一种利用酶法转化生产L‑正缬氨酸的方法

摘要

通过大肠杆菌和钝齿棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将来源于Trigonopsis variabilis的D‑氨基酸氧化酶成功在C.glutamicum ATCC13032中表达。通过构建重组质粒pET‑28a(+)‑leudh和pET‑28a(+)‑fdh，将来源于Bacillus cereus和Candida boidinii的亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶成功在E.coli BL21中表达。以上述三株工程菌的粗酶液作为生物催化剂，以混合型DL‑正缬氨酸作为底物，同时确定了最佳的反应温度为30℃和pH为7.5。在最佳的转化条件下进行酶法动力学拆分生产L‑正缬氨酸。25h后转化液中的L‑正缬氨酸的含量为80.09g/L，L‑正缬氨酸产率为98.3％。本发明方法生产L‑正缬氨酸具有效率高，绿色环保，产品纯度高等优点。