吡喃糖氧化酶及其表达纯化方法和应用

摘要

本发明涉及一种吡喃糖氧化酶，利用基因工程技术制备吡喃糖氧化酶多肽链，构建重组质粒、重组表达并且纯化，测定吡喃糖氧化酶的活性，然后配置试剂盒检测人血清中的葡萄糖含量，试剂盒包括试剂Ⅰ和试剂Ⅱ两部分。本发明的有益效果是：通过基因工程重组表达吡喃糖氧化酶，该酶产量高、工艺简单、稳定性好、成本低；利用计算机软件分析了吡喃糖氧化酶的氨基酸序列，并根据大量文献研究，选用了不同种属的吡喃糖氧化酶中同源性高的多肽链，表达了有功能性的多肽，既保证了吡喃糖氧化酶的活性，又保证重组蛋白的可溶性表达，较容易表达纯化和使用，过程简单；吡喃糖氧化酶法检测血糖的方法简单、稳定、准确，能较好地抗VC、溶血、乳糜、黄疸的干扰。