对鞘氨醇-1-磷酸(S1P)具有活性的*二唑衍生物

摘要

本发明公开了式(I)的二唑基化合物，其对鞘氨醇-1-磷酸(S1P)具有活性，特别地可用于治疗红斑狼疮。A为苯基或5或6-元杂芳环；R1为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：卤素、C(1-3)烷氧基、C(1-3)氟代烷基、氰基、任选取代的苯基、C(1-3)氟代烷氧基、C(1-6)烷基和C(3-6)环烷基；R2为氢、卤素或C(1-4)烷基；B为选自下式(a)、(b)、(c)的7元饱和环；R3为氢或(CH2)1-4CO2H；R4为氢或任选插入氧的C(1-3)烷基。

说明书

本发明涉及具有药理学活性的新的二唑衍生物，它们的制备方法，含有它们的药物组合物以及它们在治疗各种疾病中的用途。

鞘氨醇-1-磷酸(S1P)是一种由鞘氨醇激酶磷酸化鞘氨醇而形成的生物活性类脂介体，并且发现其在血液中浓度较高。许多类型细胞都生产并分泌S1P，包括如血小板和肥大细胞的那些造血起源的细胞(Okamoto等，1998 JBiol Chem 273(42)：27104；Sanchez和Hla 2004，J Cell Biochem 92：913)。其生物作用较广，包括对细胞增殖、分化、运动性、血管化的调节以及对炎症细胞和血小板的活化(Pyne和Pyne 2000，Biochem J.349：385)。目前记载有五种亚型的S1P响应受体，S1P1(Edg-1)、S1P2(Edg-5)、S1P3(Edg-3)、S1P4(Edg-6)和S1P5(Edg-8)，它们形成了受体的G-蛋白质偶联的内皮分化基因家族的一部分(Chun，等，2002 Pharmacological Reviews 54：265，Sanchez and Hla2004 J Cellular Biochemistry，92：913)。该5种受体显示不同的mRNA表达，其中S1P1-3被广泛表达，S1P4被表达在淋巴组织和造血组织上，S1P5主要表达在脑中并较低程度地表达在脾脏中。它们通过G蛋白质的不同亚类发出信号，以促成各种生物响应(Kluk和Hla，2002 Biochem et Biophysica Acta1582：72，Sanchez和Hla 2004，J Cellular Biochem 92：913)。

提出的S1P1受体的作用包括运输淋巴细胞、诱导/抑制细胞因子，和对内皮细胞的作用(Rosen和Goetzl，2005 Nat Rev Immunol.5：560)。S1P1受体的激动剂已经被用于许多自身免疫和移植的动物模型中，包括MS的试验性自身免疫脑脊髓炎(EAE)模型，以减少诱导疾病的严重性(Brinkman等2003 JBC 277：21453；Fujino等2003 J Pharmacol Exp Ther 305：70；Webb等2004 J Neuroimmunol 153：108；Rausch等2004 J Magn Reson Imaging20：16)。报导认为这种活性通过S1P1激动剂对淋巴细胞经淋巴系统的循环的作用而介导。用S1P1激动剂进行治疗产生了第二淋巴样器官如淋巴结内部淋巴细胞的隔离(sequestration)，包括动物模型中的可逆外周淋巴细胞生成(Chiba等1998，J Immunology 160：5037，Forrest等2004 J Pharmacol ExpTher 309：758；Sanna等2004 JBC 279：13839)。关于激动剂，已公开的数据表明化合物治疗诱导了S1P1受体从细胞表面因内化的损失(Graler和Goetzl2004 FASEB J 18：551；Matloubian等2004 Nature 427：355；Jo等2005 ChemBiol 12：703)，以及这种S1P1受体在免疫细胞上的减少有助于减少T细胞从淋巴结运动回到血流。

S1P1基因缺失导致了胚胎致死现象。检查S1P1受体在淋巴细胞迁移和运输中的作用的实验已经包括标记的S1P1缺失的T细胞向辐射后的野生型小鼠的过继转移。这些细胞显示从第二淋巴样器官的流出减少(Matloubian等2004 Nature 427：355)。

S1P1还被认为具有内皮细胞连接调节的作用(Allende等人2003102：3665，Blood Singelton等人2005 FASEB J 19：1646)。关于该内皮作用，已经报导了S1P1激动剂对孤立的淋巴结有作用，而孤立淋巴结可能对免疫病变有调节作用。S1P1激动剂造成了淋巴窦的内皮间质“门”的关闭，而所述淋巴窦的内皮间质“门”排空(drain)淋巴结并防止淋巴细胞流出(Wei wtal 2005，Nat.Immunology 6：1228)。

免疫抑制化合物FTY720(JP11080026-A)已经显示减少动物和人体内的循环淋巴细胞，在免疫病变的动物模型中具有疾病调节活性，并且降低了在缓解复发(relapsing remitting)的多发性硬化症中的缓解速率(Brinkman等2002 JBC 277：21453，Mandala等2002 Science 296：346，Fujino等2003 JPharmacology and Experimental Therapeutics 305：45658，Brinkman等2004American J Transplantation 4：1019，Webb等2004 J Neuroimmunology 153：108，Morris等2005 EurJ Immunol 35：3570，Chiba 2005 Pharmacology andTherapeutics 108：308，Kahan等2003，Transplantation 76：1079，Kappos等2006New Eng J Medicine 335：1124)。该化合物是一种前药，其在体内由鞘氨醇激酶磷酸化得到对S1P1、S1P3、S1P4和S1P5受体具有激动剂活性的分子。临床研究表明用FTY720治疗在治疗的头24小时内导致心动过缓(Kappos等2006 New Eng J Medicine 335：1124)。根据许多基于细胞的实验和动物实验，认为该心动过缓是因为对S1P3受体的激动作用。这些实验包括使用不同于野生型小鼠的S1P3敲除动物，其在给药FTY720和使用S1P1选择性化合物后并没有显示出心动过缓。(Hale等2004 Bioorganic&Medicinal ChemistryLetters 14：3501，Sanna等2004 JBC 279：13839，Koyrakh等2005 American JTransplantation 5：529)。

因此，需要相对于S1P3，对S1P1受体具有选择性的激动剂化合物，可能预期会显示出减小诱导心动过缓的趋势。

下列专利申请描述了作为S1P1激动剂的二唑衍生物：WO03/105771、WO05/058848、WO06/047195、WO06/100633、WO06/115188、WO06/131336、WO07/024922和WO07/116866。

下列专利申请描述了作为S1P受体激动剂的四氢异喹啉基-二唑衍生物：WO06/064757、WO06/001463、WO04/113330。

WO08/064377描述了具有S1P1受体活性的苯并环庚基类似物。

现已发现一类新结构的化合物，其提供了S1P1受体的激动剂。

因此，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐：

A为苯基或5或6-元杂芳环；

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：卤素、C_(1-3)烷氧基、C_(1-3)氟代烷基、氰基、任选取代的苯基、C_(1-3)氟代烷氧基、C_(1-6)烷基和C_(3-6)环烷基；

R₂为氢、卤素或C_(1-4)烷基；

B为选自下列基团的7元饱和环：

R₃为氢或(CH₂)_1-4CO₂H；

R₄为氢或任选插入氧的C_(1-3)烷基。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基；

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、异丙氧基和氰基；

R₂为氢；

B为(a)；

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；

R₄为氢。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基或吡啶基；

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、异丙氧基和氰基；

R₂为氢；

B为(b)；

R₃为氢或(CH₂)_1-4CO₂H；

R₄为氢。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基或吡啶基；

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、甲氧基、异丙氧基、三氟甲基、苯基和氰基；

R₂为氢；

B为(c)；

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；

R₄为氢。

在一个实施方案中，A为苯基。在另一个实施方案中，A为3，4-二取代的苯基。

在一个实施方案中，R₁为两个取代基，其中一个为C_(1-3)烷氧基，另一个选自卤素或氰基。在另一个实施方案中，R₁为两个取代基，其中一个为异丙氧基，且另一个选自氯或氰基。在另一个实施方案中，R₁为两个取代基，其选自氯、异丙氧基和氰基。在另一个实施方案中，R₁为氯和异丙氧基。在另一个实施方案中，当A为苯基时，R₁为在3-位上的氯和在4-位上的异丙氧基，或者当A为吡啶基时，R₁为在5-位上的氯和在6-位上的异丙氧基。在另一个实施方案中，R₁为异丙氧基和氰基。在另一个实施方案中，当A为苯基时，R₁为在3-位上的氰基和在4-位上的异丙氧基，或者当A为吡啶基时，R₁为在5-位上的氯和在6-位上的异丙氧基。

在一个实施方案中，R₂为氢。

在一个实施方案中，B为(b)。在另一个实施方案中，B为(c)。

在一个实施方案中，R₃为(CH₂)_1-3CO₂H。在另一个实施方案中，R₃为(CH₂)₃CO₂H。

在一个实施方案中，R₄为氢。

因此，本发明提供了式(IA)化合物或其药学上可接受的盐：

A为苯基或5或6-元杂芳环；

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：卤素、C_(1-3)烷氧基、C_(1-3)氟代烷基、氰基、任选取代的苯基、C_(1-3)氟代烷氧基、C_(1-6)烷基和C_(3-6)环烷基；

R₂为氢、卤素或C_(1-4)烷基；

B为选自下列基团的7元饱和环：

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；

R₄为氢或任选插入氧的C_(1-3)烷基。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基；和/或

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、异丙氧基和氰基；和/或

R₂为氢；和/或

B为(a)；和/或

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；和/或

R₄为氢。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基；和/或

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、异丙氧基和氰基；和/或

R₂为氢；和/或

B为(b)；和/或

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；和/或

R₄为氢。

在本发明的一个实施方案中，

A为苯基；和/或

R₁为至多两个取代基，所述取代基独立地选自：氯、甲氧基、异丙氧基、三氟甲基、苯基和氰基；和/或

R₂为氢；和/或

B为(c)；和/或

R₃为氢或(CH₂)_1-3CO₂H；和/或

R₄为氢。

术语“烷基”作为基团或基团(如烷氧基或羟基烷基)的一部分，是指所有异构形式的直链或支链烷基。术语“C_(1-6)烷基”是指如上定义的烷基，其含有至少1个且至多6个碳原子。这样的烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。这样的烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。

合适的C_(3-6)环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。

本文中所用的术语“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)，且术语“卤”是指卤素：氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)和碘(-I)。

术语“杂芳基”表示包含一个或多个选自O、N或S的杂原子的不饱和环。5或6元杂芳环的实例包括吡咯基、三唑基、噻二唑基、四唑基、咪唑基、吡唑基、异噻唑基、噻唑基、异唑基、唑基、二唑基、呋咱基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基和三嗪基。

在某些式(I)化合物中，取决于取代基的性质，存在手性碳原子，并因此式(I)化合物可以立体异构体存在。本发明延伸至式(I)化合物的所有旋光异构体如立体异构体形式，包括对映异构体、非对映异构体及其混合物如外消旋体。不同的立体异构体形式可利用常规的方法彼此之间分离或拆分得到，或任何指定的异构体可利用常规立体选择性或不对称合成得到。

本文中的某些化合物可以不同的互变异构体形式存在，并且应该理解本发明包括所有这些互变异构体形式。

应该理解本发明的某些化合物不但含有酸性基团而且含有碱性基团，因此在某些pH值它们可以两性离子形式存在。

本发明合适的化合物为：

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丁酸

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丙酸

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-6-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸

6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸

8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

3-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

4-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂

3-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸

[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸

(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸

(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸

4-(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸

4-(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸

2-(甲氧基)-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

4-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

3-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-8-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

4-[8-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

5-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]戊酸

[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸

3-[9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

3-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

3-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]-3-吡啶甲腈甲酸盐

7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

4-[7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸

或其药学上可接受的盐。

在一个实施方案中，本发明的式(I)化合物为：

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸或其药学上可接受的盐。

在另一个实施方案中，本发明的式(I)化合物为：

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸或其药学上可接受的盐。

式(I)化合物的药学上可接受的衍生物包括式(I)化合物的任何药学上可接受的盐、酯、或这些酯的盐，当将其给予接受者时能(直接或间接地)提供式(I)化合物或其活性代谢物或残余物。

式(I)化合物可形成盐。应当理解，对于在药物中使用，式(I)化合物的盐应该是药学上可接受的。合适的药学上可接受的盐是本领域的技术人员显而易见的，并包括在J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中所述的那些盐，例如与无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸；以及与有机酸例如琥珀酸、马来酸、乙酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、甲磺酸或萘磺酸形成的酸加成盐。某些式(I)化合物可与一或多当量的酸形成酸加成盐。本发明在其范围内包括所有可能的化学计量的和非化学计量的形式。盐还可以由药学上可接受的碱包括无机碱和有机碱制备。衍生自无机碱的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、二价锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。衍生自药学上可接受的有机碱的盐包括衍生自下述碱的盐：伯胺、仲胺以及叔胺；取代的胺包括天然存在的取代的胺；和环胺。具体的药学上可接受的有机碱包括精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N′-二苄基乙二胺、二乙基胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基-吗啉、N-乙基哌啶、葡萄糖胺、葡糖胺、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙基胺、赖氨酸、甲基葡萄糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙基胺、三甲基胺、三丙基胺、三(羟基甲基)氨基甲烷(TRIS，氨基丁三醇)等。盐还可以由碱性离子交换树脂例如多胺树脂形成。当本发明的化合物为碱性的时候，盐可由药学上可接受的酸包括无机酸和有机酸制备。所述的酸包括乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、柠檬酸、乙磺酸、乙二磺酸、富马酸、葡糖酸、谷氨酸、氢溴酸、氢氯酸、羟乙基磺酸、乳酸、马来酸、苹果酸、扁桃酸、甲磺酸、半乳糖二酸、双羟萘酸、泛酸、磷酸、丙酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、对甲苯磺酸等。

药学上可接受的酸加成盐可通过与合适的酸或酸衍生物反应而常规地制备。与碱形成的药学上可接受的盐可通过与合适的无机碱或有机碱反应而常规地制备。

式(I)化合物可以以结晶或非结晶形式制备，如果为结晶的话，则可以任选为水合的或溶剂化的。本发明范围包括化学计量的水合物或溶剂化物以及含有可变量的水和/或溶剂的化合物。

式(I)化合物的所有盐、溶剂化物、水合物、络合物、多晶型物、前药、放射标记的衍生物、立体异构体和旋光异构体均包括在本发明的范围内。

本发明化合物对于S1P1受体的效能和功效可以通过如本文所述的在人克隆的受体上进行的GTPγS试验测定。使用本文所述的功能试验也已经证明式(I)化合物对于S1P1受体具有激动活性。

因此，式(I)化合物及它们药学上可接受的盐用于治疗由S1P1受体介导的病症或疾病。特别是，式(I)化合物及它们药学上可接受的盐用于治疗多发性硬化症、自身免疫性疾病、慢性炎性疾病、哮喘、炎性神经病、关节炎、移植、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎、红斑狼疮、牛皮癣、缺血-再灌注损伤、实体肿瘤(solid tumours)和肿瘤转移、与血管生成有关的疾病、血管疾病、疼痛病症、急性病毒病、炎性肠病、胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病(后文中称作“本发明的疾病”)。

因此，式(I)化合物及它们药学上可接受的盐用于治疗红斑狼疮。

因此，式(I)化合物及它们药学上可接受的盐用于治疗牛皮癣。

因此，式(I)化合物及它们药学上可接受的盐用于治疗多发性硬化症。

应当理解本文中所用的″治疗″包括预防以及确定症状的减轻。

因此，本发明还提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其为用作特别是治疗由S1P1受体所介导的病症或疾病的治疗物质。特别是，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其为用作治疗多发性硬化症、自身免疫性疾病、慢性炎性疾病、哮喘、炎性神经病、关节炎、移植、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎、红斑狼疮、牛皮癣、缺血-再灌注损伤、实体肿瘤和肿瘤转移、与血管生成有关的疾病、血管疾病、疼痛病症、急性病毒病、炎性肠病、胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病的治疗物质。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐为用作治疗红斑狼疮的治疗物质。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐为用作治疗牛皮癣的治疗物质。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐为用作治疗多发性硬化症的治疗物质。

本发明还提供了治疗哺乳动物包括人中可由S1P1受体所介导的病症或疾病的方法，所述方法包括给药于患者治疗上安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。特别地，本发明提供了治疗多发性硬化症、自身免疫性疾病、慢性炎性疾病、哮喘、炎性神经病、关节炎、移植、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎、红斑狼疮、牛皮癣、缺血-再灌注损伤、实体肿瘤和肿瘤转移、与血管生成有关的疾病、血管疾病、疼痛病症、急性病毒病、炎性肠病、胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病的方法，所述方法包括给药于患者治疗上安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

本发明提供了治疗红斑狼疮的方法，所述方法包括给药于患者治疗上安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

本发明提供了治疗牛皮癣的方法，所述方法包括给药于患者治疗上安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

本发明提供了治疗多发性硬化症的方法，所述方法包括给药于患者治疗上安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。

另一方面，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗由S1P1受体所介导的病症或疾病的药物中的用途。

特别地，本发明提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备用于治疗多发性硬化症、自身免疫性疾病、慢性炎性疾病、哮喘、炎性神经病、关节炎、移植、节段性回肠炎、溃疡性结肠炎、红斑狼疮、牛皮癣、缺血-再灌注损伤、实体肿瘤和肿瘤转移、与血管生成有关的疾病、血管疾病、疼痛病症、急性病毒病、炎性肠病、胰岛素和非胰岛素依赖性糖尿病的药物。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐，其用于制备用于治疗红斑狼疮的药物。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐，其用于制备用于治疗牛皮癣的药物。

式(I)化合物及它们药学上可接受的盐，其用于制备用于治疗多发性硬化症的药物。

为了在治疗中使用式(I)化合物及其药学上可接受的盐，通常根据标准的制药方法将它们配制成药物组合物。本发明还提供了药物组合物，其包括式(I)化合物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的载体或赋形剂。

在另一方面，本发明提供了制备药物组合物的方法，所述方法包括将式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体或赋形剂相混合。

本发明的药物组合物可以合适地通过在环境温度下以及大气压力下混合制备，通常适合于口服、肠胃外或直肠给药，并且可以以片剂、胶囊、口服液体制剂、粉剂、粒剂、锭剂、可重新配制粉末(reconstitutable powders)、可注射或可输注的溶液或悬浮液或栓剂的形式存在。通常优选口服给药的组合物。

对于口服给药的片剂和胶囊可为单位剂型，并且可含有常规赋形剂，如粘合剂(如预胶化的玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或羟基丙基甲基纤维素)；填充剂(如乳糖，微晶纤维素或磷酸氢钙)；压片润滑剂(如硬脂酸镁，滑石或二氧化硅)；崩解剂(如马铃薯淀粉或淀粉羟乙酸钠)；和可接受的润湿剂(如月桂基硫酸钠)。片剂可通过通常的药物实践中熟知的方法进行包衣。

口服液体制剂可以以例如含水或含油悬浮液、溶液、乳液、糖浆或酏剂的形式存在，或者可以以干产品的形式存在，这种干产品在使用前用水或其它合适的载体(vehicle)重新配制(reconstitution)。这些液体制剂可以含有常规添加剂例如助悬剂(如山梨醇糖浆、纤维素衍生物或氢化食用脂肪)，乳化剂(如卵磷脂或阿拉伯树胶)，非水载体(其可以包括食用油如杏仁油，油酯，乙醇或分馏植物油(fractionated vegetable oils))，防腐剂(如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸)，以及如果需要的话，该制剂还可以含有常规调味剂(flavouring)或着色剂、缓冲性盐和甜味剂。口服给药制剂可适当地配制成活性化合物的控释释放剂型。

对于肠胃外给药，使用本发明的化合物或其药学上可接受的盐以及无菌载体配制成液体单位剂量形式。注射用制剂可以使用本发明的化合物或其药学上可接受的衍生物以及无菌载体，任选地加入防腐剂，例如装在安瓿或多剂量容器中以单位剂型存在。组合物可以采取在油性或水性载体中的混悬液、溶液或乳液的形式，并且可以含有配制试剂，如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。另一方面，活性成分可以是粉末形式，在使用前用合适的载体，如无菌无热原水来配制。根据所用的载体及浓度，可将所述化合物悬浮或溶解在所述载体中。在配制溶液的过程中，为了用于注射可将所述化合物溶解和过滤灭菌，随后填充到合适的小瓶(vial)或安瓿中，然后密封。有利地，将助剂例如局部麻醉剂、防腐剂和缓冲剂溶于载体中。为了提高稳定性，可将组合物填充到小瓶中后，将其冷冻并在真空下除去水。除了将所述化合物悬浮在载体中而不是溶于载体中，并且不能通过过滤灭菌外，以基本上相同的方式配制肠胃外悬浮液。在将化合物悬浮于无菌载体中之前，可通过暴露于环氧乙烷中来对所述化合物进行灭菌。有利地，将表面活性剂或润湿剂加入到所述组合物中，以便促进化合物的均匀分布。

洗剂可用水性或油性基质配制，洗剂一般还包含一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。滴剂可以用水性或非水性基质配制，还包含一种或多种分散剂、稳定剂、增溶剂或助悬剂。它们还可含有防腐剂。

式(I)化合物或其药学上可接受的盐还可以制成直肠组合物的形式，如栓剂或者保留灌肠剂，例如含有常规栓剂基质如可可脂或其它甘油酯。

式(I)化合物或其药学上可接受的盐还可被配制成长效制剂(depotpreparation)。这些长效制剂可以通过植入(implantation)方式(例如皮下或者肌内)或者通过肌肉注射方式给药。因此，例如本发明的化合物可以用合适的聚合物或者疏水性材料(例如作为在可接受油中的乳液)或离子交换树脂，或以微溶性衍生物例如微溶性盐制成制剂。

对于鼻内给药，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以被配制成通过合适的计量或单一剂量装置给药的溶液，或者用适合的载体配制成粉末混合物，利用适合的递药装置给药。因而，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以被配制成口服、口含、肠胃外、局部(包括眼和鼻)、长效或直肠给药剂型或者被配制成适合于借助吸入或吹入(通过口或鼻)给药的剂型。

式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以被配制成用于局部给药的软膏剂、霜剂、凝胶剂、洗剂、阴道栓剂、气雾剂或滴剂(例如眼、耳或鼻滴剂)。软膏剂和霜剂例如可以用水性或油性基质加以配制，其中加入适合的增稠剂和/或胶凝剂。眼部给药用软膏剂可以使用经过灭菌的组分、按无菌方式加以制备。

根据给药方法，所述组合物可含有0.1％～99重量％，优选地含有10～60重量％的活性物质。用于治疗前述疾病的化合物的剂量可按常规的方式随疾病的严重程度、患者的体重以及其他类似的因素而改变。但是，作为一般性的指导，合适的单位剂量可为0.05～1000mg，1.0～500mg或1.0～200mg；并且所述的单位剂量可以每天多于一次给药，例如每天两次或三次给药。

式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以组合制剂(combinationpreparations)、以与其他的活性成分组合的形式使用。例如，本发明化合物可与环孢霉素A、甲氨喋呤、类固醇、雷帕霉素、促炎细胞因子抑制剂、免疫调节剂包括生物制剂或其他治疗上有效的化合物组合使用。

本发明也包括同位素标记的化合物，其与在式I和下面中所述的那些化合物相同，但实际上一个或多个原子被具有不同于自然界中通常存在的原子量或质量数的原子量或质量数的原子所替换。可掺入到本发明的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、碘和氯的同位素，如³H、¹¹C、¹⁴C、¹⁸F、¹²³I和¹²⁵I。

含有上述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物及所述化合物的药学上可接受的盐在本发明的范围内。本发明同位素标记的化合物(例如掺入放射性同位素如³H、¹⁴C的化合物)可用于药物和/或底物组织分布试验。氚代，即³H，以及碳-14，即，¹⁴C，同位素是特别优选的，由于它们易于制备以及检测。¹¹C和¹⁸F同位素尤其可用于PET(正电子发射断层扫描术)，且¹²⁵I同位素特别用于SPECT(单光子发射计算机化断层显象)，它们都用于脑成像。此外，用较重的同位素(如氘，即²H)进行取代能够提供某些治疗优点，因为它们有更好的代谢稳定性，例如增加的体内半衰期或降低的剂量需求，且因此在一些情况下较重的同位素是优选的。同位素标记的本发明的式(I)化合物及下述化合物一般可通过实施在下述方案和/或在实施例中公开的方法，利用易得的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来进行制备。

在另一个方面，本发明提供了制备式(I)化合物的方法。

一种可以用于制备式(I)化合物的途径示于方案1，其中B为

其中R₁、R₂、R₄和A如式(I)中所述，只是R₂不为氯、溴或碘，R为烷基(例如乙基、叔丁基)，且hal为氯、溴或碘。

方案1

可市售购得或可通过许多途径制得(如Johnson，Paul D.等；Bioorganic&Medicinal Chemistry Letters(2003)，13(23)，4197-4200)的式(i)化合物，可以通过在合适的亚硝酸酯如亚硝酸叔丁酯的存在下，在合适的溶剂如四氢呋喃(THF)中，使用碘仿处理转化为式(ii)化合物。式(ii)化合物可以通过在溶剂如THF中，在升高的温度如80℃下，使用合适的还原剂如二硼烷或氢化铝锂处理转化为式(iii)化合物。式(iii)化合物可以通过如下方法转化为其中P表示合适的保护基如叔丁氧羰基(BOC)的保护的式(iv)衍生物：例如在碱如三乙胺存在下，在合适的溶剂如二氯甲烷(DCM)中，使用焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯处理。式(iv)化合物可以通过在催化剂如四(三苯基膦)合钯(0)存在下，在合适的溶剂如二甲基甲酰胺(DMF)中，在升高的温度如80℃下，使用合适的氰基来源化合物如氰化锌处理转化为式(v)化合物。式(v)化合物可以通过在溶剂如甲醇或乙醇中，在升高的温度如60℃下，使用盐酸羟胺和合适的碱如碳酸氢钠处理转化为式(vi)化合物。式(vi)化合物可以通过在碱如三乙胺存在下，在合适的溶剂如DMF中，使用式(viii)酰氯处理转化为式(ix)化合物。将上述反应典型地在室温下搅拌一段时间，然后在升高的温度如120℃下搅拌。式(viii)酰氯可市售购得或可通过常规方法由相应的式(vii)酸制得。或者，式(vi)化合物可以通过在合适的溶剂如DMF中，在合适的酰胺偶联试剂如1-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDAC)和1-羟基苯并三唑(HOBT)存在下，使用式(vii)羧酸处理转化为式(ix)化合物。上述反应典型地在升高的温度如50-80℃下进行。典型地，在加入式(vi)化合物前，将式(vii)酸、EDAC和HOBt在室温下搅拌一段时间。其中P＝BOC的式(ix)化合物可以通过在合适的溶剂如1，4-二烷中，使用合适的酸典型地为三氟乙酸或盐酸处理转化为式(x)化合物。式(x)化合物可以通过在碱如碳酸铯存在下，在溶剂如DMF或乙腈中，使用式(xi)烷基化试剂处理转化为式(xii)化合物。上述反应可以在升高的温度如70℃下进行。式(xi)烷基化试剂典型地为市售购得或可使用标准方法制得。式(xii)化合物可以通过如下方法转化为某些其中B为式(a)且式(a)中R₃表示(CH₂)_1-4CO₂H的式(I)化合物：在醇溶剂如乙醇或甲醇中，使用碱如氢氧化钠水溶液处理。

可以加入共溶剂如THF以助溶。水解反应可以在室温或在升高的温度如50-80℃下进行。或者，上述转化可以使用固体氢氧化钠在乙醇中的溶液，在微波反应器中，在如100℃的温度下进行。或者，其中R为叔丁基时，使用三氟乙酸(TFA)或盐酸进行反应。

可以选择的通过方案2所示的途径制备式(I)化合物，其中B为

其中R₂和R₄均为氢，R₃为(CH₂)_1-4CO₂H，R₁和A如式(I)中所定义，而且二唑部分在6位处与苯并氮杂部分相连。

方案2

可市售购得的式(xiii)化合物可以通过方案1中所述的用于将(v)转化为(vi)的方法，使用盐酸羟胺处理转化为式(xiv)化合物。式(xiv)化合物可以通过使用方案1中所述的用于将(vi)转化为(ix)的方法，在碱如三乙胺存在下，使用式(viii)酰氯处理转化为式(xv)化合物。式(xv)化合物可以通过如下方法转化为式(xvi)化合物：在溶剂如THF中，在低温如-78℃下，使用合适的碱如正丁基锂处理，然后用烯丙基溴处理。式(xvi)化合物可以通过如下方法转化为式(xvii)化合物：在合适的溶剂如DCM中，在低温如-78℃下，使用臭氧处理，然后在合适的溶剂如THF中，使用合适的还原剂如硼烷-二甲基硫醚复合物还原。式(xvii)化合物可以转化为式(ix)化合物，典型地通过在Mitsunobu条件下的环化反应得到：例如在合适的溶剂如DCM中，使用偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)和三苯基膦处理，然后按照方案1中所述的用于将(iii)转化为(iv)的方法，在苯并氮杂的氮原子上引入如BOC的合适的保护基。式(ixa)化合物可以按照如方案1中所述用于将(ix)转化为式(I)化合物的方法，转化为式(I)化合物。

一种可以用于制备式(I)化合物的途径示于方案3中，其中B为

其中R₃为(CH₂)_1-4CO₂H，R₁、R₂、R₄和A如式(I)中所定义，只是R₂不为氯、溴或碘，R为烷基(如甲基，叔丁基)，且Hal为氯、溴或碘。

方案3

可市售购得(如Aldrich)或可使用标准方法制得的式(xviii)化合物可以转化为式(xx)化合物，典型地通过在Mitsunobu条件下，使用如DIAD和三苯基膦，在合适的溶剂如THF中，与其中P₁表示合适的保护基如BOC的保护的式(xix)乙醇胺反应得到。式(xx)化合物可以通过使用酸典型地为三氟乙酸或盐酸处理转化为式(xxi)和/或式(xxii)化合物。式(xxi)化合物也可以通过在合适的溶剂如甲苯中，在升高的温度如80℃下，加热转化为式(xxii)化合物。式(xxii)化合物可以通过如下方法转化为式(xxiii)化合物：在溶剂如THF中，在低温如低于15℃下，然后升温至如80℃，使用合适的还原剂如氢化铝锂处理。式(xxiii)化合物可以通过使用路易斯酸如三溴化硼或强酸如HBr处理转化为式(xxiv)化合物。

式(xxiv)化合物可以通过使用如方案1所述的用于将(iii)转化为(iv)的方法转化为其中P₂表示合适的保护基如叔丁氧羰基(BOC)的保护的式(xxv)衍生物。式(xxv)化合物可以通过在合适的溶剂如吡啶中，使用三氟甲磺酸酐处理转化为式(xxvi)化合物。式(xxvi)化合物可以通过在催化剂如四(三苯基膦)合钯(0)存在下，在合适的溶剂如DMF中，使用合适的氰基化合物如氰化锌处理转化为式(xxvii)化合物。式(xxvii)化合物可以通过使用那些用于将式(v)化合物转化为某些式(I)化合物(方案1)的类似方法转化为式(I)化合物。

另一种得到式(xxvii)中间体的途径示于方案4，其中氰基在9位，P₂表示合适的保护基如BOC，且R₂和R₄为氢(式(xxviia)所示)

方案4

式(xxxii)化合物可以通过在合适的溶剂如THF中，在加热回流下，使用多聚甲醛和干燥的氯化镁处理转化为式(xxxiii)化合物。式(xxxiii)化合物可以通过在还原剂如三乙酰氧基硼氢化钠存在下，使用乙醇胺处理转化为式(xxxiv)化合物。式(xxxiv)化合物可以通过使用如方案1所述的用于将(iii)转化为(iv)的方法转化为其中P₂表示合适的保护基如BOC的保护的式(xxxv)衍生物。式(xxxv)化合物可以通过如下方法转化为式(xxxvi)化合物，典型地通过在Mitsunobu条件下的环化反应，例如使用偶氮二甲酸二异丙酯(DIAD)和三苯基膦，在合适的溶剂如THF中进行。式(xxxvi)化合物可以通过使用方案1所述的用于将(iv)转化为(v)的方法，使用合适的氰基来源化合物如氰化锌处理转化为式(xxviia)化合物。

一种可以用于制备式(I)化合物的途径示于方案5，其中R₁、R₂、R₄和A如式(I)中所述，R₃表示(CH₂)_1-4CO₂H且B为

其中R为烷基(如乙基、叔丁基)，且Hal为氯、溴或碘。

方案5

例如其中氰基在7位的式(xxxvii)化合物(例如使用Micheli，F.等.Journalof Medicinal Chemistry(2007)，50(21)，5076-5089所述方法进行制备)，可以通过使用那些用于将式(v)化合物转化为某些式(I)化合物(方案1)的类似方法转化为式(I)化合物。

在本说明书中所引用的所有出版物，包括但不局限于专利和专利申请，在此将它们引入作为参考，就像每个单独的出版物具体地和单独地在此被充分阐述地引用作为参考。

下面的说明和实施例举例说明了本发明化合物的制备。

缩写：

g-          克

mg-         毫克

ml-         毫升

μl-        微升

BOC₂O-      焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯

MeCN-       乙腈

MeOH-       甲醇

EtOH-       乙醇

Et₂O-       乙醚

EtOAc-      乙酸乙酯

DCM-        二氯甲烷

DIAD-       偶氮二甲酸二异丙酯

DIPEA-      二异丙基乙基胺

DME-        1，2-双(甲氧基)乙烷

DMF-        N，N-二甲基甲酰胺

DMSO-       二甲基亚砜

d₆DMSO-     氘代二甲基亚砜

EDAC-       N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐

EDC-        N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐

EDCl-       N-(3-二甲基氨基丙基)-N′-乙基碳二亚胺盐酸盐

HOBT/HOBt-  羟基苯并三唑

IPA-        异丙醇

MeOD-       氘代甲醇

NCS-        N-氯琥珀酰亚胺

PPh₃-       三苯基膦

PyBOP-      苯并三唑-1-基-氧基三(吡咯烷基)六氟磷酸盐

THF-        四氢呋喃

TFA-        三氟乙酸

dba-        二亚苄基丙酮

RT-         室温

℃-         摄氏度

M-          摩尔浓度

H-          质子

s-          单峰

d-          二重峰

t-          三重峰

q-         四重峰

MHz-       兆赫兹

MeOD-      氘代甲醇

LCMS-      液相色谱-质谱联用法

LC/MS-     液相色谱-质谱联用法

MS-        质谱

ES-        电喷雾

MH⁺-       质量离子(mass ion)+H⁺

MDAP-      质量检测的自动制备液相色谱法(Mass DirectedAutomated Preparative liquid chromatography)

sat.-      饱和的

SCX-       固相阳离子交换色谱法

一般的化学部分

下述方法用于说明的目的，制备实施例的中间体可不必由所述的具体物料制备。

制备例1

7-碘-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-1-酮

将7-氨基-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-1-酮(可按照Preparation ofbenzazepinylpyrrolidonylsulfonamides as Factor Xa inhibitors；WO2007059952中所述的方法制备)(500mg，2.84mmol)和三碘甲烷(2234mg，5.67mmol)溶于THF(100mL)中。然后用20分钟的时间滴加溶于THF(20ml)中的亚硝酸1，1-二甲基乙基酯(0.675ml，5.67mmol)，并将生成的溶液搅拌1小时。将该混合物于50℃加热30分钟。蒸发除去大部分的溶剂，并将粗物质进行biotage色谱法(EtOAc/己烷3∶1)纯化，得到标题化合物(550mg)，为淡黄色固体。MS(ES)C₁₀H₁₀INO计算值287；实测值287.8(M+H)⁺。

制备例2

7-碘-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂

将7-碘-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-1-酮(制备例1)(550mg，1.916mmol)溶于无水THF(70mL)中，并用甲硼烷-THF络合物(1M)(11.49ml，11.49mmol)处理，并在回流下加热4小时。然后将该反应静置过夜。加入另外的甲硼烷-THF络合物(1M，2ml)，并将该反应在回流温度下再加热2小时又30分钟。将甲醇小心地加入到冷却的反应混合物中。将该反应搅拌直至冒气泡的声音停止。然后小心地分批加入2N HCl(水溶液)(20ml)，在冒气泡的声音减小后，将溶液于75℃加热30分钟。LC/MS显示为一种主要产物。将反应混合物冷却，并加入水(20mL)。将该混合物用EtOAc(40ml)洗涤，用2NNaOH(水溶液)碱化，并用EtOAc(50mL)萃取。将EtOAc层用无水MgSO₄干燥，并蒸发得到标题化合物(400mg)，为白色固体。MS(ES)C₁₀H₁₂IN计算值273；实测值274(M+H)⁺。

制备例3

7-碘-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-碘-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂(制备例2)(450mg，1.648mmol)溶于DCM(30mL)中，并用BOC₂O(0.459ml，1.977mmol)、随后用三乙胺(0.459ml，3.30mmol)处理。将反应混合物在RT下搅拌30分钟。LC/MS显示为一种主要产物。将该反应用0.5M HCl(20ml)、饱和的NaHCO₃(20ml)洗涤，经无水MgSO₄干燥，并蒸发得到标题化合物(650mg)，为无色油状物。MS(ES)C₁₅H₂₀INO₂计算值373；实测值318(M+H-56)⁺。

制备例4

7-氰基-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-碘-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例3)(650mg，1.742mmol)、氰化锌(II)(123mg，1.045mmol)和四(三苯基膦)合钯(0)(201mg，0.174mmol)在无水DMF中于80℃搅拌45分钟。将EtOAc(100ml)加入到冷却的反应物中，随后用水(2x70mL)和盐水(100mL)洗涤。将EtOAc层经无水MgSO₄干燥，并蒸发。TLC(EtOAc/己烷1∶3)显示2个斑点，一个具有高的RF。将粗产物进行biotage色谱法(EtOAc/己烷1∶3)纯化，并分离出较低RF的斑点。蒸发后，得到标题化合物(350mg)，为无色油状物。MS(ES)C₁₆H₂₀N₂O₂计算值272；实测值217(M+H-56)⁺。

制备例5

7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-氰基-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例4)(350mg，1.285mmol)、羟基胺盐酸盐(223mg，3.21mmol)和碳酸氢钠(540mg，6.43mmol)悬浮于乙醇(15mL)中，并于55℃搅拌5小时。将反应混合物静置过夜。LC/MS显示单一的主要产物。过滤除去无机物，用10％MeOH/DCM彻底洗涤以溶解沉淀的产物。蒸发溶剂，得到白色固体。用乙醚研磨，得到标题化合物(320mg)。MS(ES)C₁₆H₂₃N₃O₃计算值305；实测值306.2(M+H)⁺。

制备例6

3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸

将丙-2-醇(2.45mL)和PPh₃(1.18g)溶于THF(30mL)中，冷却至0℃，用3-氯-4-羟基苯甲酸甲酯(6.00g)处理，随后滴加DIAD(9.44mL)，并于RT搅拌过夜。然后将反应混合物蒸发，并在硅胶柱(4x100g)上纯化，使用0至40％EtOAc在戊烷中的混合物洗脱，得到粗产物(7.00g)，为无色油状物。将其溶于MeOH(30mL)和2M的NaOH水溶液(30mL)中，并于RT搅拌过周末。然后将反应混合物蒸发，并再溶于H₂O中。将该溶液用Et₂O洗涤，酸化至pH＝1，并用Et₂O萃取。将后面的萃取液经无水MgSO₄干燥，过滤，并蒸发，得到标题化合物(4.16g)，为白色固体。δH(MeOD，400MHz)：1.37(6H，d)，4.77(1H，七重峰)，7.12(1H，d)，7.90(1H，d)，7.98(1H，s).MS(ES)：C₁₀H₁₁³⁵ClO₃计算值214；实测值215(M+H)⁺。

制备例7

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(制备例6)(105mg，0.491mmol)、EDC(113mg，0.589mmol)和HOBT(90mg，0.589mmol)溶于无水DMF(5mL)中，并搅拌5分钟。加入7-[羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例5)(150mg，0.491mmol)，并将混合物搅拌1小时，于90℃加热2小时，然后静置过夜。将该反应于90℃再加热3小时。加入EtOAc(50ml)，并将反应用饱和的NaHCO₃(水溶液)(50mL)和水(2x50ml)洗涤，随后经无水MgSO₄干燥，并蒸发溶剂。将获得的粗的油状物进行biotage色谱法(EtOAc/己烷1∶4)纯化，得到100mg的无色油状物。将该油状物固化过夜，得到白色蜡状固体。用乙醚/己烷研磨，过滤后，得到白色固体的标题化合物(38mg)。从溶液中慢慢沉淀出另一批的产物(30mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.31(9H，s)，1.36(6H，d)，1.69(2H，m)，3.06(2H，m)，3.65(2H，m)，4.44(2H，s)，4.84-4.94(1H，m)，7.38-7.46(2H，m)，7.84-7.91(2H，m)，8.11(1H，dd)，8.18(1H，d)。

制备例8

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂(实施例1)(60mg，0.143mmol)和碳酸铯(140mg，0.428mmol)在无水DMF(5mL)中搅拌，并用溴代乙酸叔丁基酯(0.032ml，0.214mmol)处理。将该混合物于RT搅拌1.5小时。加入EtOAc(50mL)和乙醚(20ml)，并将混合物用水(3x60mL)和盐水(40mL)洗涤。经无水MgSO₄干燥，并蒸发溶剂，得到透明的无色油状物(80mg)。将该油状物进行biotage色谱法(EtOAc/己烷3∶1)纯化，得到标题化合物(65mg)，为透明的无色油状物。MS(ES)C₂₇H₃₂³⁵ClN₃O₄计算值497；实测值498(M+H)⁺。

制备例9

7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(可按照WO2005/58848中所述的方法制备)(302mg，1.474mmol)、EDC(339mg，1.768mmol)和HOBT(271mg，1.768mmol)在DMF(3ml)中搅拌5分钟。加入7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例5)(450mg，1.474mmol)，并将反应混合物于RT搅拌1小时。仍存在一些3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸。加入另外一定量的EDC(100mg)和7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(100mg)，并将反应搅拌1小时。然后将该反应于80℃加热3小时，并静置过夜。然后将该反应于90℃加热1小时。加入EtOAc(70ml)，并将反应混合物用饱和的NaHCO₃(50mL)和水(2x70ml)洗涤，经无水MgSO₄干燥，并蒸发。将获得的粗物质进行biotage色谱法(EtOAc/己烷1∶2)纯化，蒸发后得到白色固体。用乙醚研磨，得到标题化合物(320mg)，为白色固体。NMR(400MHz，d₆DMSO)1.31(9H，s)，1.38(6H，d)，1.69(2H，br.s)，3.06(2H，宽s)，3.65(2H，br.s)，4.44(2H，s)，4.94-5.03(1H，m)，7.38-7.43(1H，m)，7.56(1H，d)，7.84-7.91(2H，m)，8.40(1H，dd)，8.50(1H，d)

制备例10

[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯

将在无水DMF(5ml)中的2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例3)(70mg，0.170mmol)和碳酸铯(167mg，0.511mmol)用溴代乙酸叔丁基酯(0.038ml，0.256mmol)处理，并于RT搅拌3小时，得到单一产物。加入EtOAc(40ml)，并将混合物用水(2X50ml)洗涤，经无水MgSO₄干燥，并蒸发得到标题化合物(85mg)，为透明的无色油状物。MS(ES)C₂₈H₃₂N₄O₄计算值488；实测值489(M+H)⁺。

制备例11

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丁酸乙酯

将在无水DMF(5ml)中的2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例3)(70mg，0.170mmol)和碳酸铯(167mg，0.511mmol)用4-溴丁酸乙酯(0.037ml，0.256mmol)处理，并于60℃搅拌2小时。加入另外一定量的4-溴丁酸乙酯(37ul)，并将反应于60℃加热3小时。将该反应静置过夜。加入EtOAc(50ml)，并将混合物用水(2x60ml)洗涤，经无水MgSO₄干燥，并蒸发得到标题化合物(90mg)，为透明的无色油状物。MS(ES)C₂₈H₃₂N₄O₄计算值488；实测值489.0(M+H)⁺。

制备例12

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丙酸1，1-二甲基乙基酯

将2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例3)(70mg，0.170mmol)和碳酸铯(167mg，0.511mmol)在无水DMF(5mL)中搅拌，并用3-溴丙酸1，1-二甲基乙基酯(0.043ml，0.256mmol)处理，然后于60℃搅拌2小时。加入另外一定量的3-溴丙酸1，1-二甲基乙基酯(44μl)，并将反应于60℃搅拌3小时。将该反应静置过夜。加入3-溴丙酸1，1-二甲基乙基酯(43μl)，并将反应混合物于60℃搅拌7小时，然后静置过夜。加入EtOAc(50ml)，并将反应混合物用水(2x50ml)洗涤，经无水MgSO₄干燥，并蒸发得到透明的无色油状物(100mg)。该油状物慢慢固化。用乙醚/己烷研磨，得到标题化合物(70mg)，为白色固体。MS(ES)C₂₉H₃₄N₄O₄计算值502；实测值503.0(M+H).

制备例13

6-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氩气下，在-10℃下，向搅拌下的6-羟基-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(可按照WO2006/002928中所述的方法制备)(6.545g)的无水DCM(100ml)溶液中加入三乙胺(4mL)。10分钟后，用10分钟的时间滴加三氟甲磺酸酐(4.7ml)。该无色溶液变为淡黄色，然后变为红色。用30分钟的时间，使该反应达到RT，然后于RT搅拌18小时。然后将该反应混合物倒入到饱和的碳酸钠水溶液(100mL)中，并收集DCM层，干燥，并蒸发。通过色谱法(使用DCM洗脱)处理，得到标题化合物(5g)。δH(400MHz，CDCl₃)7.22-7.12(3H，m)，3.59-3.57(4H，m)，3.01-2.99(4H，m)，1.48(9H，s)；MS(ES)C₁₆H₂₀F₃NO₅S计算值395；实测值340[M+H-56]⁺。

制备例14

6-氰基-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将6-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例13)(5g)、氰化锌(II)(1.5g)和四(三苯基膦)合钯(0)(1.5g)在无水DMF中于150℃加热18小时。将冷却的反应混合物用EtOAc(200mL)稀释，并过滤。将滤液用饱和的碳酸氢钠(200mL)、水(200mL)和盐水(200mL)洗涤。将粗的反应混合物按照通常的方法干燥，并蒸发。通过色谱法(使用DCM洗脱)纯化，得到标题化合物(3.4g)。δH(400MHz，CDCl₃)7.50(1H，d)，7.35(1H，d)，7.27-7.21(1H，m)，3.62-3.56(4H，m)，3.22-3.20(2H，m)，2.97-2.94(2H，m)，1.47(9H，s)；MS(ES)C₁₆H₂₀N₂O₂计算值272；实测值217[M+H-56]⁺，273[M+H]⁺。

制备例15

6-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氩气下，将6-氰基-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例14)(1.15g)、羟基胺盐酸盐(1.18g)和碳酸氢钠(1.76g)在乙醇(100ml)中于60℃加热18小时。将冷却的反应混合物蒸发至干，在DCM(100mL)和水(100mL)之间分配。将DCM层收集，并将水层用DCM(50mL)洗涤。将合并的DCM层干燥，并蒸发。通过使用5％甲醇的DCM溶液洗脱的色谱法分离得到标题化合物(506mg)。δH(400MHz，CDCl₃)7.27(1H，s)7.16-7.13(2H，m)，5.38(1H，br.s)，3.58-3.55(4H，m)，3.05(2H，br.s)，2.89(2H，br.s)1.46(2H b r.s)，1.12(9H，br.s)；MS(ES)C₁₆H₂₃N₃O₃计算值305；实测值306[M+H]⁺。

制备例16

6-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将6-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例15)(360mg，1.179mmol)溶于THF(50mL)中，并在氩气下，在室温下，与氢化钠(60％矿物油中的悬浮液，51.9mg，1.297mmol)一起搅拌30分钟。然后加入3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯(可按照WO2005058848中所述的制备)(388mg，1.768mmol)的THF溶液(5mL)，并将该反应在回流温度下加热1.5小时。将冷却的反应混合物蒸发，并在DCM(100mL)和水(100mL)之间分配。将水层用DCM(50mL)洗涤，并将合并的DCM层干燥(疏水性砂芯)并蒸发。将产物通过硅胶色谱法(使用DCM洗脱)分离，得到6-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(505mg，1.011mmol，86％产率)，为白色泡沫状物质。δH(400MHz，CDCl₃)8.41(1H，s)，8.33(1H，dd)，7.7(1H，dd)，7.31-7.25(2H，m)，7.13(1H，d)，4.80(1H，sept)，3.63-3.62(4H，m)，3.3-3.2(2H，m)，2.95-3.05(2H，m)，1.47(6H，d)，1.43(9H，br.s)；MS(ES)C₂₇H₃₀N₄O₄计算值474；实测值475[M+H]⁺。

制备例17

6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将6-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例15)(170mg，0.557mmol)溶于THF(30mL)中，并在氩气下，在室温下，与氢化钠(24.49mg，0.612mmol)一起搅拌30分钟。然后加入3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯(可按照WO2005058848中所述的制备)(191mg，0.835mmol)，并将该反应在回流温度下加热1.5小时。将冷却的反应混合物蒸发，并在DCM(100mL)和水(100mL)之间分配。将水层用DCM(50mL)洗涤，并将合并的DCM层干燥(疏水性砂芯)并蒸发。将标题化合物通过硅胶色谱法(使用DCM洗脱)分离。分离得到米色泡沫状的6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(260mg，0.537mmol，96％产率)。δH(400MHz，CDCl₃)8.22(1H，s)，8.05(1H d)，7.68(1H，d)，7.30-7.24(2H，m)，7.06(1H，d)，4.72(1H，sept)，3.65-3.55(4H，m)，3.35-3.25(2H，m)，2.95-3.05(2H，m)，1.45(6H，d)，1.43(9H，s)；MS(ES)C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₄计算值483；实测值484[M+H]⁺。

制备例18

3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸1，1-二甲基乙基酯

向5ml微波反应器中加入6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂(实施例8的游离碱，通过标准方法获得：例如在有机溶剂和碱性的含水溶剂之间分配，并收集有机溶剂)(70mg)的DMF(3ml)溶液，得到褐色溶液。然后加入碳酸钾(101mg)，随后加入3-溴丙酸1，1-二甲基乙基酯(38.1mg，0.182mmol)。将反应混合物于100℃加热10分钟。将冷却的反应混合物用DCM(5mL)稀释，并通过SCX(用甲醇洗涤，并将粗的氨基酯用甲醇的氨水溶液洗脱)纯化。通过MDAP纯化，分离得到氨基酯，3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸1，1-二甲基乙基酯(25mg，0.046mmol，25.4％产率)，为淡黄色油状物。MS(ES)C₂₈H₃₄³⁵ClN₃O₄计算值511；实测值512[M+H]⁺。

制备例19

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯

向5ml微波反应器中加入6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例8)(110mg，0.262mmol)。然后加入碳酸钾(101mg)，随后加入溴代乙酸1，1-二甲基乙基酯(51.0mg，0.262mmol)。将反应混合物于100℃加热10分钟。将冷却的反应混合物用DCM(5mL)稀释，并通过SCX(用甲醇洗涤，并将粗的氨基酯用甲醇的氨水溶液洗脱)纯化。分离得到浅黄色油状的[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯(120mg，0.241mmol，92％产率)。MS(ES)C₂₇H₃₂³⁵ClN₃O₄计算值497；实测值498[M+H]⁺。

制备例20

3-氰基-N-羟基-2-甲基苯甲脒

将2，6-二氰基甲苯(25.0g，176mmol)、羟基胺盐酸盐(73.0g，1.06mol)和三乙胺(142g，1.41mol)在氯仿(500ml)中的悬浮液在50℃下搅拌7小时，然后在室温下静置过夜。将反应混合物在冰中冷却，用5M HCl处理至pH为1，并用氯仿萃取三次。将水层用THF(x7)萃取，在冰中冷却，用40％NaOH使pH升至4，并用THF(x3)萃取。合并后面的THF萃取液，并蒸发至干，得到淡黄色固体，其中含有产物和大约三分之一当量的三乙胺(11.0g)。¹HNMR(400MHz，d₄-MeOH)δ(尤其(inter alia))7.70-7.76(1H，m)，7.57-7.63(1H，m)，7.35-7.62(1H，m)，2.58(3H，s)；MS(ES)C₉H₉N₃O计算值175；实测值176[M+H]⁺。将前面的THF七次萃取液合并，蒸发至干，并溶于水中。将水溶液用氯仿萃取两次，调节至pH为4，并用THF(x3)萃取。将合并的THF萃取液蒸发，得到另外4.5g的产物。

制备例21

3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2-甲基苄腈

在氩气下，在室温下，向3-氰基-N-羟基-2-甲基苯甲脒(制备例20)(1.70g，9.70mmol)的THF(100ml)溶液中加入氢化钠(0.427g，10.67mmol)，并将悬浮液搅拌30分钟，然后加入3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯(可按照WO2005058848中所述的制备)(3.33g，14.56mmol)，并将该反应在回流下加热45分钟，然后冷却至RT，并搅拌3天。

另外地，在氩气下，在室温下，向3-氰基-N-羟基-2-甲基苯甲脒(制备例20)(10.48g，59.8mmol)在THF(250ml)中的悬浮液中分批加入氢化钠(2.87g，71.8mmol)，并将生成的悬浮液于RT搅拌30分钟。加入3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸甲酯(19.9g，87mmol)，并将该反应在回流下加热4小时，然后于RT搅拌16小时。

合并上述两个反应混合物。加入水(200ml)，然后将混合物用DCM(2x250mL)萃取。合并有机层，用盐水(100mL)洗涤，并真空浓缩，得到粗的白色固体(28.1g)。将该固体再溶于DCM(200mL)、THF(150mL)和EtOH(50mL)中，并通过短的硅胶填料(1cm深)。用DCM洗脱，随后真空浓缩，得到浅黄色固体的3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2-甲基苄腈(18.10g，51.2mmol，80％产率)。使用DCM-EtOH(2∶1)洗脱硅胶，随后真空浓缩，得到浅黄色固体的3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2-甲基苄腈(2.81g，6.35mmol，10％产率)。分析表明两批产物相同。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ8.27(1H，d)，8.22(1H，d)，8.05(1H，dd)，7.77(1H，d)，7.45(1H，t)，7.07(1H，d)，4.73(1H，sept)，2.90(3H，s)，1.47(6H，d)；MS(ES)C₁₉H₁₆³⁵ClN₃O₂计算值353；实测值354[M+H]⁺。

制备例22

2-(3-丁烯-1-基)-3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苄腈

在-78℃下，在氩气下，向二异丙基胺(15.15ml，106mmol)的无水THF(650m)溶液中沿着烧瓶的侧壁向下加入ⁿBuLi(44.3ml，70.9mmol)，并将生成的溶液搅拌1小时。在氩气下，以约10mlmin^-1滴加3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2-甲基苄腈(制备例21)(12.54g，35.4mmol)的无水THF(100ml)溶液，并将生成的深蓝色溶液于-78℃搅拌45分钟。以约3mlmin^-1滴加烯丙基溴(6.13ml，70.9mmol)，并将生成的深红色溶液于-78℃搅拌30分钟。加入1M HCl(水溶液)(375ml)，将混合物温热至RT，然后分离各层。将水层用EtOAc(2x125mL)萃取，然后将合并的有机物用盐水(250mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，并真空浓缩，得到粗的红色油状物(12.8g)。将其再溶于DCM(20mL)中，并加入到预先湿润(异己烷)的硅胶柱(5cmx5cm)上。用EtOAc-异己烷(1∶3)洗脱，并浓缩所需的级分，得到淡橙色固体的2-(3-丁烯-1-基)-3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苄腈(9.50g，20.98mmol，59.2％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)8.26(1H，d)，8.24(1H，d)，8.05(1H，dd)，7.79(1H，d)，7.46(1H，t)，7.07(1H，d)，5.94(1H，ddt)，5.07(1H，dq)，5.01(1H，dd)，4.73(1H，sept)，3.40(2H，t)，2.47(2H，qd)，1.45(6H，d)；MS(ES)C₂₂H₂₀³⁵ClN₃O₂计算值393；实测值394[M+H]⁺。

制备例23

3-[2-(氨基甲基)-6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苯基]-1-丙醇

在氩气下，于-78℃，向2-(3-丁烯-1-基)-3-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苄腈(制备例22)(8.26g，20.97mmol)的DCM(125ml)溶液中鼓入氩气，然后鼓入O₂(每种气体5分钟)。将臭氧分解器(型号502；75lh^-1；0.3A)开启，并将橙色溶液进行臭氧分解直至变成不透明的灰绿色(3小时)。关闭臭氧分解器，并将O₂，然后将氩气鼓入到该溶液中(每种气体10分钟)。将该溶液在氩气下温热至RT，然后真空浓缩，得到不透明的黄色油状物。将其再溶于无水THF(200mL)中，加入BH₃.DMS(9.96ml，105mmol)(小心：放出气体)，并将该溶液于RT搅拌18小时，并然后于40℃搅拌3小时。将该反应冷却至0℃，然后小心地加入0.1M的HCl水溶液(150ml)(小心：放出气体)，然后于RT搅拌18小时。将该溶液直接通过SCX-2柱(50g)，用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到橙色泡沫状的3-[2-(氨基甲基)-6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苯基]-1-丙醇(2.73g，3.95mmol，18.9％产率)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)(尤其)8.23(1H，d)，8.05(1H，dd)，7.86(1H，d)，7.46(1H，d)，7.34(1H，t)，7.06(1H，d)，4.72(1H，sept)，4.03(2H，s)，3.47(2H，t)，3.27(2H，t)，1.78(2H，quin)，1.45(6H，d)；MS(ES)C₂₁H₂₄³⁵ClN₃O₃计算值401；实测值402[M+H]⁺。

制备例24

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯

在RT下，在氩气下，用2分钟的时间，向3-[2-(氨基甲基)-6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苯基]-1-丙醇(制备例23)(424mg，1.055mmol)和三苯基膦(1384mg，5.28mmol)的无水DCM(150ml)溶液中滴加DIAD(0.974ml，5.01mmol)，并将生成的浅黄色溶液于RT搅拌2小时。将该溶液浓缩至约10ml，然后通过SCX-2柱(10g)，用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到淡橙色油状物(＞900mg)。重复进行SCX-2纯化以除去剩余的三苯基氧膦，得到浅黄色油状物(314mg)。将该油状物再溶于DCM(40mL)中，依次加入BOC₂O(0.367ml，1.583mmol)和DMAP(6.44mg，0.053mmol)，并在氩气下搅拌2小时。加入饱和的NH₄Cl水溶液(20ml)，然后将水溶液用DCM(25mL)萃取。合并有机层，通过疏水性砂芯，并真空浓缩，得到粗的淡褐色油状物(496mg)。快速色谱法(二氧化硅；Flash 25M；线性梯度(0.1-1％)MeOH的DCM溶液)，得到黄色油状的6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(130mg)。将该物质再溶于4MHCl的二烷溶液(5ml，20.00mmol)中，并于RT搅拌3小时。将该溶液加入到SCX-3柱(10g)中，并用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到淡白色固体(102mg)。将产物再溶于无水DMF(3ml)中；加入碳酸钾(74.1mg，0.536mmol)和溴代乙酸叔丁基酯(0.042ml，0.281mmol)，然后将该悬浮液在微波中于100℃辐射10分钟。将该混合物用DCM(7mL)稀释，然后加入到SCX-3柱(10g)中，并用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到橙色油状物(57mg)。经反相质量控制的自动纯化(mass-directed auto-purification)(MDAP)，得到产物的水-MeCN溶液。将所需的级分加入到SCX-3柱(1g)中，并用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到透明膜状(21.4mg)的[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯和[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸的5∶2的混合物。主要的成分：¹H NMR(400MHz，CDCl₃)8.22(1H，d)，8.05(1H，dd)，7.68(1H，d)，7.26(1H，d)，7.25(1H，t)，7.06(1H，d)，4.72(1H，sept)，4.14(2H，s)，3.28(2H，br s)，3.23(2H，t)，3.16(2H，s)，1.77(2H，m)，1.47(9H，s)，1.43(6H，d)；MS(ES)C₂₇H₃₂³⁵ClN₃O₄计算值497；实测值498[M+H]⁺。

制备例25

8-(甲氧基)-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

用15分钟的时间，将DIAD(32.1ml，165mmol)滴加到搅拌下的冰冷却的2-羟基-4-(甲氧基)苯甲酸甲酯(24.18g，150mmol)、(2-羟基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(27.3g，150mmol)和三苯基膦(43.3g，165mmol)的THF(450ml)溶液中，然后搅拌，并用2小时的时间温热至室温。将反应混合物蒸发，得到129.9g的粘稠的黄色油状物。加入三氟乙酸(60ml，779mmol)的二氯甲烷(DCM)(350ml)溶液，并将该反应在室温下放置65小时，然后蒸发至干。将生成的残余物溶于500ml的乙醚中，并用2M HCl(200ml和2x75mL)萃取。将合并的酸萃取液用200ml的乙醚洗涤，然后加入500g的冰同时加入250ml的EtOAc，并将混合物在剧烈搅拌下用50％氢氧化钠碱化。将有机物分离，并将水溶液进一步用4x75ml的EtOAc萃取，并将合并的有机物干燥(硫酸镁)并蒸发，得到21.1g的黄色油状物。将该油状物溶于甲苯(350mL)中，搅拌并回流24小时，然后蒸发，并通过使用EtOAc洗脱的快速色谱法纯化，得到标题化合物(8.61g)，为白色固体。MS(ES)C₁₀H₁₁NO₃计算值193；实测值194[M+H]⁺。

制备例26

8-羟基-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将8-(甲氧基)-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例25)(7.98g，41.3mmol)和氢溴酸(100ml，1842mmol)的混合物搅拌，并于110℃加热7小时。然后将反应混合物蒸发，并与150ml的乙醇共沸两次，得到标题化合物(8.66g)，为淡褐色固体，将其不需纯化而使用。MS(ES)C₉H₉NO₃计算值179；实测值180[M+H]⁺。

制备例27

8-[(苯基甲基)氧基]-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将8-羟基-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例26)(8.66g，48.3mmol)、苄基溴(6.32ml，53.2mmol)和碳酸钾(20.04g，145mmol)在DMF(80ml)中的混合物搅拌并于60℃加热2小时。将冷却的反应混合物用EtOAc/水(每种300ml)稀释，并将水溶液用EtOAc(2x75mL)萃取。将合并的有机物用3x100ml的水洗涤，干燥(硫酸镁)，蒸发，用乙醚研磨并滤出，得到标题化合物(8.39g)，为白色固体。MS(ES)C₁₆H₁₅NO₃计算值269；实测值270[M+H]⁺。

制备例28

8-[(苯基甲基)氧基]-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

在氩气下，在冰浴冷却下，用5分钟的时间，将1M氢化铝锂(62.4ml，62.4mmol)的THF溶液加入到搅拌下的8-[(苯基甲基)氧基]-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例27)(8.39g，31.2mmol)的THF(150ml)溶液中。将生成的溶液在搅拌下于60℃加热3小时。将该反应冷却，并小心地通过缓慢地加入冰冷却的150ml的2M氢氧化钠、随后加入150ml的EtOAc来终止。分离有机物，并将水溶液分离，将该水溶液用100ml的EtOAc萃取。将合并的有机萃取物干燥(硫酸镁)并蒸发，得到标题化合物(7.53g)，为浅色的油状物。MS(ES)C₁₆H₁₇NO₂计算值255；实测值256[M+H]⁺。

制备例29

8-[(苯基甲基)氧基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将BOC₂O(7.52ml，32.4mmol)加入到8-[(苯基甲基)氧基]-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(制备例28)(7.52g，29.5mmol)的DCM(100mL)溶液中，并在室温下保持30分钟。然后将该反应蒸发至干，并通过快速色谱法纯化，使用由5％EtOAc的异己烷溶液到改变至15％EtOAc的异己烷溶液洗脱，以洗脱出产物。用异己烷研磨，并过滤出来，得到7.37g的白色固体。MS(ES)C₂₁H₂₅NO₄计算值355；实测值300[M+H-56]⁺。

制备例30

8-羟基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将8-[(苯基甲基)氧基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例29)(7.35g，20.68mmol)在THF(40mL)和EtOH(40ml)混合物中用10％钯/碳(0.735g，6.91mmol)氢化18小时。然后过滤，并蒸发，得到标题化合物(5.49g)，为白色固体。MS(ES)C₁₄H₁₉NO₄计算值265；实测值166[M+H-100]⁺。

制备例31

8-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将三氟甲磺酸酐(0.253ml，1.498mmol)加入到冰冷却的8-羟基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例30)(0.265g，0.999mmol)的吡啶(4mL)溶液中，并搅拌1小时。将反应混合物蒸发，溶于40ml的EtOAc中，并用20ml的2M HCl和20ml的饱和的碳酸氢钠洗涤，然后干燥(硫酸镁)并蒸发，得到标题化合物(399mgs)，为黄色的树胶状物质。MS(ES)C₁₅H₁₈F₃NO₆S计算值397；实测值298[M+H-100]⁺。

制备例32

8-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将8-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例31)(0.397g，0.999mmol)、氰化锌(0.176g，1.499mmol)和四(三苯基膦)合钯(0)(0.115g，0.100mmol)在DMF(4ml)中的混合物搅拌并于80℃加热2小时，然后冷却，并用EtOAc/水(每种40ml)稀释，并将有机物用3x20ml的水洗涤，干燥(硫酸镁)，蒸发，并通过使用1∶4的EtOAc/异己烷洗脱的快速色谱法纯化，得到树胶状的标题化合物(198mgs)，其缓慢地结晶。MS(ES)C₁₅H₁₈N₂O₃计算值274；实测值175[M+H-100]⁺。

制备例33

8-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将8-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例32)(0.195g，0.711mmol)、羟基胺盐酸盐(0.099g，1.422mmol)和碳酸氢钠(0.299g，3.55mmol)在乙醇(5ml)中的混合物搅拌并于60℃加热3小时。将反应混合物冷却，蒸发并溶于EtOAc/水(每种40ml，需要一些加温)中，并将有机物干燥(硫酸镁)并蒸发，得到标题化合物(210mgs)，为白色固体。MS(ES)C₁₅H₂₁N₃O₄计算值307；实测值308[M+H]⁺。

制备例34

8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将8-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例33)(0.195g，0.634mmol)、3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(制备例6)(0.136g，0.634mmol)、EDC(0.146g，0.761mmol)和HOBT(0.107g，0.698mmol)在DMF(4ml)中的混合物在室温下搅拌20分钟，然后于100℃加热17小时。将冷却的反应混合物用EtOAc/水(每种40ml)稀释，并收集有机物，干燥(硫酸镁)，蒸发，并通过1∶4的EtOAc/异己烷洗脱的biotage色谱法纯化，得到标题化合物(172mgs)，为白色固体。MS(ES)C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值486[M+H]⁺；C₂₅H₂₈³⁷ClN₃O₅计算值487；实测值488[M+H]⁺。

制备例35

3-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

将8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(实施例13)(0.036g，0.199mmol)、3-溴丙酸乙酯(0.084g，0.199mmol)和DIPEA(0.097ml，0.557mmol)的混合物搅拌，并于80℃加热4小时，当加入另外一批的3-溴丙酸乙酯(0.084g，0.199mmol)和DIPEA(0.097ml，0.557mmol)时，加热过夜，当加入另一批的3-溴丙酸乙酯(0.084g，0.199mmol)和DIPEA(0.097ml，0.557mmol)时，再加热3小时，此时所有的起始物消耗完毕。将冷却的反应混合物用EtOAc/水(每种30ml)稀释，并将有机物干燥(硫酸镁)，蒸发，并通过快速色谱法纯化，使用1∶1的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(90mgs)，为无色的树胶状物质。MS(ES)C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值486[M+H]⁺。

制备例36

4-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

将8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(实施例13)(0.127g，0.3mmol)、DIPEA(0.052ml，0.300mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.059g，0.300mmol)在乙腈(5ml)中的混合物搅拌，并于70℃加热15小时。将冷却的反应混合物稀释，并溶于EtOAc/水(每种30ml)中，并将有机物干燥(硫酸镁)，蒸发，并通过快速色谱法纯化，使用1∶1的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(106mgs)，为无色树胶状物质。MS(ES)C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₅计算值499；实测值500[M+H]⁺。

制备例37

[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯

将8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(实施例13)(0.127g，0.301mmol)、溴代乙酸1，1-二甲基乙基酯(0.117g，0.601mmol)和DIPEA(0.210ml，1.203mmol)在乙腈(5ml)中的混合物搅拌，并于70℃加热1小时。将冷却的反应混合物用EtOAc/水(每种30ml)稀释，并将有机物干燥(硫酸镁)，蒸发，并通过快速色谱法纯化，使用1∶2的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(130mgs)，为无色树胶状物质。MS(ES)C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₅计算值499；实测值500[M+H]⁺。

制备例38

4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯甲酸1-甲基乙基酯

将4-羟基-3-(三氟甲基)苯甲酸(2.5g，12.1mmol)、2-碘丙烷(2.42ml，24.3mmol)和碳酸钾(3.35g，24.3mmol)在N，N’-二甲基甲酰胺(200ml)中的混合物于70℃加热4小时。将反应混合物部分地在真空下浓缩，并将残余物在EtOAc(150mL)和含有一些氢氧化钠水溶液的水(150ml)之间分配。将水相用另外的EtOAc(2x100mL)萃取，并将合并的有机级分干燥(疏水性砂芯分相器)，并真空浓缩，得到粗的标题化合物，为黄色油状物(3.6g，12.1mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.16(1H，dd)，8.08(1H，d)，7.43(1H，d)，5.13(1H，七重峰)，4.91(1H，七重峰)，1.32(12H，d)。

制备例39

4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯甲酸

向4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯甲酸1-甲基乙基酯(制备例38)(3.63g，12.5mmol)在乙醇(100ml)中的混合物中加入氢氧化钠水溶液(12.5M，10.0ml，125mmol)，并将该反应加热回流3小时。将该混合物真空浓缩，并将残余物在EtOAc(100mL)和水(100mL)之间分配，并用盐酸水溶液酸化。将该水层进一步用EtOAc(100mL)萃取，并将合并的有机层干燥，并真空浓缩，得到标题化合物，为黄色固体(2.68g，10.8mmol)。MS(ES-)：C₁₁H₁₁F₃O₃计算值248；实测值247[M-H⁺].

制备例40

2-(三氟甲基)-4-联苯甲酸

将该反应混合物分成4份，使用四分之一的反应混合物，每个按照如下反应：向4-溴-3-(三氟甲基)苄腈(4g，16.00mmol)、苯基硼酸(3.90g，32.0mmol)和碳酸钾(6.63g，48.0mmol)在DMF(64ml)中的混合物中加入四(三苯基膦)合钯(0)(1.849g，1.600mmol)。将每个反应混合物在微波中于150℃加热30分钟。将合并的反应混合物通过过滤，用EtOAc洗涤，并将溶剂真空除去。将残余物在EtOAc(100mL)和水(100mL)之间分配，并将有机相用碳酸氢钠溶液(100mL)洗涤。将有机相干燥(MgSO₄)，过滤，并将溶剂真空除去。将褐色的油状物用DCM研磨，并过滤，得到浅黄色固体的2-(三氟甲基)-4-联苯甲酰胺(2.47g)，其不需进一步纯化而使用。向2-(三氟甲基)-4-联苯甲酰胺(2g，7.54mmol)的乙醇(80ml)溶液中加入氢氧化钾(4.23g，75mmol)和水，并将混合物于90℃加热18小时。将反应混合物真空浓缩，并将残余物在DCM(100mL)和2M HCl(100mL)之间分配。将有机相分离并干燥(疏水性砂芯分相器)，并将溶剂真空除去，得到粗产物。使用Biotage Horizon(反相柱，用5-100％MeCN的水溶液洗脱)进行色谱法纯化，得到米色固体的标题化合物(960mg)。LCMS(ES-)：C₁₄H₉F₃O₂计算值266；实测值265[M-H⁺]

制备例41

7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-氰基-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(可按照WO2002040471中所述的方法制备)(5g，18.36mmol)、羟基胺盐酸盐(2.55g，36.7mmol)和碳酸氢钠(7.71g，92mmol)在乙醇(250ml)中的悬浮液于50℃加热过夜。将另外的羟基胺盐酸盐(0.638g，9.18mmol)加入到该反应混合物中，并于50℃继续加热5小时。将反应混合物冷却，并将固体滤出，将该溶液真空浓缩，得到白色固体的标题化合物(5.77g，17.01mmol，93％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：9.56(1H，s)，7.52-7.37(2H，m)，7.14(1H，d)，5.77(2H，br s)，3.50-3.32(4H，m)，2.91-2.80(4H，m)，1.41(9H，s).MS(ES)：C₁₆H₂₃N₃O₃计算值305；实测值306[M+H]⁺。

制备例42

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

向3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(制备例6)(1.406g，6.55mmol)的DMF溶液中加入HOBT(1.103g，7.20mmol)和EDC(1.381g，7.20mmol)，将生成的溶液在氩气下在室温下搅拌10分钟。然后将7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(2g，6.55mmol)加入到反应混合物中，并将溶液于80℃加热过夜。将溶剂真空除去，并将残余物溶于甲醇中用于通过Biotage Horizon(反相柱，用5-100％乙腈的水溶液洗脱)纯化。将含产物的级分(最后的5个级分)真空浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(950mg，1.87mmol，29％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.19(1H，d)，8.11(1H，dd)，7.83-7.89(2H，m)，7.45(1H，d)，7.37(1H，d)，4.89(1H，sept)，3.50(4H，br.s)，2.96(4H，br.s)，1.41(9H，s)，1.36(6H，d)。MS(ES)：C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₄计算值483；实测值384[M+H-100]⁺。

制备例43

7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(可按照WO2005/58848中所述的方法制备)(687mg，3.63mmol)、HOBT(539mg，3.99mmol)和EDC(762mg，3.99mmol)在DMF(30ml)中在氩气下搅拌20分钟。加入7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(1.11g，3.63mmol)，并将混合物在室温下搅拌4小时，随后于80℃加热20小时。将反应混合物在EtOAc(80mL)和水(80mL)之间分配，并将有机层用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，随后按照常规方法干燥并蒸发。将残余物用甲醇研磨，得到白色固体的标题化合物(981mg，2.07mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.50(1H，d)，8.40(1H，dd)，7.88(1H，br.s)，7.85(1H，dd)，7.56(1H，d)，7.38(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.53-3.47(4H，m)，3.00-2.92(4H，m)，1.41(9H，s)，1.39(6H，d)。

制备例44

7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟-甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氩气下，将4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯甲酸(制备例39)(744mg，3.00mmol)、HOBT(446mg，3.30mmol)和EDC(630mg，3.30mmol)在DMF(28ml)中搅拌20分钟。加入7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(915mg，3.00mmol)，并将混合物在室温下搅拌2小时，随后于80℃加热20小时。将反应混合物在EtOAc和水之间分配，并将有机层用碳酸氢钠水溶液洗涤，随后将其按照常规方法干燥，并蒸发。将残余物通过Biotage Horizon(反相柱，用5-100％乙腈的水溶液洗脱)纯化，得到标题化合物(749mg，1.45mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.40(1H，dd)，8.31(1H，d)，7.89(1H，br.s)，7.86(1H，dd)，7.58(1H，d)，7.37(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.54-3.46(4H，m)，3.00-2.92(4H，m)，1.41(9H，s)，1.36(6H，d)。

制备例45

7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氩气下，将2-(三氟甲基)-4-联苯甲酸(制备例40)(284mg，1.07mmol)、HOBT(159mg，1.18mmol)和EDC(225mg，1.18mmol)在DMF(10ml)中搅拌20分钟。加入7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(326mg，1.07mmol)，并将混合物在室温下搅拌2.5小时，随后将其于80℃加热16小时。将反应混合物在EtOAc(30mL)和水(30mL)之间分配，并将有机层用碳酸氢钠水溶液和水洗涤，随后将其干燥(分相器)并蒸发。将残余物用甲醇研磨，得到白色固体的标题化合物(370mg，0.69mmol)。将滤液通过Biotage Horizon(反相柱，用5-100％乙腈的水溶液洗脱)纯化，得到另外的标题化合物(70mg，0.13mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.52(1H，s)，8.50(1H，d)，7.93(1H，s)，7.90(1H，dd)，7.74(1H，d)7.56-7.48(3H，m)，7.41-7.38(3H，m)，3.55-3.47(4H，m)，3.02-2.93(4H，m)，1.41(9H，s)。

制备例46

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸乙酯

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例17)(100mg，0.238mmol)、溴乙酸乙酯(0.043ml，0.391mmol)和碳酸铯(170mg，0.521mmol)在DMF中在室温下搅拌5小时。将反应混合物用乙醚(～20mL)稀释，并用水(2x～20ml)洗涤，将有机层通过相分离柱干燥，并真空浓缩，得到标题化合物(77mg，0.16mmol，60％产率)，为黄色油状物。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.19(1H，s)，8.11(1H，dd)，7.81-7.85(2H，m)，7.45(1H，d)，7.34(1H，d)，4.89(1H，sept)，4.07(2H，q)3.42(2H，s)，3.00-291(4H，m)，2.77-2.72(4H，m)，1.36(6H，d)，1.19(3H，t).MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₄计算值469；实测值470[M+H]⁺。

通过类似的方法制备下列化合物。制备例49的化合物进一步通过MDAP纯化。

制备例50

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯

在60℃下，将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例17)(65mg，0.155mmol)、DIPEA(0.104ml，0.593mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.048ml，0.339mmol)在DMF(10ml)中搅拌24小时。将反应混合物在EtOAc(～30mL)和水(～30mL)之间分配，并将水层用EtOAc(～40mL)再萃取一次。将合并的有机物真空浓缩，得到粗的标题化合物(100mg，0.171mmol)，为橙色固体。MS(ES)：C₂₇H₃₂³⁵ClN₃O₄计算值497；实测值498[M+H]⁺。

制备例51

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯

在室温下，将2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例18)(200mg，0.534mmol)、DIPEA(0.327ml，1.869mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.153ml，1.068mmol)在DMF(10ml)中搅拌5小时，然后将反应混合物于60℃加热5小时，将反应混合物在室温下静置过夜，加入另外的4-溴丁酸乙酯(0.076ml，0.534mmol)，并将反应混合物于60℃加热6小时。将反应混合物在乙酸乙酯(～30mL)和水(～30mL)之间分配，并将水层用乙酸乙酯(～40mL)再萃取一次。将合并的有机物真空浓缩，得到标题化合物(218mg，0.402mmol)，为橙色油状物。MS(ES)：C₂₈H₃₂N₄O₄计算值488；实测值489[M+H]⁺。

制备例52

4-(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸乙酯

在室温下，将7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例19)(160mg，0.353mmol)、DIPEA(0.234ml，1.342mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.110ml，0.767mmol)在DMF(10ml)中搅拌5小时。然后将反应混合物于60℃加热5小时，并在室温下静置过夜。加入另外的4-溴丁酸乙酯(0.055ml，0.383mmol)，并将反应混合物于60℃加热6小时。将反应混合物在EtOAc(～30mL)和水(～30mL)之间分配，并将水层用EtOAc(～40mL)再萃取一次。将合并的有机物真空浓缩，得到标题化合物(183mg，0.310mmol)，为橙色固体。MS(ES)：C₂₈H₃₂F₃N₃O₄计算值531；实测值532[M+H]⁺。

制备例53

4-(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸乙酯

将7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例20)(200mg，0.424mmol)、DIPEA(0.281ml，1.608mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.131ml，0.919mmol)在DMF(10ml)中在RT下搅拌5小时。然后将反应混合物于60℃加热5小时，并然后在室温下静置过夜。加入另外的4-溴丁酸乙酯(0.066ml，0.459mmol)，并将反应混合物于60℃加热6小时。将反应混合物在EtOAc(～30mL)和水(～30mL)之间分配，将水层用EtOAc(～40mL)再萃取一次。将合并的有机物真空浓缩，得到标题化合物(277mg，0.454mmol)，为橙色固体。MS(ES)：C₃₁H₃₀F₃N₃O₃计算值549；实测值550[M+H]⁺。

制备例54

7-{5-[3-氰基-4-(甲氧基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在室温下，将7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(240mg，0.785mmol)加入到氢化钠(60％矿物油中的悬浮液)(23.01mg，0.575mmol)在THF(5ml)中的悬浮液中(注意有轻微的泡腾现象)。将生成的混合物在室温下搅拌30分钟，然后加入3-氰基-4-(甲氧基)苯甲酸甲酯(100mg，0.523mmol)，并将反应混合物加热回流(75℃)45分钟。将反应混合物用水和乙酸乙酯稀释，并分离各层，固体存在于两相混合物中，所以将其转移到锥形烧瓶中，并在室温下搅拌2小时。然后将该混合物分离出来，并将有机层真空浓缩。得到标题化合物(280mg，0.502mmol，96％产率)，为黄色油状物。MS(ES)：C₂₅H₂₆N₄O₄计算值447；没有显示质量离子峰(no mass ion present)。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ1H，d(8.44)，1H，dd(8.38)，2H，m(7.89-7.95)，1H，m(7.35-7.42)，1H，m(7.13-7.17)，3H，s(4.06)，4H，m(3.50-3.66)，4H，m(2.87-3.06)，9H，s(1.50)。

制备例55

2-{[2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基]氧基}-3-(甲氧基)苯甲酸甲酯

在冰/水浴冷却下，将DIAD(23.95ml，123mmol)滴加到搅拌下的(2-羟基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(18.05g，112mmol)、2-羟基-3-(甲氧基)苯甲酸甲酯(20.4g，112mmol)和三苯基膦(32.3g，123mmol)的THF(400ml)溶液中。搅拌30分钟，然后蒸发，并不需任何纯化而使用。LC/MS显示基本上仅有产物和三苯基氧膦，得到98.9g的粗产物。MS(ES)：C₁₆H₂₃NO₆计算值325；实测值326[M+H]⁺。

制备例56

2-[(2-氨基乙基)氧基]-3-(甲氧基)苯甲酸甲酯

将2-{[2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基]氧基}-3-(甲氧基)苯甲酸甲酯(制备例55)(98.9g，304mmol)(粗产物，其中实际上只含有最多0.112mols或36.4g)溶于TFA(60ml，779mmol)和DCM(60mL)的混合物中，并在室温下放置1.5小时。蒸发并溶于EtOAc/2M HCl(每种250ml)中，并将有机物用另外的2x100ml的EtOAc萃取。将250ml的EtOAc加入到水相中，并加入500g的冰，并将溶液用50％氢氧化钠碱化。分离有机相，并将水相用另外的5x75ml的EtOAc萃取。将合并的有机物干燥(硫酸镁)，并蒸发，得到11.9g的无色油状物。LC/MS显示为13％的产物和87％的已经环化为苯并氧氮杂的物质。MS(ES)：C₁₁H₁₅NO₄计算值225；实测值226[M+H]⁺。

制备例57

9-(甲氧基)-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将2-[(2-氨基乙基)氧基]-3-(甲氧基)苯甲酸甲酯(制备例56)(11.9g，52.8mmol)的甲苯(200ml)溶液搅拌，并于110℃加热1小时，然后冷却并蒸发，得到标题化合物(10.3g)，为沙色固体。MS(ES)：C₁₀H₁₁NO₃计算值193；实测值194[M+H]⁺。

制备例58

9-羟基-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将9-(甲氧基)-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例57)(9.3g，48.1mmol)的氢溴酸(120ml，2210mmol)溶液搅拌，并于105℃加热5小时。蒸发至干，与200ml的乙醇共沸，并通过用3％甲醇的EtOAc溶液洗脱的biotage色谱法处理两次。用EtOAc研磨，并过滤出来，得到6.61g的白色固体。MS(ES)：C₉H₉NO₃计算值179；实测值180[M+H]⁺。

制备例59

9-[(苯基甲基)氧基]-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将9-羟基-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(7.46g，41.6mmol)、苄基溴(制备例58)(5.45ml，45.8mmol)和碳酸钾(17.26g，125mmol)的混合物在DMF(75ml)中搅拌，并于60℃加热2小时。冷却，用水(300mL)稀释，并用EtOAc(200ml和4x75mL)萃取，将合并的有机物用3x100ml的水洗涤。干燥(硫酸镁)，蒸发，用乙醚研磨，并过滤出来，得到7.55g的白色固体。MS(ES)：C₁₆H₁₅NO₃计算值269；实测值270[M+H]⁺。

制备例60

9-[(苯基甲基)氧基]-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

在氩气下，将1M氢化铝锂(60ml，60.0mmol)的THF溶液加入到搅拌下的9-[(苯基甲基)氧基]-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例59)(7.4g，27.5mmol)的THF(150ml)溶液中，并于60℃加热2小时，然后冷却，并在冰浴冷却下，通过小心地加入100ml的2M氢氧化钠来终止，并将生成的悬浮液过滤，将固体用水和EtOAc洗涤，并将有机物干燥(硫酸镁)并蒸发，得到7.01g的白色固体。MS(ES)：C₁₆H₁₇NO₂计算值255；实测值256[M+H]⁺。

制备例61

9-[(苯基甲基)氧基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-[(苯基甲基)氧基]-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(制备例60)(7.01g，27.5mmol)和BOC₂O(7.01ml，30.2mmol)溶于DCM(100mL)中，并在室温下放置一小时，然后蒸发，并通过biotage色谱法处理，用5％EtOAc的己烷溶液洗脱以除去过量的BOC₂O，并变成用15％EtOAc的异己烷溶液洗脱出标题化合物(8.25g)，为白色固体。MS(ES)：C₂₁H₂₅NO₄计算值355；实测值256[M+H-100]⁺。

制备例62

9-羟基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-[(苯基甲基)氧基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例61)(8.25g，23.21mmol)的乙醇(100ml)溶液用10％钯/碳(0.825g，7.75mmol)氢化18小时，过滤，并蒸发，得到6.16g的白色固体。MS(ES-)：C₂₁H₂₅NO₄计算值265；实测值264[M-H⁺].

制备例62(另外的制备方法)

9-羟基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-醇.氢溴酸盐(制备例85)(55.7g，226mmol)在二氯甲烷(DCM)(550ml)中的悬浮液用三乙胺(47.3ml，339mmol)处理，并搅拌20分钟。将该混合物在冰/水中冷却至约5℃，并用BOC2O(59.6ml，249mmol)的二氯甲烷(DCM)(200ml)溶液，以保持内部温度低于10℃的速度缓慢地处理。当加入完成时，将该混合物温热至室温，搅拌2小时，并在室温下静置过夜。将该混合物用0.5M盐酸(2x250mL)和水(250mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并蒸发，得到淡褐色固体的标题化合物(60.5g)。MS(ES-)：C₂₁H₂₅NO₄计算值265；实测值264[M-H]⁺。

制备例63

9-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将三氟甲磺酸酐(6.04ml，35.7mmol)加入到冰冷却的9-羟基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例62)(6.32g，23.82mmol)的吡啶(100mL)溶液中，并于0℃搅拌2小时。蒸发吡啶，并将残余物溶于EtOAc中。用2M HCl、饱和的碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发，得到标题化合物(9g)，为黄色油状物。MS(ES)：C₁₅H₁₈F₃NO₆S计算值397；实测值298[M+H-100]⁺。

制备例64

9-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例63)(9g，22.65mmol)、氰化锌(3.99g，34.0mmol)和四(三苯基膦)合钯(0)(2.62g，2.265mmol)的DMF(90ml)溶液于80℃加热24小时。将该反应冷却，用EtOAc(400mL)和水(400mL)稀释，并过滤除去不溶物。将滤液分离，并将有机层用水洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。通过快速色谱法纯化，使用1∶9的EtOAc/异己烷、然后用1∶3的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(5.1g)，为无色油状物。MS(ES)：C₁₅H₁₈N₂O₃计算值274；实测值174[M+H-100]⁺。

制备例64(另外的制备方法)

9-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-溴-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例101)(1.34g，4.08mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(11ml)溶液在真空(3mm Hg)下除气15分钟，然后在氮气下搅拌。加入氰化锌(575mg，4.90mmol)，然后加入四(三苯基膦)合钯(0)(472mg，0.41mmol)，并将生成的混合物在氮气下于100℃搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释。将不溶的残余物过滤出来，并用乙酸乙酯洗涤，脱色两天，并用盐水洗涤两次，经硫酸镁干燥，并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用15-45％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为无色固体(980mg)。MS(ES)C₁₅H₁₈N₂O₃计算值274实测值275[M+H]⁺。

制备例65

9-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例64)(5.1g，18.59mmol)、羟基胺盐酸盐(2.58g，37.2mmol)和碳酸氢钠(7.81g，93mmol)在乙醇(50ml)中的悬浮液于60℃加热过夜。加入另一批的羟基胺盐酸盐(1g)，并将该反应于60℃加热过夜。将固体从反应混合物中过滤出来，并将滤液蒸发。将蒸发得到的残余物溶于EtOAc中，用水洗涤，经硫酸镁干燥并蒸发。用乙醚研磨，得到标题化合物(3.94g)，为白色固体。MS(ES)：C₁₅H₂₁N₃O₄计算值307；实测值308[M+H]⁺。

制备例66

9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将9-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例65)(500mg，1.627mmol)、3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(384mg，1.790mmol)、EDC(468mg，2.440mmol)和HOBT(299mg，1.952mmol)的DMF(5ml)溶液在RT下搅拌过夜，然后于120℃加热3小时。将反应混合物冷却，用EtOAc/水稀释，并将有机物经硫酸镁干燥，并蒸发。通过快速色谱法纯化，使用1∶3的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(320mg)，为白色固体。MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值486[M+H]⁺。

制备例66另外的制备方法

9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氮气下，将9-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例65)(32.9g，107mmol)和三乙胺(17.9ml，128mmol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(200ml)中的混合物在冰/水中冷却。用约20分钟的时间，加入3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰氯(制备例102)(28.7g，123mmol)的DMF(100ml)溶液。当加入完成时，将该混合物温热至室温，并在室温下搅拌1小时，然后于120℃搅拌3小时。将该混合物冷却，并倒入水(1升)中。将生成的固体萃取到乙酸乙酯(3x300mL)中，并合并萃取液，用1M盐酸(2x250mL)、然后1M碳酸钠溶液(3x250mL)、盐水(250mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并蒸发。将残余物通过硅胶色谱法纯化，使用10-40％乙酸乙酯的异己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物，为结晶固体(42.7g)MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值486[M+H]⁺。

制备例67

9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

按照类似于制备例66的方法，由制备例65的化合物制备。MS(ES)：C₂₆H₂₈N₄O₅计算值476；实测值477[M+H]⁺。

制备例68

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

将9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐(实施例31)(179mg，0.424mmol)、4-溴丁酸乙酯(0.061ml，0.424mmol)和DIPEA(0.074ml，0.424mmol)的乙腈(5ml)溶液于70℃加热过夜。加入另外的4-溴丁酸乙酯(0.061ml，0.424mmol)和DIPEA(0.074ml，0.424mmol)，并将反应再加热5小时。将冷却的反应混合物用EtOAc/水稀释，分离，将有机物经硫酸镁干燥并蒸发。通过快速色谱法纯化，使用1∶2的EtOAc/异己烷洗脱，得到标题化合物(135mg)，为无色油状物。MS(ES)：C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₅计算值499；实测值500[M+H]⁺。

制备例68另外的制备方法

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

将9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐(实施例31)(20g，47.4mmol)、碳酸钾(16.4g，118mmol)和碘化钾(7.86g，47.4mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(250ml)中的混合物用4-溴丁酸乙酯(7.46ml，52.1mmol)处理，并在氮气下将生成的混合物于80℃搅拌180分钟。将该混合物冷却，并倒入水(1000mL)中。将生成的沉淀萃取到乙酸乙酯(3x250mL)中，并将合并的萃取液用水(2x250mL)、然后用盐水(150mL)洗涤，干燥(硫酸钠)并蒸发，得到无色粘稠的油状物。将粗物质通过硅胶色谱法纯化，使用20-100％乙酸乙酯的异己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物，为无色粘稠的油状物，将其静置结晶(18.3g)。

MS(ES)：C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₅计算值499；实测值500[M+H]⁺。

制备例69

4-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

按照类似于制备例68的方法，由实施例32的化合物制备。MS(ES)：C₂₇H₃₀N₄O₅计算值490；实测值491[M+H]⁺。

制备例70

5-溴-2-{[2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基]氧基}苯甲酸甲酯

将DIAD(9.62g，47.6mmol)加入到5-溴-2-羟基苯甲酸甲酯(10g，43.3mmol)、(2-羟基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(6.98g，43.3mmol)和三苯基膦(12.47g，47.6mmol)在THF(250mL)中的混合物中，并于RT搅拌2.5小时。加入另外的三苯基膦(2.5g)，随后加入DIAD(4mL)，并将混合物静置过夜。蒸发，并通过快速色谱法纯化，使用25％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(8.92g)。MS(ES)：C₁₅H₂₀⁸¹BrNO₅计算值375；实测值276[M+H-100]⁺。

制备例71

7-溴-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮

将5-溴-2-{[2-({[(1，1-二甲基乙基)氧基]羰基}氨基)乙基]氧基}苯甲酸甲酯(制备例70)(8.92g，23.8mmmol)的DCM(18ml)溶液用TFA(7mL)处理，并搅拌5小时。加入另外的(2ml)TFA，并将反应放置过夜。蒸发溶剂，用甲苯(5x)再次蒸发，并溶于甲苯(50mL)中。将生成的残余物用三乙胺(4当量)处理，并于100℃加热过夜，然后蒸发。将残余物通过快速色谱法纯化两次，使用50％EtOAc/己烷、然后用40-45％EtOAc/己烷洗脱。将级分蒸发，得到标题化合物(3.4g)，为白色固体。MS(ES)：C₉H₈⁸¹BrNO₂计算值243；实测值244[M+H]⁺。

制备例72

7-溴-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

将7-溴-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例71)(3.28g，13.55mmol)的四氢呋喃(THF)(30ml)溶液在氩气下搅拌。缓慢地加入硼烷四氢呋喃络合物(81ml，81mmol)，并将溶液于RT搅拌1.5小时。将该溶液于65℃加热过夜。将该反应冷却，并滴加MeOH(20ml)，直至冒气泡的声音停止。然后加入2M HCl(100ml)，并将反应在回流下加热1小时，随后冷却并蒸发除去溶剂。将反应混合物在EtOAc/水之间分配，并分离。将该水层用2M的NaOH碱化，用EtOAc萃取，经硫酸镁干燥并蒸发，得到无色油状物(1g)。将得自于最初的EtOAc层的沉淀的固体过滤，并干燥。将该固体溶于EtOAc/2M NaOH中，分离，并将有机层经硫酸镁干燥，并蒸发，得到无色油状物(1.6g)。合并两批的产物，得到标题化合物(2.6g)，为无色油状物。MS(ES)：C₉H₁₀⁸¹BrNO计算值229；实测值230[M+H]⁺。

制备例73

7-溴-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-溴-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(制备例72)(2.15g，9.43mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中。加入三乙胺(1.445ml，10.37mmol)和焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯(2.263g，10.37mmol)。搅拌4小时，然后加入二氯甲烷，并用水(3x20mL)洗涤。干燥该混合物(MgSO₄)并蒸发。在biotage柱上分离，使用(EtOAc/己烷1∶9)洗脱，并蒸发，得到标题化合物(2.76g)。MS(ES)：C₁₄H₁₈⁸¹BrNO₃计算值329；实测值230[M+H-100]⁺。

制备例74

7-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-溴-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例73)(2.67g，8.14mmol)、氰化锌(1.715g，16.27mmol)和四(三苯基膦)合钯(0)(1.410g，1.220mmol)在DMF(30ml)中的混合物于80℃加热过夜。加入另外的四(三苯基膦)合钯(0)(700mg)，并将黄色悬浮液于80℃再加热5小时。将冷却的反应混合物用EtOAc/水稀释，分离，并将有机物用无水硫酸镁干燥，并蒸发。将粗物质通过快速色谱法纯化，使用EtOAc/异己烷1∶9洗脱。将合并的级分蒸发，得到标题化合物(2.01g)，为黄色固体。δH(CDCl₃，400MHz)：1.42(9H，br.s)，3.81(2H，t)，4.09(2H，m)，4.43(1H，s)，4.51(1H，s)，7.09(1H，m)，7.47-7.59(2H，m).

制备例75

7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-氰基-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例74)(2.016g，7.35mmol)、羟基胺盐酸盐(1.021g，14.70mmol)和碳酸氢钠(3.09g，36.7mmol)在乙醇(30ml)中的悬浮液于60℃加热过夜。将灰色固体通过过滤除去，并将滤液蒸发。将生成的残余物溶于EtOAc中，用水(3x20ml)洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题化合物(1.77g)，为白色固体。MS(ES)：C₁₅H₂₁N₃O₄计算值307；实测值308[M+H]⁺。

制备例76

7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例75)(0.84g，2.73mmol)、3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(可按照WO2005/58848中所述的方法制备)(0.617g，3.01mmol)、EDC(0.786g，4.10mmol)和HOBT(0.502g，3.28mmol)的DMF(10ml)溶液在RT下搅拌过夜。加入另外的EDC(0.4g)，并将反应搅拌3小时。然后加入另外的3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(0.3g)，并将反应于120℃加热1小时，并静置过夜。将反应混合物在EtOAc/水之间分配，并收集有机层，干燥(MgSO₄)并蒸发。将生成的粗物质通过快速色谱法纯化，使用EtOAc/异己烷20-30％洗脱。通过LCMS分析纯化的级分，显示存在一些3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸，所以加入碳酸氢钠和EtOAc。分离EtOAc层，干燥(MgSO₄)并蒸发，得到标题化合物(410mg)，为白色固体。MS(ES)：C₂₆H₂₈N₄O₅计算值476；实测值421[M+H-56]⁺。

制备例77

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

按照类似于制备例76的方法，使用制备例75的化合物和合适的酸制备标题化合物。MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值430[M+H-56]⁺。

制备例78

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

向2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例35)(0.101g，0.268mmol)的乙腈(2ml)溶液中加入DIPEA(0.094ml，0.537mmol)和3-溴丙酸乙酯(0.051ml，0.402mmol)。将反应混合物搅拌，并在氩气下于80℃加热6小时。加入DIPEA(0.094ml，0.537mmol)和3-溴丙酸乙酯(0.051ml，0.402mmol)，并将反应搅拌，在氩气下于80℃加热过夜。加入另外量的DIPEA(0.094ml，0.537mmol)和3-溴丙酸乙酯(0.051ml，0.402mmol)，并将反应再次加热。将反应混合物溶于EtOAc中，用饱和的NaHCO₃溶液(3x15mL)和水(15ml)洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发。将生成的粗物质通过快速色谱法纯化，使用EtOAc/异己烷10-20％洗脱(Biotage柱)，得到标题化合物(92mg)。MS(ES)：C₂₆H₂₈N₄O₅计算值476；实测值477[M+H]⁺。

制备例79

3-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

按照类似于制备例78的方法，由实施例36的化合物制备。MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485；实测值486[M+H]⁺。

制备例80

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

将2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例35)(0.104g，0.276mmol)的溶液在乙腈(2mL)中搅拌。加入DIPEA(0.097ml，0.553mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.059ml，0.414mmol)，并将反应混合物搅拌，并在氩气下于80℃加热6小时。加入另外的4-溴丁酸乙酯(0.059ml，0.414mmol)和DIPEA(0.097ml，0.553mmol)，并将反应混合物搅拌，并在氩气下于80℃加热过夜。然后将反应混合物溶于EtOAc中，用饱和的NaHCO₃溶液(3x15mL)和水(15mL)洗涤，并将有机物干燥(MgSO₄)并蒸发。将粗物质通过快速色谱法纯化，使用EtOAc/异己烷10-20％洗脱(Biotage柱)并蒸发，得到油状的标题化合物(84mg)。MS(ES)：C₂₇H₃₀N₄O₅计算值490；实测值491[M+H]⁺。

制备例81

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(0.105g，0.272mmol)在乙腈(2mL)中搅拌。加入DIPEA(0.095ml，0.544mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.058ml，0.408mmol)，并在氩气下将反应混合物于80℃加热5小时。加入另外的DIPEA(0.095ml，0.544mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.058ml，0.408mmol)，并将反应混合物于80℃加热过夜。然后将反应混合物溶于EtOAc(20ml)中，用NaHCO₃(水溶液)(15mlx3)、并用水(15mlx3)洗涤，并将有机物干燥(MgSO₄)并蒸发。将粗物质通过快速色谱法纯化，使用EtOAc/异己烷20/30％洗脱(Biotage柱)，并蒸发，得到标题化合物，为油状物(80mg)。MS(ES)：C₂₆H₃₀³⁵ClN₃O₅计算值499；实测值500[M+H]⁺。

制备例82

8-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

使用制备例34中所述的方法，使用合适的酸由制备例33的化合物制备。MS(ES)：C₂₆H₂₈N₄O₅计算值476；实测值477[M+H]⁺。

制备例83

4-[8-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯

使用制备例36中所述的方法，由实施例41的化合物制备。MS(ES)：C₂₇H₃₀N₄O₅计算值490；实测值491[M+H]⁺。

制备例84

9-(甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂

将9-(甲氧基)-3，4-二氢-1，4-苯并氧氮杂-5(2H)-酮(制备例57)(50g，259mmol)的无水四氢呋喃(THF)(500ml)溶液冷却至约5℃，并用约20分钟的时间，慢慢地用1M氢化铝锂的THF溶液(259ml，259mmol)处理，同时保持内部温度低于15℃。当加入完成时，将该混合物温热至室温，并搅拌2小时，然后在回流下加热2小时。将该混合物冷却至室温，并然后在干冰/丙酮浴中冷却至约-15℃，并小心地用THF-水的2∶1混合物(100mL)处理。当加入完成时，将该混合物用更多的水(220mL)、并然后用2M氢氧化钠处理，直至形成可滤过的固体。将其通过过滤除去，并用乙酸乙酯(500mL)洗涤。将滤液用盐水(500mL)洗涤，并将水相用乙酸乙酯(2x250ml)萃取。将有机萃取物合并，干燥(硫酸钠)并蒸发，得到标题化合物，为灰白色结晶固体。(42.9g)

MS(ES)：C₁₀H₁₃NO₂计算值179；实测值180[M+H]⁺。

制备例85

2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-醇氢溴酸盐

将9-(甲氧基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂(制备例84)(43.4g，242mmol)在33％HBr的乙酸溶液(300ml，1823mmol)中的悬浮液于80℃加热过夜。将该混合物冷却至室温，然后用乙醚(300mL)处理，并搅拌30分钟。将生成的固体过滤收集，用乙醚(300mL)洗涤，并于40℃真空干燥，得到标题化合物，为淡褐色粉末状物质(55.1g)

MS(ES)：C₉H₁₁NO₂计算值165；实测值166[M+H]⁺。

制备例86

[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸乙酯

向2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈(实施例32)(110mg，0.224mmol)的乙腈(10mL)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(0.08mL，0.449mmol)和溴乙酸乙酯(0.05mL，0.449mmol)。将反应混合物于80℃加热2小时。将该混合物冷却至室温。蒸发溶剂，得到标题化合物，为褐色固体(100mg)。

MS(ES)C₂₅H₂₆N₄O₅计算值462实测值463[M+H]⁺。

制备例87

5-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]戊酸乙酯

向2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈(实施例32)(100mg，0.204mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(0.07ml，0.408mmol)和5-溴戊酸乙酯(0.06mL，0.408mmol)。将反应混合物于80℃加热过夜，然后冷却，并蒸发溶剂。将残余物通过快速色谱法纯化，使用(40-100％乙酸乙酯的环己烷溶液)洗脱，得到标题化合物，为灰白色固体(70mg)。

MS(ES)C₂₈H₃₂N₄O₅计算值504实测值505[M+H]⁺。

制备例88

3-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

向9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐(实施例31)(260mg，0.62mmol)的乙腈(15ml)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(0.214ml，1.23mmol)，随后加入3-溴丙酸乙酯(0.158ml，1.231mmol)。将反应混合物于80℃加热过夜。加入另外的1当量的N，N-二异丙基乙基胺和3-溴丙酸乙酯，并继续加热过夜。将反应混合物冷却并蒸发。将残余物通过柱色谱法纯化，使用50-65％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(80mg)。

MS(ES)C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₅计算值485实测值486[M+H]⁺。

制备例89

9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

将三乙胺(0.281ml，2.02mmol)加入到搅拌下的5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸(可按照WO9702244中所述的方法制备；217mg，1.01mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(20ml)溶液中，随后加入羟基苯并三唑水合物(185mg，1.21mmol)，然后加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(232mg，1.21mmol)，并最后加入9-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例65)(310mg，1.009mmol)。将反应混合物于60℃加热48小时，然后使其冷却，随后用乙酸乙酯稀释，并用水洗涤。将有机相干燥，并蒸发。将残余物通过柱色谱法纯化，使用15-25％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为琥珀色树胶状物质(280mg)。

MS(ES)C₂₄H₂₇³⁵ClN₄O₅计算值486实测值487[M+H]⁺。

制备例90

9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐.

将9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例89)(190mg，0.390mmol)、4M氯化氢的二烷溶液(1ml，4.00mmol)和1，4-二烷(10ml)的混合物在60℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却，形成白色沉淀。将该固体滤出，得到白色固体的产物(170mg)。MS(ES)C₁₉H₁₉³⁵ClN₄O₃计算值386实测值387[M+H]⁺。

制备例91

3-[9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

向9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐(制备例90)(80mg，0.189mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(0.066ml，0.378mmol)，随后加入3-溴丙酸乙酯(0.048ml，0.378mmol)。将反应混合物于80℃加热过夜。加入另外的1当量的N，N-二异丙基乙基胺和3-溴丙酸乙酯，并继续加热过夜。将反应混合物冷却并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化。用40-60％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为橄榄绿色的油状物(28mg)。

MS(ES)C₂₄H₂₇³⁵ClN₄O₅计算值486实测值487[M+H]⁺。

制备例92

3-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯

向2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(实施例32)(90mg，0.218mmol)的乙腈(10ml)溶液中加入N，N-二异丙基乙基胺(0.076ml，0.436mmol)，随后加入3-溴丙酸乙酯(0.056ml，0.436mmol)。将反应混合物于80℃加热过夜。加入另外的1当量的N，N-二异丙基乙基胺和3-溴丙酸乙酯，并继续加热过夜。将反应混合物冷却并蒸发。将残余物通过硅胶柱色谱法纯化，使用60-70％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为褐色油状物(40mg)。

MS(ES)C₁₀H₁₃NO₂计算值476实测值477[M+H]⁺。

制备例93

5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸1-甲基乙基酯

在室温下，将5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸1-甲基乙基酯(可根据WO9702244中所述的方法制备；7.73g，30.0mmol)在无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)(60mL)和氰化锌(4.23g，36.0mmol)中的混合物除气，并用氮气吹扫几次。加入四(三苯基膦)合钯(0)(3.47g，3.00mmol)，并重复除气步骤。然后将反应混合物于100℃加热24小时。将反应混合物冷却至室温，然后过滤以除去固体残余物，用少量的DMF洗涤。加入另外量的氰化锌(4.23g，36.0mmol)和不同批的四(三苯基膦)合钯(0)(3.47g，3.00mmol)，进行相同的除气和氮气吹扫。然后于100℃继续加热2小时。

将反应混合物再次冷却至室温，用乙酸乙酯稀释，并过滤以除去固体残余物。将该溶液浓缩成油状物。静置后，分离出更多的固体。将该混合物用乙酸乙酯萃取，然后将有机相用水(2x)、盐水洗涤，干燥并浓缩，得到橙色油状物。将粗产物加载到硅胶柱上，并进行色谱法处理，使用0-10％乙酸乙酯的环己烷溶液梯度洗脱，得到3.87g的产物，其中污染有三苯基膦。进一步通过色谱法纯化，使用0-5％乙酸乙酯的环己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物(1.32g)。MS(ES)C₁₃H₁₆N₂O₃计算值248；实测值248[M+H]⁺。

制备例94

5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸

将5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸1-甲基乙基酯(制备例93)(1.28g，5.15mmol)的乙醇(20ml)溶液用氢氧化钠(5.15ml，10.30mmol)处理，并将混合物在室温下搅拌，得到单相溶液，直至LC/MS显示没有起始原料。将该混合物浓缩以除去乙醇。将残余物用水稀释，然后用2M HCl酸化，得到稠的白色沉淀。将该固体滤出，用水洗涤，并于60℃真空干燥过夜，得到标题化合物(1.07g)，MS(ES)C₁₀H₁₀N₂O₃计算值206；实测值205[M-H]⁺。

制备例95

7-(5-{5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在室温下，将5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸(制备例94)(206mg，0.999mmol)的二氯甲烷(5ml)溶液用草酰氯(0.262ml，3.00mmol)和1滴的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)处理。1小时后，将该溶液浓缩以得到粗的酰氯，为黄色的树胶状物质。

将7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(305mg，0.999mmol)的DMF(5.00ml)溶液用三乙胺(0.17ml，1.20mmol)，随后用粗的酰氯(如上所述)的DMF(1mL)溶液处理。10分钟后，将该混合物加热至120℃。2小时后，将反应混合物冷却至室温并浓缩。将残余物在乙酸乙酯和稀的氢氧化钠之间分配。将有机层用盐水洗涤，干燥并浓缩以得到黄色的树胶状物质，将其静置结晶。将粗产物加载到硅胶柱上，并进行色谱法处理，使用0-20％乙酸乙酯的环己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物，为无色结晶固体(224mgs)，MS(ES)C₂₆H₂₉N₅O₄计算值475；实测值420[M+-tBu]⁺。

制备例96

7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在室温下，将5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶甲酸(可按照WO9702244中所述的方法制备；215mg，0.999mmol)在二氯甲烷(3ml)中的悬浮液用草酰氯(0.26ml，3.00mmol)和1滴N，N-二甲基甲酰胺(DMF)处理。2小时后，将该溶液浓缩，得到粗的酰氯，为黄色油状物。

将7-[(羟基氨基)(亚氨基)甲基]-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例41)(305mg，0.999mmol)溶于无水DMF(2mL)中，用三乙胺(0.17ml，1.20mmol)处理，并在室温下搅拌。加入粗的酰氯(如上所述)的无水DMF(2ml)溶液，得到浅黄色浑浊溶液。在室温下，将该混合物搅拌1.5小时，然后于120℃加热2小时。将反应混合物冷却至室温，并浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用水、然后用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到淡黄色泡沫状物质。将粗产物加载到硅胶柱上，并进行色谱法处理，使用0-15％乙酸乙酯的环己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物，为无色泡沫状物质/固体(305mgs)，MS(ES)C₂₅H₂₉³⁵ClN₄O₄计算值484；实测值429[M+-tBu]⁺。

制备例97

4-[7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯

在室温下，将7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例50)(192mg，0.499mmol)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液用碳酸钾(103mg，0.748mmol)和4-溴丁酸乙酯(0.09ml，0.60mmol)处理。将该混合物加热至100℃。约2小时后，将该混合物冷却并浓缩。将残余物在乙酸乙酯和水之间分配。将乙酸乙酯层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到无色树胶状物质。将粗产物加载到硅胶柱上，并进行色谱法处理，使用80-100％乙酸乙酯的环己烷溶液梯度洗脱，得到标题化合物，为无色树胶状物质，将其静置缓慢结晶(185mgs)。

MS(ES)C₂₆H₃₁³⁵ClN₄O₄计算值498；实测值499[M+H]⁺。

制备例98

3-溴-2-羟基苯甲醛

在氮气下，在室温下，用10分钟的时间，将三乙胺(72ml，520mmol)加入到多聚甲醛(23.4g，780mmol)和无水氯化镁(49.5g，520mmol，Aldrich；CAS 7786-30-3)在THF(1升)中的悬浮液中。将生成的混合物搅拌20分钟，然后用5分钟的时间，通过注射器加入2-溴苯酚(45g，260mmol)。将生成的混合物在温和回流下搅拌6小时，然后冷却至室温。将该溶液放置过周末，然后用乙醚(500mL)稀释。将有机相用2N盐酸(500mL)洗涤，并分离两相。将不溶物滤出，并将有机相用2N盐酸(500ml)洗涤两次，然后用水(100mL)洗涤五次，经硫酸镁干燥，并真空浓缩，得到标题化合物，为无色固体(46.5g)。MS(ES)C₇H₅⁷⁹BrO₂计算值200实测值199[M-H]⁺。

制备例99

2-溴-6-{[(2-羟基乙基)氨基]甲基}苯酚

在氮气下，在0℃下向3-溴-2-羟基苯甲醛(制备例98)(9.6g，47.8mmol)的四氢呋喃(250ml)溶液中加入2-氨基乙醇(3.02ml，50.1mmol)，然后加入细粉末状的三乙酰氧基硼氢化钠(10.6g，50.1mmol)，并将生成的混合物于0℃搅拌1小时，然后搅拌过夜并真空浓缩。将残余物用二氯甲烷(～200mL)研磨，并将不溶物滤出。将有机相真空浓缩，并将残余物使用SCX柱纯化，得到标题化合物，为白色固体(10.1g，)。MS(ES)C₉H₁₀⁷⁹BrNO₂计算值243实测值244[M+H]⁺。

制备例100

[(3-溴-2-羟基苯基)甲基](2-羟基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯

将2-溴-6-{[(2-羟基乙基)氨基]甲基}苯酚(制备例99)(2.3g，9.35mmol)溶于甲醇(10mL)和四氢呋喃(40mL)中，并将生成的混合物于0℃冷却。加入三乙胺(1.95ml，14.0mmol)，然后加入焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯(2.39ml，10.3mmol)，并将生成的混合物于该温度下搅拌2.5小时。加入另外的三乙胺(195ml，1.40mmol)和焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯(239ml，1.03mmol)，将生成的混合物温热至室温，并静置过周末，然后真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯中，并将有机相用2N盐酸、然后用盐水洗涤两次，并干燥(硫酸镁)，并真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用15-45％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到浅黄色油状物的标题化合物(3.4g，)。MS(ES)C₁₄H₂₀⁷⁹BrNO₄计算值345实测值246[M+H-COOC(CH₃)₃]⁺。

制备例101

9-溴-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯

在氮气下，将[(3-溴-2-羟基苯基)甲基](2-羟基乙基)氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例100)(2.35g，6.79mmol)和三苯基膦(1.96g，7.47mmol)在四氢呋喃(40ml)中的混合物冷却至0℃。滴加偶氮二甲酸二异丙基酯(DIAD)(1.47ml，7.47mmol)，并将生成的混合物搅拌1小时，然后真空浓缩。除去溶剂，并将物质用盐水洗涤两次，干燥(硫酸镁)然后真空浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用5-25％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物(1.35g)。MS(ES)C₁₄H₁₈⁷⁹BrNO₂计算值327实测值228[M+H-COOC(CH₃)₃]⁺。

另外的方法(由3-溴-2-羟基苯甲醛制备)：

在室温下，将3-溴-2-羟基苯甲醛(Aldrich；5.0g，24.9mmol)的乙醇(100ml)溶液用乙醇胺(1.65ml，27.4mmol)处理，并将生成的混合物搅拌约1小时。然后加入硼氢化钠(1.129g，29.8mmol)，并将生成的混合物加热回流约2小时，然后冷却至室温，并然后置于冰-水中，用三乙胺(5.2ml，37.3mmol)处理，随后分批加入焦碳酸双(1，1-二甲基乙基)酯(8.14g，37.3mmol)。一旦加入完成后，将生成的混合物从冰浴中除去，并将混合物在室温下搅拌30分钟至1小时。将生成的混合物用2M氢氧化钠(49.7ml，99mmol)处理，并于50℃搅拌1.5小时，在室温下搅拌过夜，然后于60℃搅拌5小时。加入2M氢氧化钠(49.7ml，99mmol)，并将生成的混合物于60℃搅拌2小时，然后在室温下搅拌过周末。真空除去大部分的乙醇，并将生成的水相用2N盐酸酸化至pH为5。将水相用二氯甲烷萃取三次，并将有机相用盐水洗涤，干燥(硫酸镁)，并真空浓缩。将残余物溶于四氢呋喃(100mL)中，并在室温下用三苯基膦(10.44g，39.8mmol)处理，随后滴加偶氮二甲酸二异丙基酯(DIAD)(7.74ml，39.8mmol)。将生成的混合物使用冰-水短暂地冷却，并然后在室温下搅拌1-2小时，然后真空浓缩。将粗产物的DCM溶液加载到烧结玻璃漏斗中的细的硅胶中，用环己烷(200mLs)洗涤，随后用3x500mL部分的10％EtOAc/环己烷洗涤。将每个级分分别浓缩。将残余物通过硅胶快速色谱法纯化，使用0-10％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物(6.62g)。MS(ES)C₁₄H₁₈⁷⁹BrNO₂计算值327实测值228[M+H-COOC(CH₃)₃]⁺。

制备例102

3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酰氯

向圆底烧瓶中装入3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯甲酸(购自ParagosProduct List，10.2g，47.5mmol)、二氯甲烷(158mL)和草酰氯(8.29ml，95mmol)。将反应混合物在冰/水浴中冷却至0℃，随后加入N，N-二甲基甲酰胺(0.158mL)。将该溶液温热至环境温度过夜。蒸发溶剂得到标题化合物，为米色固体(11.4g)。δH(CDCl3，400MHz)：1.44(6H，d)，4.73(1H，七重峰)，6.98(1H，d)，8.0(1H，dd)，7.98(1H，d)。

实施例1

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂盐酸盐

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例7)(75mg，0.155mmol)用4N HCl的二烷(1162μl，4.65mmol)溶液处理，并将澄清的溶液静置1.5小时。形成白色沉淀。加入乙醚(1ml)，并滤出白色固体，用乙醚洗涤。干燥该固体后得到标题化合物(45mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.36(6H，d)，1.91-1.98(2H，m)，3.11-3.14(2H，m)，3.36-3.39(2H，m)，4.41(2H，s)，4.85-4.94(1H，m)，7.46(1H，d)，7.64(1H，d)，7.95-7.80(2H，m)，8.11(1H，dd)，8.19(1H，d)，9.04(2H，宽s)；MS(ES)C₂₁H₂₂³⁵ClN₃O₂计算值383；实测值384.0[M+H]⁺。

实施例2

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸

将[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例8)(65mg，0.131mmol)用HCl(1305μl，5.22mmol)(4N的二烷溶液)处理，并静置2小时。然后将反应混合物于50℃温热1小时，然后于60℃再加热1.25小时，随后蒸发除去溶剂。用乙醚/EtOAc研磨失败后，将得到的物质通过MDAP纯化。冷冻干燥合适的MDAP级分后得到白色固体(20mg)。在真空下于70℃进一步干燥16小时，得到固体的标题化合物(16mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.36(6H，d)，1.51-1.53(2H，m)，2.98-3.00(2H，m)，3.4(2H，br.s)，4.10(2H，s)，4.86-4.92(1H，m)，7.32(1H，d)，7.44(1H，d)，7.83-7.88(2H，m)，8.11(1H，dd)，8.18(1H，d)；MS(ES)C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₄计算值441；实测值442[M+H]⁺。

实施例3

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

将7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例9)(310mg，0.653mmol)用HCl(3266μl，13.06mmol)(4N的二烷溶液)处理，并搅拌。30分钟后，形成白色沉淀。1小时后，加入乙醚(2ml)，并将沉淀过滤出来，用乙醚洗涤。干燥后得到标题化合物(230mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.39(6H，d)，1.91(2H，m)，3.11-3.13(2H，m)，3.37-3.40(2H，m)，4.42(2H，s)，4.94-5.02(1H，m)，7.57(1H，d)，7.64(1H，d)，7.96-8.00(2H，m)，8.41(1H，dd)，8.52(1H，d)，9.04(2H，宽s)；MS(ES)C₂₂H₂₂N₄O₂计算值374；实测值375.0[M+H]⁺。

实施例4

[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸

将[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例10)(85mg，0.174mmol)用HCl(1305μl，5.22mmol)(4N的二烷溶液)处理，并于50℃温热2小时。形成白色的结晶产物。将该反应冷却至RT，并将固体过滤出来，并用乙醚洗涤。干燥后得到标题化合物(65mg)，为白色固体。δH(400MHz，d₆DMSO)1.39(6H，d)，1.91-2.00(2H，m)，3.11-3.12(2H，m)，3.59(2H，m)，4.00(2H，s)，4.60(2H，s)，4.94-5.02(1H，m)，7.53-7.59(2H，m)，7.99-8.06(2H，m)，8.41(1H，dd)，8.52(1H，d)；MS(ES)C₂₄H₂₄N₄O₄计算值432；实测值433[M+H]⁺。

实施例5

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丁酸乙酸盐

将溶于乙醇(20ml)中的4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丁酸乙酯(制备例11)(90mg，0.184mmol)用氢氧化钠(0.184ml，0.368mmol)(2N(水溶液))溶液、随后用水(5.00mL)处理。将该混合物于RT下搅拌3小时，并静置过夜。加入2N的NaOH(水溶液)(150μl)，并将反应混合物搅拌3小时。然后蒸发除去乙醇，并将水层用AcOH酸化。将产物萃取到EtOAc(50mL)中，并经MgSO₄干燥。蒸发除去溶剂，得到白色沉淀。加入乙醚，并将固体过滤出来，并用乙醚洗涤，干燥后得到标题化合物(44mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.39(6H，d)，1.91-1.95(4H，m)，2.30(2H，t)，2.96(2H，m)，3.13(2H，m)，3.53(2H，m)，4.60(2H，s)，4.94-5.03(1H，m)，7.57(1H，d)，7.68(1H，d)，7.97-8.00(2H，m)，8.41(1H，dd)，8.52(1H，d)10.6(1H，v.宽s)，12.3(1H，v.宽s)；MS(ES)C₂₆H₂₈N₄O₄计算值460；实测值461.0[M+H]⁺。

实施例6

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丙酸盐酸盐

将3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]丙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例12)(70mg，0.139mmol)用HCl(1045μl，4.18mmol)(4N的二烷溶液)处理，并于50℃温热1.5小时。开始形成白色沉淀。加入乙醚(0.5ml)，并将白色固体过滤出来，并用乙醚洗涤，干燥后得到标题化合物(57mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.39(6H，d)，1.91-1.96(2H，m)，2.82(2H，m)，3.12-3.21(4H，m)，3.56(2H，m)，4.62(2H，s)，4.96-5.02(1H，m)，7.57(1H，d)，7.71(1H，d)，7.99-8.01(2H，m)，8.41(1H，dd)，8.52(1H，d)，10.3(1H，v.宽s)，12.8(1H，v.宽s)；MS(ES)C₂₅H₂₆N₄O₄计算值446；实测值447.0[M+H]⁺。

实施例7

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-6-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

将6-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例16)(505mg，1.064mmol)溶于DCM(40mL)中，并用三氟乙酸(4ml，51.9mmol)处理。将生成的混合物在回流下加热1小时，然后蒸发。将生成的残余物在DCM(20mL)和2NNaOH(20mL)之间分配。将DCM层收集，干燥(疏水性砂芯)并蒸发。将游离碱溶于4M HCl的二烷溶液中，并蒸发，得到HCl盐形式的2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-6-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐(438mg，1.066mmol，100％产率)，为灰白色粉末。δH(400MHz，CDCl₃)10.15(1H，br.s)，8.39(1H，s)，8.33-8.31(1H，m)，7.75-7.85(1H，m)，7.45-7.3(2H，m)，7.14(1H，d)，4.84-4.76(1H，m)，3.90-3.30(8H，m)1.48(6H，d)；MS(ES)C₂₂H₂₂N₄O₂计算值374；实测值375[M+H]⁺。

实施例8

6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

将6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例17)(260mg，0.537mmol)溶于DCM(20mL)中，并用三氟乙酸(2ml，26.0mmol)处理。将生成的混合物在回流下加热1小时，然后蒸发。将生成的残余物在DCM(10mL)和2NNaOH(10mL)之间分配。收集DCM层，干燥(疏水性砂芯)并蒸发。将游离碱溶于4M HCl的二烷溶液中，并蒸发，得到HCl盐形式的6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(225mg，0.535mmol，100％产率)，为灰白色粉末。δH(400MHz，CDCl₃)10.10(2H，br.s)，8.18(1H，s)，8.02(1H，d)，7.82-7.80(1H，m)，7.33-7.22(2H，m)，7.05(1H，d)，5.30(2H，s)，4.76-4.64(1H，m)，3.8-3.65(2H，m)，3.48-3.3(4H，m)，1.45(6H，d)；MS(ES)C₂₁H₂₂³⁵ClN₃O₂计算值383；实测值384[M+H]⁺。

实施例9

3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸盐酸盐

将3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例18)(25mg，0.049mmol)在4M HCl的1，4-二烷溶液(10mL)中在室温下搅拌18小时。蒸发并用乙醚研磨，得到标题化合物3-[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸盐酸盐(13mg，0.026mmol，54.1％产率)，为黄色树胶状物质。MS(ES)C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₄计算值455；实测值456[M+H]⁺。

实施例10

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸盐酸盐

将[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例19)(120mg，0.241mmol)在4M HCl的1，4-二烷溶液(20mL)中在室温下搅拌18小时。蒸发并用乙醚研磨，得到HCl盐形式的[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸盐酸盐(110mg，0.216mmol，90％产率)，为米色粉末。MS(ES)C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₄计算值441；实测值442[M+H]⁺。

实施例11

6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂

在RT下，在氩气下，向3-[2-(氨基甲基)-6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)苯基]-1-丙醇(制备例23)(105.2mg，0.262mmol)和三苯基膦(343mg，1.309mmol)的无水DCM(40ml)溶液中滴加DIAD(0.242ml，1.243mmol)，并将生成的浅黄色溶液于RT搅拌18小时。将该溶液浓缩至～5ml，然后通过SCX-3柱(1g)，用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到浅黄色油状物(95.7mg)。经反相质量控制的自动纯化，得到两个含所需产物的级分，其中一个污染有O＝PPh₃。将两个级分都直接加入到SCX-2柱(10g)中，用MeOH洗涤。将产物用0.5M NH₃的MeOH溶液洗脱；真空浓缩，得到浅黄色薄膜的6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-2-苯并氮杂(15.3mg，0.034mmol，12.94％产率)。δH(400MHz，CDCl₃)8.20(1H，d)，8.04(1H，dd)，7.69(1H，d)，7.31(1H，d)，7.24(1H，t)，7.05(1H，d)，4.71(1H，sept)，4.09(2H，s)，3.30-3.24(4H，m)，1.80(2H，m)，1.44(6H，d)；MS(ES)C₂₁H₂₂³⁵ClN₃O₂计算值383；实测值384[M+H]⁺。

实施例12

[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸盐酸盐

将[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯和[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸(制备例24)的5∶2混合物(21.4mg)在4M HCl的二烷溶液(3ml)中于RT搅拌21小时。将反应混合物真空浓缩，然后再溶于4M HCl的二烷溶液(3mL)中，并将溶液再搅拌24小时。真空浓缩，得到黄色油状物(41mg)，将其用乙醚(2x3ml)研磨，得到白色固体的[6-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，3，4，5-四氢-2H-2-苯并氮杂-2-基]乙酸盐酸盐(16.1mg，0.031mmol，90％产率)。δH(400MHz，d₆DMSO)8.17(1H，d)，8.10(1H，dd)，7.87(1H，dd)，7.58(1H，d)，7.49(1H，t)，7.46(1H，d)，4.89(1H，sept)，4.69(2H，s)，4.06(2H，s)，3.58(2H，br t)，3.35(2H，m)，2.00(2H，br s)，1.36(6H，d)；MS(ES)C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₄计算值441；实测值442[M+H]⁺。

实施例13

8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐

将8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例34)(0.171g，0.352mmol)溶于1，4-二烷(1mL)中，并加入4M HCl(4ml，16.00mmol)的二烷溶液。将反应混合物在室温下放置3小时。将生成的沉淀固体过滤出来，并用二烷和乙醚洗涤，得到标题化合物(116mgs)，为白色固体的盐酸盐。δH(400MHz，MeOD)1.42(6H，d)，3.64(2H，m)，4.34(2H，m)，4.48(2H，s)，4.86(1H，m)，7.31(1H，d)，7.59(1H，d)，7.87(1H，d)，7.94(1H，dd)，8.11(1H，dd)，8.21(1H，dd)；MS(ES)C₂₀H₂₀³⁵ClN₃O₃计算值385；实测值386[M+H]⁺。

实施例14

3-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸盐酸盐

将2M氢氧化钠溶液(水溶液)(0.5ml，1.000mmol)加入到3-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯(制备例35)(0.09g，0.185mmol)的乙醇(4mL)溶液中，并在室温下放置2小时。然后将该反应蒸发，并将生成的粗产物溶于EtOAc/水(每种30ml)中，并用乙酸酸化。将有机层干燥(硫酸镁)并蒸发。将生成的粗产物与20ml的甲苯共沸，并将残余物溶于10ml的DCM中。加入1M HCl(1ml)的乙醚溶液，并将反应混合物蒸发，然后用乙醚研磨。过滤出来米色固体的盐酸盐形式的标题化合物(56mg)。δH(400MHz，MeOD)1.42(6H，d)，2.92(2H，t)，3.55(2H，t)，3.78(2H，m)，4.40(2H，m)，4.65(2H，s)，4.87(1H，m)，7.31(1H，d)，7.61(1H，d)，7.87(1H，d)，7.96(1H，dd)，8.11(1H，dd)，8.21(1H，d)；MS(ES)C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₅计算值457；实测值458[M+H]⁺。

实施例15

4-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

将2M氢氧化钠(水溶液)(0.5ml，1.000mmol)加入到4-[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯(制备例36)(0.103g，0.206mmol)的乙醇(4mL)溶液中，并在室温下放置2小时。将反应混合物蒸发，并将残余物溶于水/EtOAc(每种30ml)中，并用乙酸酸化。将有机层收集，干燥(硫酸镁)，蒸发并与15ml的甲苯共沸。通过用乙醚研磨得到标题化合物，并滤出，为白色固体(65mg)。δH(400MHz，d₆DMSO)1.36(6H，d)，1.70(2H，m)，2.23(2H，t)，2.33(2H，t)，3.02(2H，m)，3.84(2H，s)，4.06(2H，m)，4.89(1H，m)，7.44(2H，m)，7.61(1H，d)，7.72(1H，dd)，8.10(1H，dd)，8.18(1H，d)；MS(ES)C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₅计算值471；实测值472[M+H]⁺。

实施例16

[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸

将[8-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸1，1-二甲基乙基酯(制备例37)(0.13g，0.260mmol)溶于1，4-二烷(1mL)中，并加入4M HCl(4ml，16.00mmol)的二烷溶液，并将反应混合物在室温下放置24小时。然后将反应混合物蒸发，用乙醚研磨，并将生成的固体滤出。将该固体溶于5ml的2M氢氧化钠中，并用乙酸酸化，此时分离固体。尝试将其溶于EtOAc中，但是不能溶解，所以过滤出来，并用水、丙酮和乙醚彻底洗涤，得到标题化合物(44mgs)，为白色固体。δH(400MHz，d₆DMSO)1.36(6H，d)，3.13(2H，br.s)，3.96(2H，s)，4.08(2H，br.s)，4.89(1H，m)，7.38(1H，d)，7.44(1H，d)，7.61(1H，s)，7.72(1H，d)，8.11(1H，d)，8.18(1H，d)，(剩余2H信号被溶剂峰遮蔽)；MS(ES)C₂₂H₂₂³⁵ClN₃O₅计算值443；实测值444[M+H]⁺。

实施例17

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例42)(950mg，1.963mmol)在盐酸(4M的二烷溶液，10ml，40.0mmol)和1，4-二烷(10ml)中的溶液在室温下搅拌5小时(形成沉淀)。将反应混合物过滤，并用二烷(～5ml)洗涤，并将固体真空(干燥枪(pistol))干燥过夜，得到标题化合物(711mg，1.607mmol，82％产率)，为白色固体。δH(CDCl₃，400MHz)：10.17(2H，br s)，8.25(1H，d)，8.06(1H，dd)，7.98-8.03(2H，m)，7.33(1H，d)，7.06(1H，d)，4.72(1H，sept)，3.35-3.47(8H，m)，1.46(6H，d)。MS(ES)：C₂₁H₂₂³⁵ClN₃O₂计算值383；实测值384[M+H]⁺。

实施例18

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

将7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例43)(735mg，1.55mmol)溶于4M HCl的二烷溶液中，并将该溶液搅拌1小时。将标题化合物过滤出来，为白色固体，在真空烘箱中干燥(462mg，1.13mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：9.24(2H，brs)，8.51(1H，d)，8.40(1H，dd)，7.95(1H，d)，7.92(1H，dd)，7.57(1H，d)，7.45(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.28-3.18(8H，m)，1.39(6H，d)。MS(ES)：C₂₂H₂₂N₄O₂计算值374；实测值375[M+H]⁺。

实施例19

7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

将7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例44)(550mg，1.06mmol)溶于4M HCl的二烷溶液(5mL)中，并将溶液搅拌2小时。将标题化合物过滤出来，为白色固体，在真空烘箱中干燥(259mg，0.57mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：9.23(2H，brs)，8.40(1H，dd)，8.31(1H，d)，7.96(1H，d)，7.93(1H，dd)，7.59(1H，d)，7.44(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.27-3.18(8H，m)，1.36(6H，d)；MS(ES)：C₂₂H₂₂F₃N₃O₂计算值417；实测值418[M+H]⁺。

实施例20

7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

将7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例45)(440mg，0.82mmol)溶于4M HCl的二烷溶液(3mL)中，并将该溶液搅拌2小时。将标题化合物过滤出来，为白色固体(376mg，0.82mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：9.27(2H，brs)，8.53(1H，d)，8.51(1H，dd)，8.01(1H，d)，7.97(1H，dd)，7.74(1H，d)，7.54-7.50(3H，m)，7.47(1H，d)，7.43-7.39(2H，m)，3.28-3.20(8H，m).MS(ES)：C₂₅H₂₀F₃N₃O计算值435；实测值436[M+H]⁺。

实施例21

3-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丙酸

将7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐(实施例17)(200mg，0.52mmol)、2-丙烯酸1，1-二甲基乙基酯(151μL，1.04mmol)和二异丙基乙基胺(453μL，2.60mmol)在甲醇(5ml)中的混合物在微波中于90℃加热30分钟，随后将溶剂真空除去。将残余物溶于4M HCl(2ml)的二烷溶液中，并将混合物在室温下搅拌5小时。将溶剂真空除去，并将残余物通过MDAP纯化。向含产物的级分中加入2M HCl，并将溶液真空浓缩，得到白色固体的标题化合物(116mg，0.24mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：12.73(1H，br.s)，10.76(1H，br.s)，8.19(1H，d)，8.11(1H，dd)，7.98(1H，d)，7.93(1H，dd)，7.46(1H，d)，7.45(1H，d)，4.89(1H，七重峰)，3.76-3.64(2H，m)，3.44-3.31(4H，隐藏在H₂O峰下)，3.25-3.03(4H，m)，2.89(2H，t)，1.37(6H，d)。MS(ES)：C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₄计算值455；实测值456[M+H]⁺。

实施例22

[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸

将[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸乙酯(制备例46)(77mg，0.164mmol)的甲醇(30ml)溶液在室温下搅拌，并加入氢氧化钠(3ml，6.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去，将该固体用甲醇(～5mL)研磨，并将生成的固体过滤出来并干燥。将该固体悬浮于甲醇(～30mL)中，并加入乙酸使溶液的pH达到5-6，将溶剂真空除去。将生成的残余物溶于DCM(～30mL)和水(～30mL)中，并分离各层。将水层用DCM(～20mL)再次萃取，并将合并的有机物通过相分离柱，并将溶剂真空减少。将生成的残余物在干燥枪中于60℃干燥，得到标题化合物(22mg，0.047mmol，29％产率)，为灰白色固体。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.19(1H，s)，8.11(1H，d)，7.82-7.90(2H，m)，7.44(1H，d)，7.36(1H，d)，4.89(1H，sept)，3.34(2H，s)，3.07-2.98(4H，m)，2.91-2.86(4H，m)，1.37(6H，d.MS(ES⁺)：C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₄计算值441；实测值442[M+H]⁺。

实施例23

[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸

将[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]乙酸乙酯(制备例47)(43mg，0.09mmol)、氢氧化钠水溶液(2M，430μL，0.86mmol)和乙醇(4.3ml)的混合物于40℃加热1小时。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将残余物溶于水中，然后将其用乙酸酸化至pH为6。将水相用EtOAc(2x20mL)萃取，并将合并的有机级分浓缩以得到白色固体，然后将其用EtOAc研磨，得到标题化合物，为白色固体(36mg，0.08mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.50(1H，d)，8.41(1H，dd)，7.85-7.80(2H，m)，7.55(1H，d)，7.32(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.00-2.91(6H，m)，2.75-2.66(4H，m)，1.39(6H，d)；MS(ES-)：C₂₄H₂₄N₄O₄计算值432；实测值431[M-H⁺].

实施例24

(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸

将(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸乙酯(制备例48)(59mg，0.12mmol)、氢氧化钠水溶液(2M，590μL，1.18mmol)和乙醇(6ml)的混合物于40℃加热1小时。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将残余物溶于水中，然后将其用乙酸酸化至pH为6。将水相用EtOAc(2x20mL)萃取，随后将合并的有机级分浓缩，并将残余物用EtOAc研磨，滤出标题化合物，并在真空烘箱中干燥，得到白色固体(36mg，0.08mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.41(1H，dd)，8.30(1H，d)，7.88-7.82(2H，m)，7.58(1H，d)，7.35(1H，d)，4.98(1H，七重峰)，3.25(2H，s)，3.06-2.96(4H，m)，2.89-2.81(4H，m)，1.36(6H，d)；MS(ES-)：C₂₄H₂₄F₃N₃O₄计算值475；实测值474[M-H⁺].

实施例25

(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸

将(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)乙酸乙酯(制备例49)(22mg，0.04mmol)、氢氧化钠水溶液(2M，220μL，0.44mmol)和乙醇(2.2ml)的混合物于40℃加热1小时。将反应混合物冷却至室温并浓缩。将残余物溶于水中，然后将其用乙酸酸化至pH为6。将水相用EtOAc(2x20mL)萃取，随后将合并的有机级分浓缩，并将残余物用EtOAc研磨，滤出标题化合物，并在真空烘箱中干燥，得到白色固体(13mg，0.03mmol)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.52(1H，d)，8.50(1H，dd)，7.92-7.86(2H，m)，7.73(1H，d)，7.54-7.49(3H，m)，7.44-7.35(3H，m)，3.18(2H，s)，3.05-2.96(4H，m)，2.85-2.79(4H，m)；MS(ES-)：C₂₇H₂₂F₃N₃O₃计算值493；实测值492[M-H⁺].

实施例26

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸

将4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯(制备例50)(100mg，0.201mmol)的乙醇(6ml)溶液在室温下搅拌，并加入氢氧化钠(1.5ml，3.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后将其用乙酸酸化至pH为5，并将混合物真空浓缩。将生成的残余物溶于EtOAc(～30mL)和水(～30mL)中，并分离各层，将水层用EtOAc(～20mL)再次萃取，并将合并的有机物通过相分离柱，并将溶剂真空减少。将残余物通过用甲醇研磨来纯化，过滤固体，并在烧结玻璃漏斗上干燥，得到标题化合物(30mg，0.061mmol，30％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.19(1H，s)，8.11(1H，d)，7.79-7.90(2H，m)，7.44(1H，d)，7.34(1H，d)，4.89(1H，sept)，3.46-3.24(2H，隐藏在H₂O峰下)，3.01-2.93(4H，m)，2.68-2.59(4H，m)，2.28(2H，t)，1.70(2H，五重峰)，1.37(6H，d)。MS(ES)：C₂₅H₂₈³⁵ClN₃O₄计算值469；实测值470[M+H]⁺。

实施例27

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸盐酸盐

将4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯(制备例51)(218mg，0.446mmol)的乙醇(6ml)溶液在室温下搅拌，并加入氢氧化钠(2ml，4.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后将其用乙酸酸化至pH为5，并将混合物真空浓缩。将生成的残余物溶于EtOAc(～30mL)和水(～30mL)中，并分离各层，将水层用EtOAc(～20mL)再次萃取，并将合并的有机物通过相分离柱，并将溶剂真空减少。将残余物通过加入10滴2M HCl的乙醚溶液，随后用乙醚研磨来纯化，过滤固体，并在烧结玻璃漏斗上干燥，然后在真空下于60℃干燥，得到标题化合物(68mg，0.130mmol，29％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.51(1H，s)，8.40(1H，d)，7.97(1H，s)，7.93(1H，d)，7.56(1H，d)，7.47(1H，d)，4.99(1H，sept)，3.07-3.80(10H，m)，2.35(2H，t)，1.92-2.02(2H，m)，1.39(6H，d)；MS(ES)：C₂₆H₂₈N₄O₄计算值460；实测值461[M+H]⁺。

实施例28

4-(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸盐酸盐

将4-(7-{5-[4-[(1-甲基乙基)氧基]-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸乙酯(制备例52)(181mg，0.341mmol)的乙醇(6ml)溶液在室温下搅拌，并加入氢氧化钠(2ml，4.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟。将反应混合物用乙酸酸化至pH为5，并将混合物真空浓缩。将生成的残余物溶于乙酸乙酯(～30mL)和水(～30mL)中，分离各层，将水相用乙酸乙酯(～20mL)再次萃取，并将合并的有机物通过相分离柱，并将溶剂真空减少。将残余物通过加入10滴2M HCl的乙醚溶液，随后用乙醚研磨来纯化，过滤固体，并在烧结玻璃漏斗上干燥，得到标题化合物(119mg，0.21mmol，62％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.40(1H，d)，8.32(1H，s)，7.97(1H，s)，7.94(1H，d)，7.59(1H，d)，7.45(1H，d)，4.98(1H，sept)，3.09-3.82(10H，m)，2.35(2H，t)，1.90-2.01(2H，m)，1.36(6H，d)；MS(ES)：C₂₆H₂₈F₃N₃O₄计算值503；实测值504[M+H]⁺。

实施例29

4-(7-{5-[2-(三氟甲基)-4-联苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸盐酸盐

将4-(7-{5-[4-{(1E)-1-[(1Z)-1-丙烯-1-基]-1，3-丁二烯-1-基}-3-(三氟甲基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基)丁酸乙酯(制备例53)(277mg，0.504mmol)的乙醇(6ml)溶液在室温下搅拌，并加入氢氧化钠(2ml，4.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟，然后用乙酸酸化至pH为5，并将混合物真空浓缩。将生成的残余物溶于EtOAc(～30mL)和水(～30mL)中，并分离各层，将水层用EtOAc(～20mL)再次萃取，并将合并的有机物通过相分离柱，并将溶剂真空减少。将残余物通过加入10滴2M HCl的乙醚溶液，随后用乙醚研磨来纯化，过滤固体，并在烧结玻璃漏斗上干燥，并在真空下于60℃干燥过夜，得到标题化合物(120mg，0.20mmol，41％产率)。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.53(1H，s)，8.50(1H，d)，8.01(1H，s)，7.97(1H，d)，7.75(1H，d)，7.37-7.56(6H，m)，3.14-3.41(8H，m)，3.07(2H，br s)，2.34(2H，t)，1.87-1.99(2H，m).MS(ES)：C₂₉H₂₆F₄N₃O₃计算值521；实测值522[M+H]⁺。

实施例30

2-(甲氧基)-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

将7-{5-[3-氰基-4-(甲氧基)苯基]-1，2，4-二唑-3-基}-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例54)(280mg，0.627mmol)在4M盐酸的二烷溶液(5ml，20.00mmol)和1，4-二烷(5ml)中的溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物过滤，并用二烷(～5ml)洗涤，并将固体真空干燥，得到标题化合物(177mg，0.393mmol，62.7％产率)，为灰白色固体。δH(d₆DMSO，400MHz)：8.99-9.31(2H，m)，8.53(1H，s)，8.46(1H，d)，7.96(1H，s)，7.93(1H，d)，7.54(1H，d)，7.46(1H，d)，4.07(3H，s)，3.09-3.31(7H，m)；MS(ES)：C₂₀H₁₈N₄O₂计算值346；实测值347[M+H]⁺。

实施例31

9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐

将9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例66)(320mg，0.658mmol)溶于1，4-二烷(1mL)中，并用HCl(2ml，8.00mmol)的1，4-二烷溶液处理。将反应混合物在RT下放置1小时，蒸发，然后用乙醚研磨，得到标题化合物(180mg)，为白色固体。MS(ES)：C₂₀H₂₀³⁵ClN₃O₃计算值385；实测值386[M+H]⁺。

按照类似的方法制备下列化合物。

实施例32

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-9-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

按照类似于实施例31的方法，由制备例67的化合物制备。MS(ES)：C₂₁H₂₀N₄O₃计算值376；实测值377[M+H]⁺。

实施例33

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

将4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯(制备例68)(130mg，0.260mmol)的乙醇溶液用氢氧化钠(1ml中含10.4mg，0.260mmol)处理。将反应混合物在RT下静置1小时，然后蒸发。将生成的粗产物在EtOAc/水之间分配，用乙酸酸化，分离，并将有机物经硫酸镁干燥并蒸发。通过用乙醚研磨得到标题化合物(61mg)，为白色固体。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.36(6H，d)，1.69(2H，m)，2.23(2H，t)，2.43(2H，t)，3.05(2H，m)，3.86(2H，s)，4.07(2H，m)，4.88(1H，m)，7.20(1H，t)，7.43-7.49(2H，m)，7.78(1H，dd)，8.09(1H，dd)，8.17(1H，d)，12.10(1H，br.s)；MS(ES-)：C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₅计算值471；实测值470[M-H⁺].

实施例33另外的制备方法

4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

将4-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯(制备例68)(61.7g，123mmol)的乙醇(600ml)溶液用2M氢氧化钠(123ml，247mmol)处理，并将混合物在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，并将残余物溶于水(1升)中。将水溶液在冰/水中冷却，并用冰醋酸(28.3ml，494mmol)缓慢地处理。将生成的树胶状物质剧烈搅拌，直至得到可滤过的固体，然后将其过滤收集，并用更多的水(2x500mL)洗涤。在将填料(pad)抽干后，将该物质溶于二氯甲烷/甲醇的95∶5的混合物中，并干燥(硫酸钠)。蒸发除去溶剂，并将生成的固体用乙醚(200mL)研磨，过滤收集，用乙醚洗涤，并干燥，得到标题化合物，为无色固体(54g)。

MS(ES)C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₅计算值471；实测值472[M+H]⁺.

实施例34

4-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

按照类似于实施例33的方法，由制备例69的化合物制备。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.38(6H，d)，1.69(2H，m)，2.23(2H，t)，2.43(2H，t)，3.05(2H，m)，3.86(2H，s)，4.07(2H，m)，4.98(1H，m)，7.20(1H，t)，7.47(1H，dd)，7.54(1H，d)，7.77(1H，dd)，8.38(1H，dd)，8.49(1H，d)，12.10(1H，br.s)；MS(ES)：C₂₅H₂₆N₄O₅计算值462；实测值463[M+H]⁺。

实施例35

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈盐酸盐

将7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例76)(0.410g，0.860mmol)溶于1，4-二烷(1mL)中。加入HCl(1ml，4.00mmol)的二烷溶液(4M)，并于R.T.搅拌2小时。加入乙醚，过滤，并在真空下在室温于干燥箱中干燥，得到0.26g的白色固体。将50mg通过MDAP纯化，得到标题化合物(13mg)，为米色固体。δH(MeOD，400MHz)：1.44(6H，d)，3.63(2H，m)，4.33(2H，m)，4.52(2H，s)，4.92(1H，m)，7.30(1H，d)，7.43(1H，d)，8.15(1H，dd)，8.21(1H，d)，8.38(1H，dd)，8.45(1H，d)；MS(ES)：C₂₁H₂₀N₄O₃计算值376；实测值377[M+H]⁺。

实施例36

7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂盐酸盐

按照类似于实施例35的方法，由制备例77的化合物制备。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.35(6H，d)，3.51(3H，m)，4.31(2H，m)，4.82(2H，s)，4.85(1H，m)，7.23(1H，d)，7.45(1H，d)，7.97-8.12(2H，m)，8.18(2H，m)；MS(ES)：C₂₀H₂₀³⁵ClN₃O₃计算值385；实测值386[M+H]⁺。

实施例37

3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

将3-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯(制备例78)(0.092g，0.193mmol)溶于乙醇(2mL)中。然后加入2N NaOH(1ml，2.000mmol)，并将反应混合物于RT下静置2小时。将乙醇蒸发除去，并将生成的残余物溶于EtOAc和水中，用乙酸酸化，并分离各层。从水相中分离出固体，并过滤出固体，于50℃真空干燥过夜，得到标题化合物(8mg)，为白色固体。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.37(6H，d)，2.38(2H，t)，2.67(2H，m)，3.03(2H，m)，3.89(2H，s)，4.07(2H，m)，4.97(1H，m)，7.14(1H，d)，7.54(1H，d)，7.89(1H，dd)，7.98(1H，d)，8.39(1H，dd)，8.51(1H，d)；MS(ES)：C₂₄H₂₄N₄O₅计算值448；实测值449[M+H]⁺。

实施例38

3-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

按照类似于实施例37的方法，由制备例79的化合物制备。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.36(6H，d)，2.43(2H，t)，2.70(2H，m)，3.04(2H，m)，3.91(2H，s)，4.07(2H，m)，4.87(1H，m)，7.14(1H，d)，7.43(1H，d)，7.89(1H，dd)，7.99(1H，d)，8.09(1H，dd)，8.18(1H，d)；MS(ES)：C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₅计算值457；实测值458[M+H]⁺。

实施例39

4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

将4-[7-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸乙酯(制备例80)(0.084g，0.171mmol)溶于乙醇(2mL)中。然后加入2N NaOH(1ml，2.000mmol)，并将反应于RT下静置3小时。将乙醇蒸发除去，并将生成的残余物溶于EtOAc和水中，用乙酸酸化，并分离各相。将有机相干燥(MgSO₄)，蒸发，并用乙醚研磨。于50℃真空干燥过夜，得到标题化合物(22mg)，为白色固体。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.37(6H，d)，1.66(2H，t)，2.22(2H，t)，2.45(2H，m)，3.01(2H，m)，3.82(2H，s)，4.07(2H，m)，4.95(1H，m)，7.14(1H，d)，7.54(1H，d)，7.89(1H，dd)，7.96(1H，d)，8.38(1H，dd)，8.50(1H，d)；MS(ES)：C₂₅H₂₆N₄O₅计算值462；实测值463[M+H]⁺。

实施例40

4-[7-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

使用实施例37中所述的方法，通过水解制备例81的酯来制备。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.36(6H，d)，1.68(2H，t)，2.23(2H，t)，2.45(2H，m)，3.01(2H，m)，3.87(2H，s)，4.07(2H，m)，4.87(1H，m)，7.13(1H，d)，7.43(1H，d)，7.89(1H，dd)，7.95(1H，d)，8.09(1H，dd)，8.52(1H，d)；MS(ES)：C₂₄H₂₆³⁵ClN₃O₅计算值471；实测值472[M+H]⁺。

实施例41

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1，4-苯并氧氮杂-8-基)-1，2，4-二唑-5-基]苄腈

使用类似于实施例35的方法，由制备例82的化合物制备。MS(ES)：C₂₁H₂₀N₄O₃计算值376；实测值377[M+H]⁺。

实施例42

4-[8-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丁酸

使用实施例15中所述的方法，由制备例83的化合物制备。δH(d₆DMSO，400MHz)：1.38(6H，d)，1.69(2H，m)，2.21(2H，t)，2.42(2H，t)，3.02(2H，m)，3.84(2H，s)，4.06(2H，m)，4.97(1H，m)，7.44(1H，d)，7.54(1H，d)，7.61(1H，d)，7.71(1H，dd)，8.39(1H，dd)，8.50(1H，d)，12.10(1H，br.s)；MS(ES)：C₂₅H₂₆N₄O₅计算值462；实测值463[M+H]⁺。

实施例43

5-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]戊酸

将2M氢氧化钠(0.347mL，0.694mmol)加入到搅拌下的5-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]戊酸乙酯(制备例93)(70mg，0.139mmol)的乙醇(5mL)溶液中，并将该混合物于60℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温，并将溶剂蒸发。将残余物用水稀释，用2M盐酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗涤，干燥并蒸发，得到产物，为灰白色固体(20mg)。

δH(400MHz，CDCl₃).1.47(6h，d)，1.59-1.70(4H，m)，2.3(2H，t)，2.61(2H，t)，3.25-3.29(2H，m)，4.05(2H，s)，4.24-4.28(2H，m)，4.79(1H，m)，7.12(1H，d)，7.20(1H，dd)，7.39(1H，d)，7.95(1H，d)，8.30(1H，dd)，8.43(1H，s).

MS(ES)C₂₆H₂₈N₄O₅计算值476实测值477[M+H]⁺。

实施例44

[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸

将2M氢氧化钠(0.54ml，1.08mmol)加入到搅拌下的[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]乙酸乙酯(制备例86)(100mg，0.216mmol)的乙醇(10ml)溶液中，并将该混合物在室温下搅拌2小时。蒸发溶剂，随后用水稀释，用2M盐酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将有机萃取物用水洗涤，干燥并蒸发，得到产物，为灰白色固体(30mg)。

δH(400MHz，D₆-DMSO).1.39(6H，d)，3.88-4.02(2H，m)，4.09-4.13(2H，m)，4.98(1H，m)，7.43(1H，d)，7.56(1H，d)，7.82(1H，d)，8.39(1H，d)，8.50(1H，s)。缺少的峰被水和残余的溶剂遮蔽。

MS(ES)C₂₃H₂₂N₄O₅计算值434实测值435[M+H]⁺。

实施例45

3-[9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

将3-[9-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯(制备例91)(28mg，0.058mmol)溶于乙醇(5mL)中。加入2M氢氧化钠(0.144ml，0.288mmol)，并将反应混合物于60℃搅拌4小时。蒸发溶剂，并将反应混合物用水稀释，用2M盐酸中和，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗涤，干燥并蒸发，得到白色固体的产物(26mg)。

δH(400MHz，CDCl₃).1.46(6H，d)，2.54(2H，br t)，2.91(2H，br t)，3.36(2H，m)，4.12(2H，s)，4.28(2H，br m)，5.48(1H，m)，7.21-7.29(1H，m)，7.39(1H，d)，8.00(1H，d)，8.38(1H，s)，8.88(1H，s).

MS(ES)C₂₂H₂₃³⁵ClN₄O₅计算值458实测值459[M+H]⁺。

实施例46

3-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

将3-[9-(5-{3-氰基-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯(制备例92)(40mg，0.084mmol)溶于乙醇(5mL)中。加入2M氢氧化钠(0.210ml，0.420mmol)，并将反应混合物于60℃搅拌4小时。蒸发溶剂，然后将反应混合物用水稀释，用2M盐酸中和，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗涤，干燥并蒸发，得到产物，为无色固体(16mg)。

δH(400MHz，CDCl₃).1.47(6H，d)，2.56(2H，br t)，2.92(2H，br t)，3.34-3.39(2H，m)，4.13(2H，br s)，4.25-4.31(2H，m)，4.79(1H，m)，7.13(1H，d)，7.20-7.28(1H，m)，7.40(1H，d)，8.00(1H，d)，8.33(1H，d)，8.42(1H，s).

MS(ES)C₂₂H₂₄N₄O₅计算值448实测值449[M+H]⁺。

实施例47

3-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸

将3-[9-(5-{3-氯-4-[(1-甲基乙基)氧基]苯基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3-二氢-1，4-苯并氧氮杂-4(5H)-基]丙酸乙酯(制备例88)(60mg，0.123mmol)溶于乙醇(5mL)中。加入2M氢氧化钠(0.309ml，0.617mmol)，并将反应混合物于60℃搅拌4小时。蒸发溶剂，然后将反应混合物用水稀释，并用2M盐酸中和，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用水洗涤，干燥并蒸发，得到产物，为无色固体(27mg)。

δH(400MHz，D₆-DMSO).1.36(6H，d)，2.42(2H，br t)，2.65-2.70(2H，m)，3.90(2H，s)，4.04-4.09(2H，m)，4.88(1H，m)，7.21(1H，dd)，7.44(1H，d)，7.51(1H，d)，7，79(1H，d)，8.09(1H，d)，8.17(1H，s).

MS(ES)C₂₃H₂₄³⁵ClN₃O₅计算值457实测值458[M+H]⁺。

实施例48

2-[(1-甲基乙基)氧基]-5-[3-(2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂-7-基)-1，2，4-二唑-5-基]-3-吡啶甲腈甲酸盐

将7-(5-{5-氰基-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例95)(224mg，0.471mmol)的二氯甲烷(1ml)溶液用4M HCl的二烷溶液(5ml，20.0mmol)处理。将无色溶液在室温下放置过周末，得到无色沉淀物。将反应混合物浓缩，用乙醚研磨并干燥。将粗产物用DMSO∶MeOH(1∶1；1.9ml)处理，将混合物过滤，并将滤液通过MDAP纯化，得到甲酸盐的标题化合物(55mgs)，δH(400MHz，d₆DMSO)，1.41(6H，d)，3.07-3.20(4H，m)，5.51(1H，m)，7.42(1H，d)，7.88(1H dd)，7.91(1H，d)，8.24(1H，s)，8.98(1H，d)和9.20(1H，d)；MS(ES)C₂₁H₂₁N₅O₂计算值375；实测值376[M+H]⁺。

实施例49

7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-2，3，4，5-四氢-1H-3-苯并氮杂盐酸盐

在室温下，将7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-甲酸1，1-二甲基乙基酯(制备例96)(305mg，0.629mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液用三氟乙酸(1ml，12.98mmol)处理，并将混合物搅拌1小时。将反应混合物浓缩，并将残余物在2M NaOH和乙酸乙酯之间分配。将乙酸乙酯萃取液用盐水洗涤，干燥并浓缩成无色树胶状物，将其缓慢结晶，得到标题化合物游离碱(229mgs)。

将一部分游离碱(37mg)溶于甲醇(0.5mL)中，并用过量HCl的甲醇溶液(1.25M；0.4mL)处理。将该溶液蒸发，得到标题化合物，为无色固体(42mgs)。

δH(400MHz，d₆DMSO)，1.39(6H，d)，3.21(8H，d)，5.45(1H，m)，7.45(1H，d)，7.91(1H，dd)，7.95(1H，d)，8.55(1H，d)，8.92(1H，d)和9.33(2H，br s)；MS(ES)C₂₀H₂₁³⁵ClN₄O₂计算值384；实测值385[M+H]⁺。

实施例50

4-[7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸

在室温下，将4-[7-(5-{5-氯-6-[(1-甲基乙基)氧基]-3-吡啶基}-1，2，4-二唑-3-基)-1，2，4，5-四氢-3H-3-苯并氮杂-3-基]丁酸乙酯(制备例97)(185mg，0.371mmol)在乙醇(3mL)中的悬浮液用2M氢氧化钠(0.556ml，1.11mmol)处理过夜，得到无色沉淀物。加入另外的1-2mls的乙醇，并将温度升至50℃以使反应完全。将乙酸(0.07ml，1.22mmol)加入到该溶液中，并将混合物浓缩。将生成的油状残余物用水(约3ml)处理，然后在室温下搅拌1-2小时，并过滤。将该固体用水洗涤，然后溶于甲醇中，并将溶剂蒸发。将生成的固体于约60℃真空干燥过夜，得到标题化合物(153mgs)。

δH(400MHz，d₆DMSO)，1.39(6H，d)，1.69(2H，m)2.26(2H，t)，2.47(2H，t)，2.61(4H，br s)，2.95(4H，br m)，5.45(1H，m)，7.34(1H，d)，7.80-7.85(2H，m)，8.53(1H，d)和8.90(1H，d)；MS(ES)C₂₄H₂₇³⁵ClN₄O₄计算值470；实测值471[M+H]⁺。

S1P1 GTPγS试验的膜的制备

所有膜制备的步骤都在4℃下进行。稳定表达人S1P1受体的大鼠肝癌细胞或稳定表达人S1P3受体的大鼠嗜碱性白血病细胞(RBL)生长至80％汇合，然后收集至10ml的磷酸盐缓冲液(PBS)中，并在1200rpm下离心5分钟。除去上清液后，将沉淀物(pellet)重悬浮，并在玻璃韦林氏(Waring)搅切器内在200ml的缓冲液(50mM HEPES，1mM亮肽酶素，25μg/ml杆菌肽，1mM EDTA，1mM PMSF，2μM胃蛋白酶抑制剂A)中通过两个15秒的破裂(burst)将细胞均质化。在第一次破裂后，将搅切器浸在冰中5分钟，且在最后一次破裂后，将搅切器浸在冰中10～40分钟以消散泡沫。然后将该物质在500g下旋转20分钟，并将上清液在48,000g下旋转36分钟。将沉淀物重悬于与上述相同，但不含有PMSF和胃蛋白酶抑制剂A的缓冲液中。然后将该物质强制通过0.6mm针头，制成所需的体积，(通常为初始细胞沉淀物体积的4倍)，等分试样，并在-80℃下冷冻保藏。

S1P1 GTPγS试验的另一种膜的制备

所有步骤都在4℃下进行。在玻璃韦林氏搅切器内在200ml的缓冲液(50mM HEPES，1mM亮肽酶素，25μg/ml杆菌肽，1mM EDTA，1mM PMSF，2μM胃蛋白酶抑制剂A)中通过两个15秒的破裂(burst)将细胞均质化。在第一次破裂后将搅切器浸入冰中5分钟，并在最终的破裂后，将搅切器浸在冰中10～40分钟以消散泡沫。然后将该物质在500g下旋转20分钟，将上清液在48000g下旋转36分钟。将沉淀物重悬于与上述一样但是不含PMSF和胃蛋白酶抑制剂A的缓冲液中。然后将该物质强制通过0.6mm的针头，得到所需体积(通常为初始细胞沉淀物体积的4倍)，等分试样并于-80℃冷冻储存。

S1P1 GTPγS试验

将人S1P1大鼠肝癌膜(1.5μg/孔)粘附于试验缓冲液(HEPES 20mM，MgCl₂ 10mM，NaCl 100mM，使用KOH 5M调节pH为7.4，还加入GDP 10μMFAC(最终试验浓度)和皂苷90μg/ml FAC)中的麦胚凝集素(WGA)涂覆的闪烁迫近测定(SPA)珠上(0.125mg/孔)。

于冰上预偶联30分钟后，将珠与膜悬浮液分加至白色Greiner聚丙烯LV384孔板中(5μl/孔)，其中含有0.1μl的化合物。然后将用试验缓冲液制成的5μg/孔的[³⁵S]-GTPγS(0.5nM最终放射性配体浓度)加至激动剂板上。然后在1000rpm下离心最终的试验混合物(cocktail)(10.1μl)5分钟，立即在Viewlux读出器上读数。

将所有的测试化合物以10mM的浓度溶于DMSO中，并使用四倍(1 in 4)稀释步骤用100％DMSO制备，得到11点的剂量反应曲线。将稀释液转移至测定板上，确保DMSO浓度对于所有试验在整个板上是恒定的。

所有数据都对各板上16个高和16个低对照孔的平均值标准化。然后应用四参数曲线拟合。

S1P1 GTPγS试验的另一方法

将表达S₁P₁的RH7777膜(1.5μg/孔)通过23G针头来均质化。然后将它们粘附于试验缓冲液(HEPES 20mM，MgCl₂ 10mM，NaCl 100mM，使用KOH 5M调节pH为7.4)中的WGA-涂覆的SPA珠上(0.125mg/孔)。还加入GDP 10μM FAC和皂苷90μg/ml FAC。

于冰上预偶联30分钟后，将珠与膜悬浮液分加至白色Greiner聚丙烯LV 384孔板中(5μl/孔)，其中含有0.1μl的化合物。然后将用试验缓冲液制成的5μg/孔的[³⁵S]-GTPγS(对于S₁P₁，最终放射性配体浓度为0.5nM；对于S₁P₃，最终放射性配体浓度为0.3nM)加至板上。然后将最终的试验混合物(cocktail)(10.1μl)密封，在离心机上旋转，然后在Viewlux仪器上直接读数。

本发明的实施例化合物的pEC50＞5。许多化合物的pEC50＞7。实施例6、7、8、12、18、19、21-29、31-35、37、39、41、43、47、48和50的化合物的pEC50＞7。实施例7、21、23、24和26-28的化合物的pEC50≥8。

S1P3 GTPγS试验

将来自大鼠嗜碱性白血病细胞(RBL-2H3)的S1P3膜(1.5μg/孔)粘附于试验缓冲液(HEPES 20mM，MgCl₂ 3mM，NaCl 100mM，使用KOH 5M调节pH为7.4，还加入GDP 10μM FAC和皂苷90μg/ml FAC)中的WGA-涂覆的SPA珠上(0.125mg/孔)。

于冰上预偶联30分钟后，将珠与膜悬浮液分加至白色Greiner聚丙烯LV384孔板中(5μl/孔)，其中含有0.1μl的化合物。然后将用试验缓冲液制成的5μg/孔的[³⁵S]-GTPγS(0.5nM的最终放射性配体浓度)加至激动剂板上。在1000rpm下离心最终的试验混合物(10.1μl)5分钟，然后立即在Viewlux读出器上读数。

将所有的测试化合物以10mM的浓度溶于DMSO中，并使用四倍(1 in 4)稀释步骤在100％DMSO中制备，得到11点的剂量反应曲线。将稀释液转移至测定板上，确保DMSO浓度对于所有试验在整个板上是恒定的。

所有数据都对各板上16个高和16个低对照孔的平均值标准化。然后应用四参数曲线拟合。

S1P3 GTPγS试验的另一方法

将表达S₁P₃的RBL膜(1.5μg/孔)通过23G针头来均质化。然后将它们粘附于试验缓冲液(HEPES 20mM，MgCl₂ 10mM，NaCl 100mM，使用KOH5M调节pH为7.4)中的WGA-涂覆的SPA珠上(0.125mg/孔)。还加入GDP 10μM FAC和皂苷90μg/ml FAC

于冰上预偶联30分钟后，将珠与膜悬浮液分加至白色Greiner聚丙烯LV384孔板中(5μl/孔)，其中含有0.1μl的化合物。然后将用试验缓冲液制成的5μg/孔的[³⁵S]-GTPγS(对于S₁P₁，最终放射性配体浓度为0.5nM；对于S₁P₃，最终放射性配体浓度为0.3nM)加至板上。然后将最终的试验混合物(10.1μl)密封，在离心机上旋转，然后在Viewlux仪器上直接读数。

实施例化合物的pEC50＜6，很多化合物的pEC50＜5。实施例1-5、8-14、16-22、26、30-34、36、37、39-41、43-50的化合物的pEC50≤5。