由肠溶聚合物包衣的包含嘧啶-A-酮衍生物的药物制剂

摘要

本发明提供了用于口服给药的肠溶聚合物包衣片制剂，其包含磷脂酶A2酶脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)抑制剂，涉及这些制剂的制备方法以及它们在治疗中特别是治疗动脉粥样硬化症中的应用。

说明书

本申请是申请号为200480032593.4的中国专利申请(申请日：2004年8月31日，发明名称：由肠溶聚合物包衣的包含嘧啶-A-酮衍生物的药物制剂)的分案申请。 

本发明涉及口服片剂，其包含磷脂酶A2酶脂蛋白相关磷脂酶A2(phospholipase A2 enzyme Lipoprotein Associated phospholipase A2)(Lp-PLA2)抑制剂，涉及这些制剂的制备方法以及它们在治疗中特别是治疗动脉粥样硬化症(atherosclerosis)中的应用。

WO 01/60805(SmithKline Beecham plc)公开了一类新型的嘧啶酮化合物，以及在N1位被取代且包含硫原子的那些化合物。

WO 01/60805中描述的那些嘧啶酮化合物是酶脂蛋白相关磷脂酶A₂(Lp-PLA₂)抑制剂，因此预期可应用于治疗中，特别是用于例如由动脉粥样硬化症引起的急性冠心病事件的初级和中级预防，该动脉粥样硬化症包括外周血管动脉粥样硬化症和脑血管动脉粥样硬化症。本发明所述的式I化合物是在WO 01/60805中描述的化合物的亚组。

在I期临床试验中给予式I化合物后观察到了气味相关不良反应(adverse events)。包括异常恶臭的粪便、尿液、汗和头发。我们认为该不良反应是由化合物在胃酸性环境中降解生成包含游离巯基的降解产物而引起的。我们进一步相信该降解在弱酸性肠环境中比较不易发生。本发明通过提供用肠溶聚合物包衣的式I化合物片剂而解决该问题。术语“肠溶聚合物”是本领域术语，指优选溶解于肠弱酸性环境中而非胃较强酸性环境中的聚合物。

因此，本发明第一方面提供了一种包含片芯的药物制剂，该片芯含有式(I)化合物作为药物活性成分：

其中：

R^a和R^b一起是(CH₂)_n，其中n是3或4，该R^a和R^b与它们所连接的嘧啶环碳原子形成稠合的5-或6-元碳环；以及，

R¹是任选被卤素取代的苯基；

R²是被NR⁵R⁶取代的C_(1-3)烷基；

R³和R⁴形成4-(4-三氟甲基苯基)苯基部分(moiety)；以及

R⁵和R⁶可以相同或不同，各自选自氢或C_(1-6)烷基；

以及包含肠溶聚合物的壳。

优选地，Ra和Rb与它们所连接的嘧啶环碳原子形成稠合的5元碳环。

优选地，R1在对位被单个卤素取代。特别优选地，所述卤素是氟。

优选地，R5和R6均是C(1-6)烷基，特别优选地，它们均是乙基。

在一种优选的实施方案中，药学活性成分是1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮。

片芯中的活性物质可以以任何常规形式存在；其可以以微粉化形式、碾磨的形式特别是湿法珠磨的形式、或溶解的形式存在。除了活性物质，该片芯可包含压片领域的常规添加剂。在这样的片剂中适当的添加剂可包括稀释剂(本领域技术人员还称为填充剂)如微晶纤维素、甘露醇、无水乳糖、乳糖单水合物、碳酸钙、碳酸镁、磷酸二钙或其混合物，粘合剂如羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、预凝胶化淀粉或阿拉伯胶或其混合物，崩解剂如微晶纤维素(实现稀释剂和崩解剂功能)、交联聚乙烯吡咯烷酮、淀粉乙醇酸钠、交联羧甲基纤维素钠或其混合物，润滑剂如硬脂酸镁或硬脂酸，助流剂或流动辅剂比如硅胶、滑石粉或淀粉，以及稳定剂如泊洛沙姆，脱水无定形硅，矫色剂，芳香剂等。优选地，该片剂包含乳糖作为稀释剂。当存在粘合剂时，优选羟丙基甲基纤维素。优选地，该片剂包含硬脂酸镁作 为润滑剂。优选地，该片剂包含交联羧甲基纤维素钠作为崩解剂。优选地，该片剂包含微晶纤维素作为稀释剂。

稀释剂可以以片芯的10-80％重量范围存在。润滑剂可以以片芯的0.25-2％重量范围存在。崩解剂可以以片芯的1-10％重量范围存在。如果存在微晶纤维素，可以以片芯的10-80％重量范围存在。

优选地，活性成分为片芯重量的10-50％，更优选为片芯重量的15-40％。该片芯可包含任何适宜剂量水平的活性成分，但优选包含至多200mg该活性成分的游离碱。特别优选地，该片芯包含20、30、40、50、60、80、100、120或160mg该活性成分的游离碱。

该片芯可通过压缩其组分的混合物制备。这些组分可直接压制，或可在压制前先制粒。这样的颗粒可通过本领域已知的常规制粒方法形成。在另一方面，该片芯可通过包含将活性物的湿法珠磨悬浮物(wet bead milled suspension)喷雾干燥的方法来制备。在一种可供选择的实施方案中，可将颗粒分别用肠溶壳包衣，然后装入标准胶囊壳中。

该片芯由含有肠溶聚合物的壳包裹。肠溶聚合物例如是纤维素乙酸酞酸酯、纤维素乙酸琥珀酸酯、甲基纤维素酞酸酯、乙基羟基纤维素酞酸酯、聚乙酸乙烯酯酞酸酯(polyvinyl acetate phthalate)、聚丁酸乙烯酯乙酸酯、乙酸乙烯酯-马来酸酐共聚物、苯乙烯-马来单酯共聚物、丙烯酸甲酯-甲基丙烯酸共聚物或甲基丙烯酸酯-甲基丙烯酸-丙烯酸辛酯共聚物。它们可以单独或联合使用，或与上述以外的其它共聚物一起使用。该壳还可包含在活体内既不分解也不溶解的不溶性物质比如烷基纤维素衍生如乙基纤维素，交联聚合物如苯乙烯-二乙烯基苯共聚物，含有羟基的多糖如葡聚糖，经双功能交联剂处理的纤维素衍生物如表氯醇、二氯丙醇或1，2-，3，4-丁二烯二环氧化物。该壳还可包含淀粉和/或糊精。

优选的肠溶材料是单独应用或与增塑剂合用的市售 肠溶聚合物比如 L、 S和 NE。这样的包衣通常以液体溶媒应用，增塑剂的性质取决于该溶媒是否是水性的(aqueous)或非水性的(non-aqueous)。用于水性溶媒的增塑剂包括丙二醇、柠檬酸三乙酯、乙酰柠檬酸三乙酯或 或 A2。非水性溶媒的增塑剂包括这些以及酞酸二乙酯和酞酸二丁酯和癸二酸二丁酯。优选的增塑剂是柠檬酸三乙酯。所含增塑剂的量对于本领域技术人员而言是显而易见的。

该壳还可包括抗粘剂(anti-tack agent)比如滑石粉、硅胶或单硬脂酸甘油酯。优选的抗粘剂是单硬脂酸甘油酯。典型地，该壳可包含约5-25wt％的增塑剂以及至多约50wt.％的抗粘剂，优选1-10wt.％的抗粘剂。

如果需要，可包含表面活性剂以辅助形成聚合物的水性悬浮液。本领域技术人员已知许多可能的表面活性剂。优选地，表面活性剂例如为聚山梨醇酯80、聚山梨醇酯20或月桂基硫酸钠。如果存在，表面活性剂可以是壳的0.1-10％，优选0.2-5％，且特别优选0.5-2％。

在一种实施方案中，在片芯和肠溶衣之间存在封闭包衣(seal coat)。封闭包衣是可用于保护肠溶壳免受可能来自片芯中任何碱性成分的化学侵害的包衣材料。该封闭包衣还可提供较光滑的表面，因此使得肠溶壳更容易附着。本领域技术人员将知道适宜的包衣。优选的封闭包衣由Opadry包衣更优选为Opadry White，且特别优选为Opadry White OY-S-28876来制成。

本发明还提供了本文所述的药物制剂在作为活性治疗物质中的用途。优选地，该制剂用于治疗动脉粥样硬化症。

具体而言，本发明涉及以下方面：

1.药物制剂，其包含片芯，该片芯含有式(I)化合物的药物活性成分：

其中：

R^a和R^b一起是(CH₂)_n，其中n是3或4，该R^a和R^b与它们所连接的嘧啶环碳原子形成稠合的5-或6-元碳环；以及，

R¹是任选被卤素取代的苯基；

R²是被NR⁵R⁶取代的C_(1-3)烷基；

R³和R⁴形成4-(4-三氟甲基苯基)苯基部分；以及

R⁵和R⁶可以相同或不同，各自选自氢和C_(1-6)烷基；

以及包含肠溶聚合物的壳。

2.根据项1的药物制剂，其中所述活性成分是1-(N-(2-(二乙基氨基)乙 基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮。

3.根据项1或2的药物制剂，其中所述片芯进一步包含崩解剂。

4.根据项3的药物制剂，其中所述崩解剂是交联羧甲基纤维素钠。

5.根据项1的药物制剂，其中所述片芯进一步包含稀释剂。

6.根据项5的药物制剂，其中所述稀释剂是乳糖。

7.根据项1的药物制剂，其中所述片芯进一步包含粘合剂。

8.根据项7的药物制剂，其中所述粘合剂是羟丙基甲基纤维素。

9.根据项1的药物制剂，其中所述片芯包含微晶纤维素。

10.根据项1的药物制剂，其中所述肠溶聚合物是 肠溶聚合物。

11.根据项1的药物制剂，其中所述壳进一步包含抗粘剂。

12.根据项1的药物制剂，其中所述壳进一步包含表面活性剂。

13.根据项1的药物制剂，其中所述活性物是微粉化的。

14.制备前述任一项的药物制剂的方法，其包括湿法珠磨。

15.根据项1的药物制剂，其用于治疗动脉粥样硬化症。

附图说明

图1为在体内对活性物肠包衣片剂进行的三-分枝研究，以测试粒径减小升高溶出率的假设。

现将通过实施例的方式描述本发明。

实施例1：

包含各种量1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮(在本实施例中被称为“活性成分”)作为游离碱的片剂(参见表1)。

将乳糖单水合物、微晶纤维素、活性成分、羟丙基甲基纤维素和一部分交联羧甲基纤维素钠(根据表中规定)筛入10升Fielder高剪切掺合机中(可使用任何适宜的高剪切掺合机)并关闭断路器以300rpm掺合5分钟。然后在持续掺合的同时使用推进器(300rpm)和断路器(II速)加入约900ml水，从而将混合物制粒。该颗粒在Glatt 3/5流化床干燥器中干燥，经Comil筛入Pharmatec 10升箱式掺合机中，然后与表中所给出的无水乳糖和残留的交联羧甲基纤维素钠于17rpm掺合15分钟。将硬脂酸镁筛入掺合机中，于17rpm再继续该混合步骤2分钟。使用装备了10.5mm圆形标准凹冲床的Riva  Piccola旋转压片机(可使用任何适宜的压片机)压制经润滑的混合物。在Manesty XL包衣机中，使用如包衣聚合物(可使用任何适宜的包衣剂)制造商推荐的包衣方法参数，通过喷雾包衣成分的水悬浮液而施行封闭包衣以及随后的肠溶包衣。

该方法可使用微粉化活性物按照上述进行，从而制备包含了各种量微粉化活性物作为游离碱的片剂。

实施例2：

包含各种量1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮(该实施例中被称为“活性成分”)作为游离碱的片剂(参见表2)。

使用桨式搅拌器(可使用任何适宜的搅拌器或匀化器)制备活性成分、羟丙基甲基纤维素、泊洛沙姆188和甘露醇在净化水中的悬浮液。然后使该悬浮液通过含有钇/锆小珠的Drais Cosmo湿法珠磨器(可使用任何适宜的湿法珠磨器)直至达到所需的粒径。然后使用Niro Mobile Minor喷雾干燥器(可使用任何适宜的喷雾干燥器)喷雾干燥经碾磨的悬浮液。然后将喷雾干燥过的粉末加入Pharmatec 5升箱式掺合机中并与微晶纤维素和交联羧甲基纤维素钠于17rpm一起掺合超过10分钟。将硬脂酸镁筛入掺合机中，于17rpm再继续该混合步骤1分钟。使用装备了9mm圆形标准凹冲床的Korsch EKO单冲压片机(可使用任何适宜的压片机)压制经润滑的混合物。在Manesty XL包衣机中，使用如包衣聚合物(同样，可使用任何适宜的包衣剂)制造商推荐的包衣方法参数，通过喷雾包衣成分的水悬浮液而施行封闭包衣以及随后的肠溶包衣。

实施例3：

包含60mg的1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮(该实施例中被称为“活性成分”)作为游离碱的片剂(参见表3)。

将无水乳糖、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和活性成分筛入掺合机中并于30rpm掺合15分钟。将硬脂酸镁筛入掺合机中并于18rpm再继续该混合步骤2分钟。使用装备了9.5mm圆形标准凹冲床旋转压片机(可使用任 何适宜的压片机)压制经润滑的混合物。在包衣机中，使用如包衣聚合物(可使用任何适宜的包衣剂)制造商推荐的包衣方法参数，通过喷雾包衣成分的水悬浮液而施行肠溶包衣。

比较实施例4：

包含各种量1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮(该实施例中被称为“活性成分”)作为盐酸盐的片剂(参见表4)。

将乳糖单水合物、微晶纤维素、活性成分、羟丙基甲基纤维素和一半量的交联羧甲基纤维素钠筛入10升Fielder高剪切掺合机中(可使用任何适宜的高剪切掺合机)并关闭断路器以300rpm混合5分钟。然后在持续掺合的同时加入750ml水，从而将混合物制粒。该颗粒在Glatt 3/5流化床干燥器中干燥，经Comil筛入Pharmatec 5升箱式掺合机中，然后与表中所给出的无水乳糖和残留的交联羧甲基纤维素钠于20rpm混合5分钟。将硬脂酸镁筛入掺合机中，于10rpm再继续该混合步骤1分钟。使用装备了9.5mm圆形标准凹冲床的Riva Piccola旋转压片机(可使用任何适宜的压片机)压制经润滑的混合物。在Manesty 10包衣机中，使用如包衣聚合物(同样，可使用任何适宜的包衣剂)制造商推荐的包衣方法参数，通过喷雾包衣成分的水悬浮液而施行封闭包衣以及随后的肠溶包衣。

表1

1.在制备过程中除去水。

2. L30 D-55。所示数量代表在 L30 D-55中有30％固体含量。据计算，每片剂表面区域给出大约6.5mg/cm²的干燥聚合物。

表2

1.在制备过程中除去水。

2.在喷雾干燥过程中使用氮气。

3. L30 D-55。所示数量代表在 L30 D-55中有30％固体含量。据计算，每片剂表面区域给出大约6.5mg/cm²的干燥聚合物。

表3

1.在制备过程中除去水。

2. L30 D-55。所示数量代表在 L30 D-55中有30％固体含量。据计算，每片剂表面区域给出大约10mg/cm²的干燥聚合物。

表4

注意：

1.分别相当于20、40、60、80和100mg的活性物。

2.在制备过程中除去水。

3. L30 D-55。所示数量代表 L30 D-55中30％固体含量。据计算，每片剂表面区域给出大约10mg/cm²的干燥聚合物。

实施例5：

在模拟胃液和模拟肠液中测量取代的尿嘧啶。

特别是在pH相当于人类胃中通常状态的情况下，式(I)化合物水解形成1∶1化学剂量的硫醇和尿嘧啶。该硫醇具有此类化合物的气味特征，该气味强度随着硫醇的浓度而增加。由此，尿嘧啶的浓度是气味强度的代替标记物。

为了在体外模拟肠溶衣在体内对于1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮游离碱(在该实施例中被称为“活性物”)升高异常气味倾向的作用，进行了双分枝研究。在两个分枝研究中，均将60mg的活性物浸入250mL保持在37℃的模拟胃液中，并且于USP2溶出仪中以50rpm搅拌。在一个分枝研究中，活性物存在于肠包衣片中。在另一个分枝研究中，活性物为未制剂的药物物质，其在化学上相当于无肠溶衣片剂。

活性物所生成的尿嘧啶是N-[2-(二乙基氨基)乙基]-2-(2，4-二氧代-2，3，4，5，6，7-六氢-1H-环戊并[d]嘧啶-1-基)-N-{[4′-(三氟甲基)-4-联苯基]甲基}乙酰胺，如式(II)所示：

在两个分枝研究中，随着时间推移通过抽取小量液体样品并比较其与基质-匹配外标(即，合成的式(II))的LC-MS应答而监测溶液中式(II)的水平。

表5

¹QL＝低于该浓度就无法准确定量式(II)的浓度(其据经验估计为1.71ng/mL)。

上表中列出的结果清楚地表明了肠溶衣使得由活性物在典型的人胃条件下形成的式(II)(以及，通过化学计量，硫醇)水平降低了4个数量级。通过拓展，这些数据支持了该假设：活性物的肠溶衣片剂将降低或消除在体内活性物本将产生的异常气味。

根据其性质，肠溶衣将在pH相当于人肠中通常情况的条件下被破坏。

为了在体外模拟片剂在人肠内升高异常气味的趋向，将相当于80mg的活性物浸入250mL维持在37℃的模拟肠液中(相当于人禁食状态)，在USP2溶出仪中以50rpm搅拌。这化学等价于肠溶衣已被破坏且片芯已基本上崩解的片剂。

随时间推移通过抽取小量液体样品并比较其与基质-匹配的外标(即，合成的式(II))分LC-MS应答而监测式(II)在溶液中的水平。

表6

QL＝低于该浓度就无法准确定量式(II)的浓度(其据经验估计为1.71ng/mL)。

上表中列出的结果清楚地表明了，与其在模拟胃液中的表现相反，活性物在模拟肠液中形成式(II)的倾向低，并因此，如模拟胃液所讨论的，可能在人肠中产生异常气味的倾向低。

实施例6：

对于肠溶衣片剂和非肠溶衣片剂所观察到不良反应的研究比较结果。

使用60mg的1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮进行了双盲、4-因素(session)、交叉、安慰剂对照、随机、重复剂量、相对生物利用度研究。该试验观察了标准游离碱制剂、肠溶衣游离碱和肠溶衣盐酸盐相比较所示的气味-相关不良反应。接触盐酸盐、肠溶衣制剂的受试者数目与接触游离碱的相当。

表7

^这些受试者之一报道了2种不同类型的异常皮肤气味但仅计数一次

--没有事件报道

可清楚地看出，与该化合物游离碱形式相关的不良反应水平在该化合物经包肠溶衣时大大地降低了。

比较实施例7：

对于肠溶衣盐酸盐片和安慰剂所观察到不良反应的研究比较结果。

使用多种剂量1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮盐酸盐的肠溶衣制剂进行双盲、3-因素、交叉、安慰剂对照、重复剂量研究，在健康受试者体内评价药物动力学以及气味-相关的不良反应的频率。在该研究中，观察到活性药物(盐酸盐)相对于安慰剂的气味-相关不良反应频率更高，简述于下表中：

表8

--没有报道事件

实施例8：

生物增强制剂(Formulation Bioenhancement)

湿法制粒是药物制造中的标准工艺。

1-(N-(2-(二乙基氨基)乙基)-N-(4-(4-三氟甲基苯基)苄基)氨基羰基甲基)-2-(4-氟苄基)硫基-5，6-三亚甲基嘧啶-4-酮(在本实施例中被称为“活性物”)是胺，并因此在人体内于典型的肠pH(pH 6.8)中溶解度低于典型的胃pH(1至4)。因此，其利用度可能因对片剂施用肠溶衣而减少，该肠溶衣将延缓片芯溶解直至片剂到达肠。已开发出了可供选择的制剂，其中活性物的粒径经碾磨而减少。该减少的结果是增加了活性物表面积，其将导致溶出速率的增加(破坏肠溶衣后)。经一段时间后，其中的活性物驻留于肠中，溶出速率的增加预期将导致更高的利用度。

研究了两种减少粒径的技术，即喷气碾磨(所谓的“微粉化”)以及碾磨活性物与钇-锆小珠混悬物的碾磨(所谓的“湿法珠磨”)。

在体内，对于活性物肠包衣片剂进行了三-分枝研究以测试粒径减小升高溶出率的假设。对于各分枝研究，将包含相当于80mg的活性物的肠包衣片剂置于500mL保持在37℃的模拟肠液中(SIF，相当于人禁食状态，pH6.8)，并于USP2溶出仪中以100rpm搅拌。此三分枝研究的差别仅在于片芯的性质：在第一个分枝研究中，通过湿法制粒法制备片芯，没有减小粒径；在第二个分枝研究中，通过湿法制粒法由微粉化活性物制备片芯；在第三个分枝研究中，通过包括喷雾-干燥碾磨过的活性物悬浮液湿珠的方法制备片芯。

使用Beer′s Law计算所释放的部分，活性物在溶液中的悬浮物通过在相应于其光谱最大值的波长处测量其吸收度而监测。

所得数据(示于表9和图1中)证明了前述假设：

表9