s,1H),7.41-7.29(m,5H),5.99-5.91(m,1H),5.32(s,1H),5.14(s,2H),4.41-4.15(m,3H),4.15-4.08(m,1H),3.83-3.75(m,1H),3.04(m,2H),2.62-2.51(m,1H),2.17-2.07(m,3H),1.97-1.89(m,1H),1.82-1.72(m,2H),1.55-1.43(m,2H)。
步骤2：N-(哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺
向4-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-基氨基)哌啶-1-甲酸苄基酯(7.76g,17.8mmol)于10％的MeOH/THF(100mL)中的溶液中添加10％Pd/C。在30℃下将混合物氢化36小时。将混合物过滤浓缩，以提供灰白色粉末状标题化合物(5.3g,100％)。对于C15H22N6O，MS(ESI)计算值：302；观测值：303[M+H]。1H>3)δ8.39(s,1H),7.92(s,1H),5.99-5.91(m,1H),5.48-5.14(m,1H),4.33-4.15(m,1H),4.14-4.08(m,1H),3.83-3.74(m,1H),3.19-3.09(m,2H),2.83-2.73(m,2H),2.63-2.49(m,1H),2.16-2.06(m,3H),1.97-1.89(m,1H),1.79-1.72(m,2H),1.71-1.65(m,1H),1.64-1.56(m,1H),1.54-1.42(m,2H)。
实例1.1.N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-1).
步骤1：2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙酸乙酯
向2-溴吡啶(1.0g,6.3mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.2mL,1.5mmol)于DMSO(10mL)中的溶液中添加铜粉(800mg,12.6mmol)。将混合物加热到90℃，并搅拌过夜。将混合物倾倒到水中，并在室温下搅拌1h。通过硅藻土垫过滤最终悬浮液，且用EtOAc洗涤滤块。用水和盐水洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥并在真空下浓缩，以提供黄色油状粗标题化合物(1.1g,86％)，其直接用于下一步骤中。
步骤2：2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙醇
在室温下向2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.1g,5.78mmol)于乙醇(25mL)中的溶液中添加NaBH4(330mg,8.67mmol)。在搅拌30min后，在冰浴温度下用1M>2SO4干燥并在真空中浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝2/1)纯化粗产物，以提供白色固体状标题化合物(520mg,60％)。1H>3)δ8.61(d,J＝4.7Hz,1H),7.88(td,J＝7.8,1.7Hz,1H),7.73(d,J＝7.8Hz,1H),7.43(dd,J＝7.2和4.7Hz,1H),4.26(dt,J＝7.0和12.4Hz,2H),3.50(t,J＝7.0Hz,1H)。
步骤3：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙酯
在0℃下在氮气氛下向2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙醇(220mg,1.25mmol)和DIPEA(0.35mL,1.88mmol)于无水醚(10mL)中的溶液中逐滴添加Tf2O(0.25mL,1.50mmol)。在室温下将由此获得的粉色悬浮液搅拌2小时。通过硅藻土垫过滤悬浮液。在真空中浓缩滤液，并通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝10/1)纯化，以提供无色油状标题化合物(320mg,87％)。1H>3)δ8.67(d,J＝4.3Hz,1H),7.89(td,J＝7.8和1.6Hz,1H),7.75(d,J＝7.8Hz,1H),7.47(dd,J＝7.8和4.3Hz,1H),5.12(t,J＝12.0Hz,2H)。
步骤4：N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙酯(320mg,1.1mmol)、N-(哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(330mg,1.1mmol)和DIPEA(0.3mL,1.65mmol)于DCM(5mL)中的溶液加热到40℃。搅拌过夜后，在真空中浓缩混合物并通过硅胶上的柱色谱(EtOAc)纯化，以提供白色粉末状标题化合物(406mg,83％)。对于C22H27F2N7O，MS(ESI)计算值：443.3；观测值：444.3[M+H]。1H>3)δ8.67(d,J＝4.3Hz,1H),8.37(s,1H),7.89(s,1H),7.81(td,J＝7.7和1.6Hz,1H),7.67(d,J＝7.7Hz,1H),7.37(dd,J＝7.7和4.3Hz,1H),5.95(dd,J＝10.6和2.0Hz,1H),4.15-4.07(m,1H),3.83-3.75(m,1H),3.68-3.63(m,1H),3.28(t,J＝14.5Hz,2H),3.14-3.07(m,1H),2.98-2.90(m,2H),2.56-2.49(m,2H),2.14-2.07(m,1H),2.03-1.95(m,2H),1.94-1.88(m,1H),1.81-1.72(m,2H),1.71-1.57(m,3H)。
步骤5：N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
向N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(406mg,0.92mol)于DCM(5mL)中的溶液中添加饱和HCl/Et2O(5mL)。在室温下搅拌过夜后，移除THP基团。在真空中浓缩悬浮液，并用1M>2SO4干燥，并在真空中浓缩，以获得白色粉末状标题化合物(219mg,66％)。对于C17H19F2N7，MS(ESI)计算值：359.2；观测值：360.3[M+H]。1H>3OD)δ8.64(d,J＝4.6Hz,1H),8.20(s,1H),8.09(s,1H),8.00-7.93(m,1H),7.74(d,J＝7.9Hz,1H),7.52(dd,J＝7.9和4.6Hz,1H),4.05-3.95(m,1H),3.16(t,J＝14.4Hz,2H),2.88-2.82(m,2H),2.43-2.35(m,2H),1.86-1.76(m,2H),1.51-1.40(m,2H)。
实例1.1a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-1·HCl).
向N-(1-(2,2-二氟-2-(吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺(105mg,0.29mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加HCl的2.0M甲醇溶液(0.15mL,0.30mmol)。在搅拌30min后，将溶液浓缩，以提供白色粉末状标题化合物(115mg,100％)。对于C17H19F2N7，MS(ESI)计算值：359.2；观测值：360.3[M+H]。1H>3OD)δ8.62(d,J＝4.5Hz,1H),8.44(brs,2H),7.98-7.94(m,1H),7.75(d,J＝7.9Hz,1H),7.52(dd,J＝7.9和4.5Hz,1H),4.51-4.35(m,1H),4.16-4.00(m,2H),3.72-3.60(m,2H),3.32-3.20(m,2H),2.30-2.20(m,2H),2.07-1.95(m,2H)。
实例1.4.N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-4).
步骤1：2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯
向乙基2-溴-5-甲基吡啶(4.0g,24mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(4.8g,24mmol)于DMSO(80mL)中的溶液中添加Cu粉(3.0g,47mmol)。将混合物加热到50℃过夜。通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯洗涤。用乙酸乙酯萃取滤液并用盐水洗涤。经硫酸钠干燥乙酸乙酯层，过滤，并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝100:1)纯化浓缩物，以提供无色液体状标题化合物(3.7g,74％)1H>3)δ8.47(s,1H),7.69-7.57(m,2H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),2.40(s,3H),1.33(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙醇
向2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯(2.0g,9.3mmol)于乙醇(45mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(500mg,13.4mmol)。在室温下将混合物搅拌30min。30min后，用冰水浴中的1N>1H>3)δ8.44(s,1H),7.71(d,J＝8Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),4.22(t,J＝12.4Hz,2H),3.03(brs,1H),2.41(s,3H)。
步骤3：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酯
在0℃下向2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙醇(800mg,4.6mmol)和DIPEA(2.8ml,13.8mmol)于无水醚(40ml)中的溶液中添加Tf2O(1.5ml,9.2mmol)。在室温下搅拌1hr后，通过硅藻土过滤白色悬浮液，并用醚洗涤滤块。浓缩滤液并通过硅胶上的柱色谱(己烷)纯化，以提供无色液体状标题化合物(1.0g,70％)。1H>3)δ8.47(s,1H),7.65(m,2H),5.10(t,J＝12.0Hz,2H),2.42(s,3H)。
步骤4：1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基-胺基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙酯(1.0g,3.3mmol)、哌啶-4-基甲基氨基甲酸叔丁酯(1.3g,6.6mmol)和DIPEA(2.0ml,9.9mmol)于DCM(16ml)中的混合物加热到40℃同时搅拌。在40℃下搅拌过夜后，将混合物浓缩到干燥。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化浓缩物，以提供黄色固体状标题化合物(1.0g,83％)。对于C18H27F2N3O2，MS(ESI)计算值：355.2；观测值：356.2[M+H]。1H>3)δ8.46(s,1H),7.60-7.50(m,2H),3.72-3.61(m,1H),3.40(brs,1H),3.19(t,J＝14.7Hz,2H),2.85-2.80(m,2H),2.38(s,3H),2.32-3.40(m,2H),1.82-1.78(m,2H),1.43(s,9H),1.25-1.30(m,2H)。
步骤5：1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺
在0℃下向1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.0g,2.8mmol)于DCM(15ml)中的溶液中添加TFA(12.5ml)。在室温下搅拌30min后，浓缩混合物。用1N NaOH碱化浓缩物并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供灰白色粉末状标题化合物(400mg,60％)。对于C13H19F2N3，MS(ESI)计算值：255.2；观测值：256.2[M+H]。1H>3)δ8.47(s,1H),7.59-7.52(m,2H),3.18(t,J＝14.6Hz,2H),2.85-2.82(m,2H),2.64-2.54(m,1H),2.38(s,3H),2.35-2.28(m,2H),1.69-1.66(m,2H),1.32-1.26(m,2H)。
步骤6：N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在130℃下将1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺(260mg,1.02mmol)、4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(200mg,0.85mmol)和DIPEA(0.35ml,1.7mmol)于n-BuOH中的混合物搅拌过夜。浓缩橙色溶液。将浓缩物吸收于乙酸乙酯中并用水洗涤。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(190mg,40％)。对于C23H29F2N7O，MS(ESI)计算值：457.3；观测值：458.3[M+H]。1H>3)δ8.48(s,1H),8.38(s,1H),7.88(s,1H),7.64-7.53(m,2H),5.97-5.94(m,1H),4.16-4.07(m,1H),3.84-3.75(m,1H),3.26(t,J＝14.6Hz,2H),2.95-2.92(m,2H),2.55-2.49(m,2H),2.39(s,3H),2.11(d,J＝5.3Hz,1H),2.02-1.99(m,2H),1.94-1.92(m,1H),1.84-1.70(m,2H),1.54-1.51(m,2H),1.31-1.25(m,4H)。
步骤7：N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(190mg,0.41mmol)于MeOH(3.5ml)中的混合物中添加HCl/Et2O(2M,2.6ml,0.31mmol)。搅拌4h后，浓缩混合物并用1N>18H21F2N7O，MS(ESI)计算值：373.2；观测值：374.3[M+H]。1H>3OD)δ8.49(s,1H),8.21(s,1H),8.11(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.0Hz,1H),4.14-4.11(m,1H),3.25(t,J＝14.4Hz,2H),2.96-2.93(m,2H),2.51-2.45(m,2H),2.43(s,3H),1.95-1.92(m,2H),1.63-1.50(m,2H)。
实例1.4a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-4·HCl).
向N-(1-(2,2-二氟-2-(5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(132mg,0.3mmol)于MeOH(1.5ml)中的溶液中添加HCl/Et2O(2M,0.15ml,0.30mmol)。搅拌15min后，浓缩混合物，以提供灰白色粉末状标题化合物(145mg,96％)。对于C18H21F2N7O，MS(ESI)计算值：373.2；观测值：374.3[M+H]。1H>3OD)δ8.56(s,1H),8.37(m,2H),7.88(d,J＝8.1Hz,1H),7.74(d,J＝8.1Hz,1H),4.43(s,1H),4.04(s,2H),3.64(m,2H),3.26(s,3H),2.31-2.27(m,2H),2.14-1.90(m,2H),1.35-1.31(m,2H)。
实例1.5.N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-5).
步骤1：2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸乙酯
向2,2-二氟-2-碘乙酸乙酯(5.5g,22mmol)和2-溴-5-三氟甲基-吡啶(5.0g,22mmol)于DMSO(110mL)中的溶液中添加Cu粉(2.8g,44mmol)。将混合物加热到80℃并持续20小时。通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯洗涤固体滤饼。用乙酸乙酯萃取滤液。合并乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝100:1)纯化浓缩物，以提供无色液体状标题化合物(2.5g,42％)。1H>3)δ8.93(s,1H),8.13(d,J＝7.9Hz,1H),7.90(d,J＝8.1Hz,1H),4.39(q,J＝7.1Hz,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙醇
向2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.0g,3.7mmol)于乙醇(19mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(200mg,5.3mmol)。在室温下将混合物搅拌30min。冷却经搅拌反应混合物，用1N>1H>3)δ8.92(s,1H),8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),4.28(t,J＝12Hz,2H),2.42(s,1H)。
步骤3：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酯
在0℃下向2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙醇(750mg,3.3mmol)和DIPEA(2.0ml,9.9mmol)于无水醚(33mL)中的溶液中添加Tf2O(1.1ml,6.6mmol)。在室温下搅拌1hr后，通过硅藻土过滤白色悬浮液。用醚洗涤固体块。浓缩滤液并通过硅胶上的柱色谱(己烷)纯化，以提供无色液体状标题化合物(760mg,75％)。1H>3)δ8.95(s,1H),8.16(d,J＝8.2,1H),7.91(d,J＝8.2Hz,1H),5.14(t,J＝11.8Hz,2H)。
步骤4：1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酯(1.04g,2.9mmol)、哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.16g,5.8mmol)和DIPEA(1.5mL,8.7mmol)于DCM(20mL)中的混合物加热到40℃。在40℃下搅拌过夜后，浓缩混合物并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝5:1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(1.05g,92％)。对于C18H24F5N3O2，MS(ESI)计算值：409.2；观测值：410.2[M+H]。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.91(s,1H),8.05(d,J＝8.2Hz,1H),7.78(d,J＝8.2Hz,1H),4.34(brs,1H),3.39(m,1H),3.22(t,J＝14.2Hz,2H),2.83-2.78(m,2H),2.41-2.35(m,2H),1.81-1.77(m,2H),1.42(s,9H),1.20-1.30(m,2H),
步骤5：1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺
在冰水浴温度下向1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)-哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(300mg,0.73mmol)于DCM(8mL)中的溶液中添加TFA(4.4mL)。在室温下搅拌15min后，浓缩混合物。用1N NaOH碱化浓缩物并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供浅黄色油状标题化合物(226mg)，其直接用于下一步骤中。对于C13H16F5N3，MS(ESI)计算值：309.1；观测值：310.3[M+H]。1H>3)δ8.92(s,1H),8.04(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(d,J＝8.2Hz,1H),3.22(t,J＝14.1Hz,2H),2.82-2.79(m,2H),2.64-2.54(m,1H),2.35-2.29(m,2H),1.68-1.65(m,2H),1.29-1.23(m,2H),1.21-1.18(m,2H)。
步骤6：N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺(226mg,0.73mmol)、4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(276mg,1.17mmol)和DIPEA(0.35mL,1.95mmol)于正丁醇(3mL)中的混合物加热到130℃。在130℃下搅拌过夜后，浓缩反应混合物并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(DCM/MeOH＝25/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(105mg，2个步骤总体产率为34％)。对于C18H18F5N7，MS(ESI)计算值：427.2；观测值：428.2[M+H]。1H>3OD)δ9.01(s,1H),8.32(d,J＝8.3,1H),8.21(s,1H),8.09(s,1H),7.96(d,J＝8.3Hz,1H),4.08(s,1H),2.97-2.92(m,2H),2.51-2.46(m,2H),1.96-1.91(m,2H),1.56-1.48(m,2H)。
实例1.5a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-5·HCl).
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(100mg,0.234mmol)于MeOH(3mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(2M,0.13mL,0.234mmol)。搅拌10min后，浓缩混合物，以提供浅黄色固体状产物(113mg,100％)。对于C18H18F5N7，MS(ESI)计算值：427.2观测值：428.2[M+H]。1H>3OD)δ9.06(s,1H),8.45-8.32(m,3H),8.05(d,J＝8.3Hz,1H),4.40(s,1H),3.94(s,2H),3.52-3.48(m,2H),3.20-3.05(m,2H),2.42-2.22(m,2H),1.95-1.85(m,2H)。
实例1.15.N-(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺(C-15).
步骤1：2-溴-3,5-二氟吡啶
在0℃下将3,5-二氟吡啶-2-胺(2.0g,15mmol)缓慢添加到48％HBr溶液(10mL)中同时搅拌。然后在0℃下经20分钟向所得混合物中添加BR2(2.36mL,46mmol)。将反应混合物冷却到-10℃。经1.5小时添加NaNO2(2.65g,38mmol)于水(10mL)中的溶液，且将混合物再搅拌30分钟。经30分钟添加NaOH(5.5g,138mmol)于水(20mL)中的溶液，并使混合物升温到室温。用醚(3×100mL)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，以提供浅黄色固体状标题化合物(2.77g,92％)，其未经进一步纯化即直接使用。1H>3)δ8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.35(dt，J＝2.4和7.6Hz，1H)。
步骤2：2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯
向2-溴-3,5-二氟吡啶(1.0g,5.2mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.05g,5.16mmol)于DMSO(20mL)中的溶液中添加Cu粉(6.6g,10.3mmol)。于50℃下将混合物搅拌过夜。将反应混合物倾倒到磷酸氢二钾三水合物(10g,50mmol)于水(100mL)中的溶液中同时剧烈搅拌。过滤悬浮液并用EtOAc冲洗固体。将滤液添加到盐水中并用EtOAc(100mL×2)萃取。用盐水洗涤合并的有机物，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝50:1)纯化浓缩物，以提供无色油状标题化合物(890mg,73％)。1H>3)δ8.35(d,J＝1.8Hz,1H),7.44-7.31(m,1H),4.42(q,J＝6.8Hz,2H),1.36(t,J＝6.8Hz,3H)。
步骤3：2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇
在0℃下向2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(800mg,3.37mmol)于乙醇(20mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(140mg,3.71mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时。在冰水浴温度下用1N>1H>3)δ8.33(d,J＝2.2Hz,1H),7.38(m,1H),4.27(dt,J＝7.6和12.4Hz,2H),2.87(t,J＝7.6Hz,1H)。
步骤4：三氟甲烷磺酸2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯
在0℃下向2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇(485mg,2.49mmol)和DIPEA(1.3mL,7.5mmol)于无水醚(25mL)中的溶液中缓慢添加Tf2O(0.84mL,4.98mmol)。使反应混合物升温到室温。在室温下15min后，通过硅藻土过滤悬浮液并用醚洗涤固体。浓缩滤液，以提供浅黄色油状粗标题化合物(1.1g,100％)，其未经进一步纯化即直接使用。
步骤5：(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯(1.1g,2.72mmol)、哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.09g,5.44mmol)和DIPEA(1.43mL,8.16mmol)于DCM(15mL)中的混合物加热到40℃。在40℃下搅拌过夜后，浓缩混合物并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝10:1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(754mg,74％)。对于C17H23F4N3O2，MS(ESI)计算值：377.2；观测值：378.3[M+H]。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(d,J＝2.2Hz,1H),7.29(m,1H),4.34(s,1H),3.39(s,1H),3.19(t,J＝14.4Hz,2H),2.88-2.82(m,2H),2.44-2.33(m,2H),1.82-1.75(m,2H),1.43(s,9H),1.33-1.20(m,2H)。
步骤6：1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-胺
在冰水浴冷却下向(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(750mg,1.99mmol)于DCM(10mL)中的溶液中添加TFA(5mL)。在室温下搅拌15min后，浓缩混合物。用1N NaOH碱化浓缩物并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供浅黄色油状标题化合物(514mg,93％)，其未经进一步纯化即直接使用。对于C12H15F4N3，MS(ESI)计算值：277.1；观测值：278.3[M+H]。1H>3)δ8.36(s,1H),7.35-7.26(m,1H),3.19(t,J＝14.4Hz,2H),2.88-2.82(m,2H),2.64-2.58(m,1H),2.36-2.28(m,2H),1.68-1.62(m,2H),1.28-1.18(m,2H)。
步骤7：N-(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺
将1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-胺(150mg,0.54mmol)、4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(84mg,0.54mmol)和DIPEA(0.19mL,1.1mmol)于i-PrOH(3mL)中的混合物加热到85℃。在85℃下搅拌过夜后，浓缩反应溶液并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝1/3)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(110mg,52％)。对于C17H17F4N7，MS(ESI)计算值：395.2；观测值：396.2[M+H]。1H>3OD)δ8.47(d,J＝2.2Hz,1H),8.22(s,1H),8.10(s,1H),7.79-7.73(m,1H),4.10(brs,1H),3.28(t,J＝13.6Hz,2H),3.05-2.98(m,2H),2.54-2.48(m,2H),1.98-1.92(m,2H),1.60-1.50(m,2H)。
实例1.15a(HCl盐).N-(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺盐酸盐(C-15·HCl).
在室温下向N-(1-(2-(3,5-二氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]-嘧啶-4-胺(48.7mg,0.123mmol)于MeOH(2mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(2M,62μL, 0.124mmol)。搅拌10min后，浓缩混合物，以提供白色固体状标题化合物(55.2mg,100％)。对于C17H17F4N7，MS(ESI)计算值：395.2；观测值：396.2[M+H]。1H>3OD)δ8.52(s,1H),8.41(s,2H),7.92-7.85(m,1H),4.45-4.36(m,1H),4.05-3.96(m,2H),3.62-3.56(m,2H),3.18-3.12(m,2H),2.28-2.22(m,2H),1.98-1.92(m,2H)。
实例1.16.N-(1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-16).
步骤1：2-溴-5-氯-3-氟吡啶
在0℃下将5-氯-3-氟吡啶-2-胺(5.0g,34mmol)缓慢添加到48％HBr溶液(20mL)中同时搅拌。然后在0℃下经20分钟向所得混合物中添加BR2(5.24mL,102.3mmol)。将反应混合物冷却到-10℃。经1.5小时添加NaNO2(5.88g,85.3mmol)于水(20mL)中的溶液，并将混合物再搅拌30分钟。经30分钟添加NaOH(12g,306mmol)于水(20mL)中的溶液，并使混合物升温到室温。用醚(3×100mL)萃取混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经硫酸钠干燥，过滤，并浓缩，以提供浅黄色固体状标题化合物(6.43g,90％)。1H>3)δ8.23(d,J＝2.1Hz,1H),7.48(dd,J＝7.1,2.1Hz,1H)。
步骤2：2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯
向2-溴-5-氯-3-氟吡啶(2.0g,9.5mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.93g,9.5mmol)于DMSO(40mL)中的溶液中添加Cu粉(1.21g,19mmol)。将混合物加热到80℃并持续20小时且倾倒到磷酸氢二钾三水合物(21g,95mmol)于水(200mL)中的溶液中同时剧烈搅拌。通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯洗涤固体滤饼。用乙酸乙酯萃取滤液。合并乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝50:1)纯化浓缩物，以提供无色液体状标题化合物(2.08g,86％)。对于C9H7ClF3NO2，MS(ESI)计算值：253.0；观测值：254.2[M+H]。1H>3)δ8.42(d,J＝1.8Hz,1H),>
步骤3：2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇
在0℃下向2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(2.1g,8.2mmol)于乙醇(40mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(341mg,9.02mmol)。在室温下将混合物搅拌1小时。冷却经搅拌反应混合物，用1N>7H5ClF3NO，MS(ESI)计算值：211.0；观测值：212.2[M+H]。1H>3)δ8.40(d,J＝1.3Hz,1H),7.63(dd,J＝9.5,1.3Hz,1H),4.26(m,2H)。
步骤4：三氟甲烷磺酸2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯
在0℃下向2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇(1.0g,4.7mmol)和DIPEA(2.5mL,14mmol)于无水醚(45mL)中的溶液中缓慢添加Tf2O(1.6mL,9.5mmol)。将反应物升温到室温且搅拌1h。通过硅藻土过滤橙色悬浮液，并用醚洗涤固体。浓缩滤液，以提供浅黄色油状粗标题化合物(1.65g,100％)。所述化合物未经进一步纯化即直接用于下一步骤中。
步骤5：1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯(1.65g,4.7mmol)、哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.92g,9.6mmol)和DIPEA(2.5mL,14mmol)于DCM(25mL)中的混合物加热到40℃。在40℃下搅拌过夜后，浓缩混合物并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝10:1)纯化浓缩物，以提供浅黄色固体状标题化合物(1.64g,87％)。对于C17H23ClF3N3O2，MS(ESI)计算值：393.1；观测值：394.2[M+H]。1H>3)δ8.43(s,1H),7.54(dd,J＝9.8,1.8Hz,1H),4.34(s,1H),3.38(s,1H),3.18(t,2H),2.91-2.80(m,2H),2.42-2.35(m,2H),1.85-1.75(m,>
步骤6：1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-胺
在0℃下向1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.64g,4.16mmol)于DCM(20mL)中的溶液中添加TFA(10mL)。在室温下搅拌15min后，浓缩混合物。用1N NaOH碱化浓缩物并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供浅黄色油状粗标题化合物(1.43g,100％)，其未经进一步纯化即直接用于下一步骤中。对于C12H15ClF3N3，MS(ESI)计算值：293.1；观测值：294.2[M+H]。1H>3)δ8.43(s,1H),7.54(dd,J＝9.8,1.7Hz,1H),3.18(t,J＝14.4Hz,2H),2.88-2.84(m,2H),2.66-2.54(m,1H),2.36-2.28(m,2H),1.70-1.64(m,2H),1.29-1.15(m,2H)。
步骤7：N-(1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-胺(200mg,0.68mmol)、4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(88mg,0.57mmol)和DIPEA(0.2mL,1.1mmol)于i-PrOH(3mL)中的混合物加热到85℃。在85℃下搅拌过夜后，浓缩反应溶液并用EtOAc萃取。用水和盐水洗涤有机层，干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝1/3)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(96.5mg,35％)。对于C17H17ClF3N7，MS(ESI)计算值：411.1；观测值：412.2[M+H]。1H>3OD)δ8.52(d,J＝1.8Hz,1H),8.22(s,1H),8.10(s,1H),7.97(dd,J＝10.3,1.8Hz,1H),4.15-4.04(m,1H),3.27(t,J＝14.4Hz,2H),3.10-2.98(m,2H),2.51-2.45(m,2H),1.98-1.92(m,2H),1.61-1.46(m,2H)。
实例1.16a(HCl盐).N-(1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-16·HCl).
在室温下向N-(1-(2-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(96mg,0.23mmol)于MeOH(1.5mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(2M,0.12mL,0.23mmol)。搅拌10min后，浓缩混合物，以提供白色固体状产物(104mg,100％)。对于C17H17ClF3N7，MS(ESI)计算值：411.1；观测值：412.2[M+H]。1H>3OD)δ8.57(s,1H),8.40(s,2H),8.07(d,J＝10.2Hz,1H),4.37(s,1H),3.90(s,2H),3.50(s,2H),3.11(m,2H),2.20(d,J＝8.3Hz,2H),1.88(m,2H)。
实例1.17.N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-17).
步骤1：2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯
向2-溴-3-氟-5-甲基吡啶(1.8g,9.5mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.8mL,14.2mmol)于DMSO(30mL)中的溶液中添加铜粉(1.2g,18.9mmol)。搅拌过夜到50℃后，用EtOAc稀释混合物。将混合物倾倒到水中，并搅拌30min。通过硅藻土垫过滤悬浮液。用水和盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(1.6g,70％)。1H>3)δ8.26(s,1H),7.36(d,J＝10.6Hz,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),2.42(s,3H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤2：2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙醇
在室温下向2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙酸乙酯(1.68g,7.22mmol)于乙醇(30mL)中的溶液中添加NaBH4(410mg,10.8mmol)。固体NaBH4逐渐溶解以形成澄清溶液。在搅拌30min后，在0℃下用1N>2SO4干燥并浓缩，以提供白色粉末状产物(1.3g,100％)。1H>3)δ8.22(s,1H),7.39(d,J＝10.8Hz,1H),4.32-4.20(m,2H),3.45-3.35(m,1H),2.43(s,3H)。
步骤3：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙酯
在0℃下在N2气氛下向2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙醇(120mg,0.63mmol)和DIPEA(0.15mL,0.95mmol)于无水醚(5mL)中的溶液中逐滴添加Tf2O(0.15mL,0.76mmol)。搅拌1h后，过滤悬浮液，并浓缩滤液，以提供粗标题化合物(200mg)，其未经进一步纯化即直接用于下一步骤中。
步骤4：N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙酯(200mg,0.62mmol)、N-(哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(230mg,0.76mmol)和DIPEA(0.20mL,1.25mmol)于DCM(5mL)中的混合物加热到40℃。搅拌过夜后，浓缩溶液并通过硅胶上的柱色谱(100％EtOAc)纯化，以提供白色粉末状标题化合物(250mg,69％)。对于C23H28F3N7O，MS(ESI)计算值：475.2；观测值：476.3[M+H]。1H>3)δ8.37(s,1H),8.28(s,1H),7.90(s,1H),7.30(d,J＝10.1Hz,1H),5.94(d,J＝8.6Hz,1H),4.15-4.07(m,1H),3.83-3.75(m,1H),3.71-3.61(m,2H),3.25(t,J＝14.4Hz,2H),3.10(q,J＝7.5Hz,1H),3.03-2.94(m,2H),2.58-2.48(m,3H),2.41(s,3H),2.03-1.88(m,3H),1.82-1.70(m,2H),1.62-1.52(m,2H)。
步骤5：N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
向N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(380mg,0.8mmol)于50％的DCM/MeOH(5mL)中的溶液中添加醚中的HCl溶液。所述溶液快速变成白色悬浮液。在30℃下搅拌2hr后，彻底移除THP基团。浓缩悬浮液，并分配到DCM和NaOH水溶液中。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥并浓缩。用30％于己烷中的EtOAc洗涤浓缩物，以提供白色粉末状游离碱(199mg,63％)。对于C18H20F3N7，MS(ESI)计算值：391.2；观测值：392.2[M+H]。1H>
实例1.17a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-17·HCl).
向N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-甲基吡啶-2-基)乙基)-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(198mg,0.50mmol)于DCM/MeOH(1/1,10mL)中的溶液中添加2.0M甲醇HCl(0.25mL,0.50mmol)。在搅拌30min后，浓缩溶液，以提供浅褐色粉末状标题化合物(215mg,100％)。对于C18H20F3N7，MS(ESI)计算值：391.2；观测值：392.2[M+H]。1H>
实例1.18.N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-18).
步骤1：2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸乙酯
向2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(1.0g,4.8mmol)和2-溴-3-氟-5-(三氟甲基)吡啶(1.1g,4.4mmol)于DMSO(20mL)中的溶液中添加Cu粉(568mg,8.8mmol)。将混合物加热到80℃并持续20小时。通过硅藻土过滤反应混合物并用乙酸乙酯洗涤。用盐水洗涤乙酸乙酯层，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝100:1)纯化浓缩物，以提供无色油状标题化合物(980mg,83％)。1H>3)δ8.73(s,1H),7.81(d,J＝9.6Hz,1H),4.45(q,J＝7.2Hz,2H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤2：2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙醇
在冰浴温度下向2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酸乙酯(980mg,3.41mmol)于乙醇(20mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(194mg,5.12mmol)并将混合物搅拌30min。用1N>1H>3)δ8.72(s,1H),7.84(d,J＝9.2Hz,1H),4.30(t,J＝12.4Hz,2H),2.86(brs,1H)。
步骤3：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酯
在0℃下向2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙醇(780mg,3.18mmol)和DIPEA(1.6mL,9.6mmol)于无水醚(15ml)中的溶液中添加Tf2O(0.9mL,6.36mmol)。在室温下搅拌1hr后，通过硅藻土过滤白色悬浮液，并用醚洗涤滤块。浓缩滤液并通过硅胶上的柱色谱(己烷)纯化，以提供无色油状标题化合物(870mg)，其直接用于下一步骤。
步骤4：1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)-哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙酯(870mg)、哌啶-4-基甲基氨基甲酸叔丁酯(700mg,3.5mmol)和DIPEA(1.06ml,6.38mmol)于DCM(20mL)中的混合物加热到40℃。在40℃下搅拌过夜后，将混合物浓缩到干燥。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(870mg,64％)。1H>3)δ8.73(s,1H),7.74(d,J＝10.0Hz,1H),4.35(s,1H),3.39(s,1H),3.22(t,J＝14.0Hz,2H),2.85-2.88(m,2H),2.39(t,J＝10.0Hz,2H),1.84-1.76(m,2H),1.42(s,9H),1.19-1.31(m,3H)。
步骤5：1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-胺
在冰水浴下向1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(870mg,2.03mmol)于DCM(5ml)中的溶液中添加TFA(5ml)。在室温下搅拌30min后，浓缩混合物。用1N NaOH碱化浓缩物，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供灰白色粉末状标题化合物(600mg,100％)。1H>3)δ8.72(s,1H),7.76(d,J＝9.6Hz,1H),6.40(s,2H),3.24(t,J＝14.0Hz,2H),2.98-2.95(m,3H),2.35(t,J＝11.2Hz,2H),1.86-1.80(m,2H),1.49-1.41(m,2H)。
步骤6：N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺(320mg,0.95mmol)、4-氯-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(130mg,0.80mmol)和DIPEA(0.3mL,1.7mmol)于正丁醇(5mL)中的混合物加热到90℃。在90℃下搅拌过夜后，浓缩橙色溶液。通过硅胶上的柱色谱(DCM/MeOH＝30:1)纯化浓缩物，以提供白色粉末状标题化合物(190mg,47％)。对于C18H17F6N7，MS(ESI)计算值：445.2；观测值：446.7[M+H]。1H>3OD)δ8.84(s,1H),8.21(d,J＝10.4Hz,1H),8.19(s,1H),8.08(s,1H),4.11-4.05(m,1H),3.38-3.35(m,2H),3.05-2.95(m,2H),2.52-2.45(m,2H),1.95-1.88(m,2H),1.45-1.53(m,2H)。
实例1.18a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)-哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-18·HCl).
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(3-氟-5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(120mg,0.27mmol)于MeOH(3.0mL)中的溶液中添加HCl/MeOH(2M,0.14mL)。搅拌15min后，浓缩混合物，以提供灰白色粉末状标题化合物(127mg,98％)。对于C18H21ClF2N6，MS(ESI)计算值：445.2；观测值：446.7[M+H]。1H>3OD)δ8.78(s,1H),8.36(brs,1H),8.35(brs,1H),8.22(d,J＝10.0Hz,1H),4.35-4.28(m,1H),3.84-3.87(m,2H),3.42-3.46(m,2H),3.01-3.07(m,2H),2.15-2.05(m,2H),1.81-1.91(m,2H)。
实例1.24.N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-24).
步骤1：2-溴-3,5-二氯吡啶
在-20℃下向3,5-二氯吡啶-2-胺(1.0g,6.2mmol)于40％HBr水溶液(8mL)中的溶液中逐滴添加溴(2.8g,17mmol)。在-20℃下将橙色悬浮液搅拌2hr，且然后在-20℃下添加NaNO2水溶液(1.1g,17mmol)。在环境温度下将由此获得的混合物再搅拌2小时。在0℃下用30％NaOH水溶液使褐色混合物碱化到pH约12。用醚萃取浅黄色混合物。用盐水洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥并浓缩，以提供黄色固体状标题化合物(730mg,52％)。1H>3)δ8.27(d,J＝2.3Hz,1H),7.77(d,J＝2.3Hz,1H)。
步骤2：2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯
向2-溴-3,5-二氯吡啶(450mg,2.0mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(0.40mL,1.5mmol)于DMSO(10mL)中的溶液中添加铜粉(250mg,4.0mmol)。将由此获得的混合物加热到90℃，并搅拌过夜。将混合物倾倒到水中，并在室温下再搅拌1h。通过硅藻土垫过滤最终悬浮液，且用EtOAc洗涤滤块。用水和盐水洗涤合并的有机相，经Na2SO4干燥并在真空中浓缩，以提供黄色油状粗标题化合物(410mg,77％)。
步骤3：2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇
在室温下向2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酸乙酯(600mg,2.2mmol)于乙醇(10mL)中的溶液中添加NaBH4(130mg,3.3mmol)。在搅拌30min后，消耗掉酯，并在冰浴温度下用1M>2SO4干燥并在真空中浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝3/1)纯化粗产物，以提供白色固体状标题化合物(250mg,50％)。1H>3)δ8.44(d,J＝1.8Hz,1H),7.90(d,J＝1.8Hz,1H),4.33-4.22(m,2H),3.01(t,J＝7.6Hz,1H)。
步骤4：三氟甲烷磺酸2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯
在0℃下在氮气氛下向2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙醇(250mg,1.1mmol)和DIPEA(0.30mL,1.65mmol)于无水醚(5mL)中的溶液中逐滴添加Tf2O(0.22mL,1.32mmol)。在室温下将由此获得的粉色悬浮液搅拌2小时。在消耗掉醇后，通过硅藻土垫过滤悬浮液。在真空中浓缩滤液，并通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝4/1)纯化，以提供无色油状标题化合物(210mg,53％)。1H>3)δ8.45(d,J＝1.8Hz,1H),7.90(d,J＝1.8Hz,1H),5.19(t,J＝12.1Hz,2H)。
步骤5：N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
将三氟甲烷磺酸2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙酯(210mg,0.55mmol)、N-(哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(185mg,0.61mmol)和DIPEA(0.15mL,0.84mmol)于DCM(5mL)中的溶液加热到40℃。搅拌过夜后，在真空中浓缩混合物并通过硅胶上的柱色谱(100％EtOAc)纯化，以提供白色粉末状标题化合物(185mg,65％)。对于C22H25Cl2F2N7O，MS(ESI)计算值：511.2；观测值：512.2[M+H]。1H>3)δ8.50(d,J＝1.9Hz,1H),8.38(s,1H),7.88(s,1H),7.83(d,J＝1.9Hz,1H),5.95(d,J＝8.8Hz,1H),4.22-3.97(m,2H),3.85-3.72(m,1H),3.33(t,J＝14.5Hz,2H),3.07-2.94(m,2H),2.62-2.48(m,3H),2.10(m,1H)2.05(m,2H),1.89(m,1H),1.83-1.70(m,2H),1.59-1.43(m,2H),1.30(m,2H)。
步骤6：N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
向N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(185mg,0.36mmol)于DCM(5mL)中的溶液中添加HCl/Et2O饱和溶液(5mL)。在室温下搅拌过夜后，在真空中浓缩悬浮液，并用1M>2SO4干燥，并在真空中浓缩，以获得白色粉末状标题化合物(120mg,79％)。对于C17H17Cl2F2N7，MS(ESI)计算值：427.1；观测值：428.2[M+H]。1H>3OD)δ8.48(d,J＝2.0Hz,1H),8.10(s,1H),8.05(d,J＝2.0Hz,1H),7.99(s,1H),4.04-3.92(m,1H),3.31-3.22(t,J＝14.4Hz,2H),2.97-2.90(m,2H),2.45-2.31(m,2H),1.87-1.79(m,2H),1.50-1.36(m,2H)。
实例1.24a(HCl盐).N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-24·HCl).
向N-(1-(2-(3,5-二氯吡啶-2-基)-2,2-二氟乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(87mg,0.20mmol)于MeOH(5mL)中的溶液中添加HCl的甲醇溶液(0.1mL,2.0M,0.20mmol)。在搅拌30min后，浓缩溶液，以提供白色粉末状标题化合物(92mg,98％)。对于C17H17Cl2F2N7，MS(ESI)计算值：427.1；观测值：428.2[M+H]。1H>3OD)δ8.66(d,J＝1.9Hz,1H),8.50-8.37(m,2H),8.30(d,J＝1.9Hz,1H),4.55-4.40(m,1H),4.28-4.09(m,2H),3.82-3.66(m,2H),3.32-3.22(m,2H),2.37-2.24(m,2H),2.12-1.96(m,2H)。
实例1.33.N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-33).
将1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-胺(130mg,0.42mmol)、4-氯-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(60mg,0.356mmol)和DIPEA(0.14ml,0.84mmol)于丁醇(3ml)中的混合物加热到85℃。在85℃下搅拌过夜后，浓缩橙色溶液。通过硅胶上的柱色谱(DCM/MeOH＝30:1)纯化浓缩物，以提供白色粉末状标题化合物(98mg,62％)。对于C19H20F5N7，MS(ESI)计算值：441.2；观测值：442.2[M+H]。1H>3OD)δ9.01(s,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,1H),8.18(s,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),4.25-4.11(m,1H),3.29-3.36(m,2H),2.60(s,3H),2.55-2.44(m,2H),1.98-1.83(m,2H),1.68-1.52(m,2H)。
实例1.33a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-33·HCl).
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(83mg,0.188mmol)于MeOH(3.0ml)中的溶液中添加HCl/MeOH(2M,0.094ml,0.188mmol)搅拌15min后，浓缩混合物，以提供灰白色粉末状标题化合物(89mg,100％)。对于C19H20F5N7，MS(ESI)计算值：441.2；观测值：442.2[M+H]。1H>3OD)δ9.07(s,1H),8.48-8.37(m,2H),8.06(d,J＝8.3Hz,1H),4.58(m,1H),3.98(m,2H),3.64-3.50(m,2H),3.19-3.04(m,2H),2.77(s,3H),2.25-2.14(m,2H),2.14-2.00(m,2H)。
实例1.127.N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-127).
步骤1：N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在85℃下将1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-胺(309mg,1.0mmol)、4-氯-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(200mg,0.84mmol)和DIPEA(0.3mL,1.6mmol)于i-PrOH中的混合物搅拌过夜。浓缩橙色溶液。用EtOAc萃取浓缩物并用水洗涤。通过硅胶上的柱色谱(己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(160mg,38％)。对于C23H26F5N7，MS(ESI)计算值：511.2；观测值：512.5[M+H]。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.93(s,1H),8.39(s,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.91(s,1H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),5.97-5.94(m,1H),4.15-4.10(m,2H),3.83-3.73(m,>
步骤2：N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(160mg,0.31mmol)于MeOH(2.6mL)中的混合物中添加HCl/Et2O(2M,2.6mL,0.31mmol)。搅拌4h后，浓缩混合物并添加1N>18H18F5N7，MS(ESI)计算值：427.15；观测值：428.4[M+H]。1H>3)δ12.75(brs,1H),8.94(s,1H),8.44(s,1H),8.05(d,J＝8.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.78(d,J＝8.1Hz,1H),5.34(brs,1H),4.13-4.10(m,1H),3.05(t,J＝13.2Hz,2H),2.86-2.83(m,2H),2.57-2.52(m,2H),2.07-2.05(m,2H),1.84-1.78(m,1H),1.30-1.18(m,2H)。
实例1.127a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-127·HCl).
向N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(130mg,0.3mmol)于MeOH(1.5mL)中的溶液中添加HCl/Et2O(2M,0.15mL,0.30mmol)。搅拌15min后，浓缩混合物，以提供灰白色粉末状标题化合物(140mg,96％)。对于C18H18F5N7，MS(ESI)计算值：427.2；观测值：428.4[M+H]。1H>3OD)δ9.01(s,1H),8.58-8.51(m,2H),8.33(d,J＝8.0Hz,1H),8.02(d,J＝8.0Hz,1H),4.46(s,1H),3.72-3.68(m,2H),3.44(s,1H),3.37(s,1H),3.08-2.95(m,2H),2.21-2.18(m,2H),2.00-1.90(m,2H)。
实例1.142.N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(C-142).
步骤1：5-碘-2-(三氟甲基)吡啶
将6-(三氟甲基)吡啶-3-胺(9.96g,0.062mol)于5N HCl(70mL)中的溶液冷却到-5℃，并逐滴添加于30mL水中的亚硝酸钠(6.39g,0.093mol)，同时维持内部温度低于5℃。10min后，在-5℃下逐滴添加于30mL水中的KI(22.5g,0.136mol)，同时在添加期间维持内部温度低于10℃。将反应混合物升温到室温并添加250mL EtOAc。通过添加50mL的6N NaOH将水层的pH调节到11，分离各层，并用120mL的0.3M Na2S2O3洗涤有机层。浓缩EtOAc层并通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝25/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(14.6g,87％)。对于C6H3F3IN，MS(ESI)计算值：273.0；观测值：274.0[M+H]。1H>3)δ8.96(s,1H),8.22(d,J＝8.2Hz,1H),7.47(d,J＝8.2Hz,1H)。
步骤2：2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酸乙酯
向5-碘-2-(三氟甲基)吡啶(14.5g,53.2mmol)和2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(10.8g,53.2mmol)于DMF(250mL)中的溶液中添加Cu粉(6.76g,106.4mmol)。将混合物加热到80℃并持续20小时。20小时后，将反应混合物倾倒到磷酸氢二钾三水合物(121g,532mmol)于水(1500mL)中的溶液中同时剧烈搅拌。过滤悬浮液并用醚冲洗固体。将滤液添加到盐水中并用醚(2×)萃取。用盐水洗涤合并的有机物，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝50:1)纯化浓缩物，以提供无色液体状标题化合物(8.96g,63％)。对于C10H8F5NO2，MS(ESI)计算值：269.2；观测值：270.3[M+H]。1H>3)δ8.98(s,1H),8.14(d,J＝8.2Hz,1H),7.81(d,J＝8.2Hz,1H),4.35(q,J＝7.1Hz,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。
步骤3：2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙醇
在室温下向2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酸乙酯(8.86g,32.9mmol)于乙醇(165mL)中的溶液中缓慢添加NaBH4(1.79g,47.4mmol)。在室温下将混合物搅拌30min。30min后，在冰水浴温度下用1N>8H6F5NO，MS(ESI)计算值：227.0；观测值：228.2[M+H]。1H>3)δ8.91(s,1H),8.06(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(d,J＝8.2Hz,1H),4.06(td,J＝12.4,7.0Hz,2H),2.16(t,J＝7.0Hz,1H)。
步骤4：三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酯
在0℃下向2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙醇(1.0g,4.4mmol)和DIPEA(2.39ml,13.2mmol)于无水醚(44ml)中的溶液中添加Tf2O(1.48ml,8.8mmol)。在室温下搅拌1hr后，通过硅藻土过滤橙色悬浮液，并用醚洗涤滤块。浓缩滤液，并通过柱色谱纯化，以获得浅黄色固体状标题化合物(1.47g,93％)。1H>3)δ8.92(s,1H),8.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.86(d,J＝8.2Hz,1H),4.78(t,J＝11.2Hz,2H)。
步骤5：1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯
将三氟甲烷磺酸2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙酯(1.46g,4.07mmol)、哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.63g,8.13mmol)和DIPEA(2.2ml,12.2mmol)于DCM(20ml)中的混合物加热到40℃。在40℃下搅拌过夜后，将混合物浓缩到干燥。通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝10/1)纯化浓缩物，以提供白色固体状标题化合物(1.37g,83％)。对于C18H24F5N3O2，MS(ESI)计算值：409.2；观测值：410.4[M+H]。1H>3)δ8.89(s,1H),8.01(d,J＝8.2Hz,1H),7.75(d,J＝8.2Hz,1H),4.37(s,1H),3.40(s,1H),2.97(t,J＝13.2Hz,2H),2.72(m,2H),2.38(m,2H),1.83(m,2H),1.43(s,9H),1.36-1.23(m,2H)。
步骤6：1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-胺
在冰水浴温度下向1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基氨基甲酸叔丁酯(1.36g,3.32mmol)于DCM(16ml)中的溶液中添加TFA(8ml)。在室温下搅拌30min后，消耗掉起始材料，并浓缩混合物。用1M NaOH碱化浓缩物，并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机相，经Na2SO4干燥，并浓缩，以提供白色固体状标题化合物(1.0g,100％)。对于C13H16F5N3，MS(ESI)计算值：309.1；观测值：310.3[M+H]。1H>3OD)δ8.92(s,1H),8.24(d,J＝8.2Hz,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,1H),3.16(t,J＝13.5Hz,2H),3.06-2.94(m,1H),2.87(m,2H),2.43(m,2H),1.88(m,2H),1.50(m,2H),1.33(m,2H)。
步骤7：N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在氮下向1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-胺(300mg,0.97mmol)于i-PrOH(4mL)中的溶液中添加4-氯-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶(204mg,0.81mmol)和DIPEA(0.28ml,1.62mmol)。将混合物加热到85℃过夜。浓缩溶液并通过硅胶上的柱色谱(己烷/EtOAc＝2/1)纯化，以提供白色固体状标题化合物(366mg,86％)。对于C24H28F5N7O，MS(ESI)计算值：525.2；观测值：526.6[M+H]。1H>3)δ8.95(s,1H),8.35(s,1H),8.04(d,J＝8.1Hz,1H),7.77(d,J＝8.1Hz,1H),5.90-5.85(m,1H),4.98(d,J＝7.8Hz,1H),4.26-4.16(m,1H),3.84-3.72(m,1H),3.03(t,J＝13.2Hz,2H),2.84-2.78(m,2H),2.62(s,3H),2.58-2.47(m,3H),2.10-2.00(m,3H),1.88-1.82(m,1H),1.81-1.70(m,2H),1.50-1.45(m,3H)。
步骤8：N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(366mg,0.70mmol)于MeOH(25mL)中的溶液中添加HCl/Et2O(2M,10mL)。搅拌4小时后，浓缩混合物并吸收于EtOAc中。将有机相用饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥并在减压下浓缩，以提供白色固体状标题化合物(279mg,98％)。对于C19H20F5N7，MS(ESI)计算值：441.2；观测值：442.5[M+H]。1H>3OD)δ8.96(s,1H),8.26(d,J＝8.2Hz,1H),8.19(s,1H),7.95(d,J＝8.2Hz,1H),4.25-4.15(m,1H),3.17(t,J＝13.6Hz,2H),2.95-2.86(m,2H),2.62(s,3H),2.55-2.46(m,2H),1.96-1.90(m,2H),1.72-1.62(m,2H)。
实例1.142a(HCl盐).N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺盐酸盐(C-142·HCl).
在室温下向N-(1-(2,2-二氟-2-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)乙基)哌啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺(265mg,0.60mmol)于MeOH(3.0mL)中的溶液中添加HCl/Et2O(2M,0.30mL,0.60mmol)。搅拌15min后，浓缩混合物，以提供白色固体状标题化合物(289mg,100％)。对于C19H20F5N7，MS(ESI)计算值：441.2；观测值：442.5[M+H]。1H>3OD)δ8.85(s,1H),8.26(s,1H),8.15(d,J＝8.1Hz,1H),7.85(d,J＝8.1Hz,1H),4.26(brs,1H),3.16(m,2H),2.92-2.88(m,2H),2.62(s,3H),2.55-2.48(m,2H),1.90-1.86(m,2H),1.75-1.68(m,2H)。
实例2.分析.
实例2.1.NR2B拮抗剂活性.
根据先前所述标准方法(汉森(Hansen)等人，组合化学与高通量筛选(Comb.ChemHigh Throughput Screen).11:304,2008)确立分别稳定表达所克隆人类NR1/NR2B和NR1/NR2A的HEK293细胞系。在这些细胞上利用作为激动剂的谷氨酸盐和甘氨酸协同激动剂激活NMDA受体的NR2A或NR2B亚型导致钙流入，此可利用荧光指示物Fluo-4来监测。已实施基于细胞的分析以通过测量荧光变化来评估化合物对NR2A和NR2B受体的作用(汉森等人，组合化学与高通量筛选.11:304,2008)。
在37℃下将稳定表达NR2A或NR2B受体的HEK293细胞培养于潮湿CO2培育器中的补充有10％胎牛血清(FBS)(海克隆(Hyclone))、10μM>50值是得自使用Prism(格拉夫派得公司(Graphpad,Inc))将浓度依赖性反应非线性最小平方拟合到标准逻辑方程式：
振幅＝最大振幅/(1+(IC50/[拮抗剂])n)。
结果显示于下表中。
实例2.2.hERG通道抑制.
对HEK293细胞中所稳定表达的hERG通道执行分析。在37℃下将细胞培养于潮湿CO2培育器中的由DMEM、10％胎牛血清和抗生素组成的生长培养基中。在分析前，将细胞接种到12mm经PDL涂覆的玻璃盖玻片上并于35mm培养皿中培养。在培养16hr到40hr后，将盖玻片转移到OctaFlow灌注系统(ALA仪器(ALA>2、1mM>2、10mM>2、10mMHEPES、10mM>2，PH>
实例2.3.CYP P450酶抑制.
通过使用经汇集人类肝微粒体(HLM，购自柏根生物(BD Gentest))和那些同种型的选择性底物来评估测试化合物对CYP P450的5种主要同种型的抑制活性。那些CYP同种型和其相应探针底物如下：CYP1A2(非那西汀(phenacetin)，30μM)，CYP2C9(甲苯磺丁脲，100μM)，CYP2C19(S-美芬妥英(S-mephenytoin)，40μM)，CYP2D6(右美沙芬(dextromethorphan)，5μM)和CYP3A4(咪达唑仑(midazolam)，1μM)。所有探针底物是在接近或低于其Kms的浓度下使用。对于实验，在37℃下将10uM或连续稀释的测试化合物、上述CYP探针底物和0.2mg/mL经汇集HLM于磷酸盐缓冲液(pH>
(Mt-M0)/M水×100％
其中Mt和M0代表在测试化合物存在下在所述反应开始和结束时由个别CYP450同种型形成的具体探针底物代谢物的浓度；而M水代表在测试化合物不存在下在所述反应结束时具体代谢物的浓度。数据是以平均值±SD(n＝3)呈现。为滴定测试化合物对具体CYP450同种型的活性，绘制浓度依赖性反应并计算IC50值。结果显示于下表中。
实例2.4.强迫游泳测试.
使用强迫游泳测试来评估抗抑郁活性(鲍赛特(Porsolt)等人，1977国际档案的药效学合治疗(Arch.Int.Pharmacodyn.)229：327-336)。强迫在不能逃脱的环境中游泳的小鼠快速变得不动。具有抗抑郁活性的药物(例如伊米帕明(imipramine))减少在不动状态下花费的时间量。因此，在药物投与后实施的测试期间的不动时间量代表抗抑郁活性的有用指示物(露西(Lucki)等人，2001，精神药理学(Psychopharmacology)155:315-322)。
使用重25g到35g的雄性小鼠(品系NLMN)进行测试。将所有动物圈养于温度(22℃到24℃)和湿度(50％到60％)受控的环境中，可自由获取食物和水，进行12小时明-暗循环。将测试化合物溶解于0.5％二甲基亚砜、4％羟丙基-b-环糊精和水中以生成适当给药溶液。以10mL/kg的剂量体积通过腹膜内注射来投与药物。在给药后20分钟到60分钟开始测试。如达斯(Darci)等人(达斯等人，2004，欧洲药理学杂志(Eur.J.Pharmacol.) 499:135-146)所述实施针对抗抑郁活性的测试。在25℃±2℃下将小鼠置于含有10cm水的20cm高且直径为21cm的白色塑料圆柱体中。对小鼠录像6分钟，并由盲化观察者脱机分析最后4分钟的视频。当动物停止所有活动(挣扎、游泳、跳跃等)并在水上被动漂浮时，观察者判断其为不动。记录每一动物在不动状态下花费的时间量并将其用于化合物作用的统计分析。通过司徒顿t测试(student’s t-test)或单因子ANOVA、随后事后邓奈特测试(Dunnett’s test)来评估群组差异。
在实例2.4.1和2.4.2二者中，阳性对照化合物伊米帕明(32mg/kg,IP)显示预期抗抑郁活性(参见图1和2)。这些结果指示，当在人类抑郁症的标准模型中测试时所提供化合物展现抗抑郁活性。
实例2.4.1.化合物C-5.
化合物C-5使不动自在媒剂群组中观察到的188±6.6秒显著减少到分别用3mg/kg(n＝10,p<0.05)和10mg/kg(n＝9,p<0.01)处理的群组中所观察到的111±18.3秒和89±14.4秒。结果显示于图1中(其中C-5是经标记“实例5”)：条代表每一剂量群组的平均值±SEM不动时间(n＝10，***/**：与媒剂群组不同，分别为p<0.001/0.01，单因子ANOVA，邓奈特事后测试)。剂量是以毫克/千克(mpk)给出。伊米帕明的剂量为32mpk。
实例2.4.2.化合物C-18.
当在IP给药后20分钟以10mg/kg投与时，化合物C-18在强迫游泳测试中有效(不动时间＝97±16秒，相对于媒剂群组中的175±14秒，n＝10,p<0.01)。结果显示于图2中(其中C-18是经标记“实例18”)：条代表每一研究群组的平均值±SEM不动时间(n＝10，***/**：与媒剂群组不同，分别为p<0.001/0.01，单因子ANOVA，邓奈特事后测试)。剂量是以毫克/千克(mpk)给出。伊米帕明的剂量为32mpk。
机译： 二氟乙基吡啶衍生物作为NR2B NMDA受体拮抗剂
机译： 二氟乙基吡啶衍生物作为NR2B NMDA受体拮抗剂
机译： 二氟乙基吡啶衍生物作为NR2B NMDA受体拮抗剂
