一种利用甘氨酸氧化酶生产乙醛酸的方法

摘要

为实现生物法工业化生产乙醛酸,采用基因工程技术对甘氨酸氧化酶(ThiO)进行表达优化,使用SDS-PAGE电泳手段验证ThiO的可溶性表达,通过全细胞转化法检测重组菌体生产乙醛酸的能力,并优化了反应条件,在放大体系中考察其应用性.结果表明:构建的菌株Bacillus subtilis 168(pP43NMK-ThiO)实现了ThiO的可溶性表达,全细胞转化甘氨酸生产乙醛酸的产量超越了当前生物法制备的最高产量.全细胞催化剂的最佳反应条件为温度30°C和pH值8.3,在35°C内保持高热稳定性,保温8 h后仍保持90％以上反应活性.在最佳反应条件下添加终浓度1％的过氧化氢酶使得乙醛酸产量提升,相对产率提高了30％.3 L发酵罐上的结果与摇瓶上一致,显示出全细胞法制备乙醛酸的稳定的转化能力,为其工业化奠定了基础.