一种具有抑菌活性作用的假升麻根提取物

摘要

本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及以假升麻(Aruncus sylvesterKostel.ex Maxim.)根为原料制备的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物。本发明产品对金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌及食品腐败菌具有良好的抑菌效果，对5种供试菌的抑制效果依次为：金黄色葡萄球菌＞沙门氏菌＞大肠杆菌＞链球菌＞枯草芽孢杆菌。本发明产品可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

说明书

技术领域

本发明所属医药产品研究开发技术领域。本发明涉及以假升麻(Aruncus sylvesterKostel.ex Maxim.)根为原料制备具有抑菌活性作用的假升麻根提取物。

背景技术

本发明的假升麻根提取物对金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌及食品腐败菌具有良好的抑菌效果，这种抑菌作用具有积极的应用价值，这对于扩大假升麻根药源，并对其进行合理开发利用具有重要意义。

金黄色葡萄球菌属革兰氏阳性菌，是葡萄球菌中致病力最强的一种菌，广泛分布于自然界，常可引起皮肤、组织及器官的化脓性炎症，它产生的毒素进入人体肠道后可引起食物中毒。国内外有不少关于金黄色葡萄球菌引起人类食物中毒的报道。假升麻提取物对金黄色葡萄球菌的抑制效果较好，最小抑菌浓度为3.125mg/ml。有资料显示鱼腥草中抑菌的有效成份为鱼腥草素，具有抗菌、抗病毒、利尿、抗炎镇痛等作用，可用于呼吸道感染等疾病，其对金黄色葡萄球菌的MIC为31.3mg/ml，对比可知假升麻根对金黄色葡萄球菌的抑菌效果更强，可见其在针对于金黄色葡萄球菌的抗菌剂市场具有广阔的开发前景。假升麻根提取物经高温121℃处理后，仍具有较高的抑菌活性，说明其具有良好的耐热性；经紫外照射60min、pH2-7仍具有稳定的抑菌活性，可见其对高温、压力、紫外照射和酸性条件下都有良好的稳定性，可将其提取物加入到食品中，提高加工食品的稳定性。

发明内容

本发明涉及以假升麻(Aruncus sylvester Kostel.ex Maxim.)根为原料制备的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物。

1、本发明产品对金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌及食品腐败菌具有良好的抑菌效果，对5种供试菌的抑制效果依次为：金黄色葡萄球菌＞沙门氏菌＞大肠杆菌＞链球菌＞枯草芽孢杆菌。本发明产品可开发为天然抗菌剂应用于食品、药品等行业，制备出具有抑菌作用的各种形式的产品。

2.一种以假升麻根为原料制备的具有抑菌活性作用的假升麻根提取物制剂，其特征在于制备该提取物包括以下过程：

(1)取假升麻根，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8-10倍量75％-85％的乙醇室温下浸提4-6h后超声1-1.5h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；

(2)假升麻根经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量75％-85％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；

(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得假升麻根提取物。

3.根据本发明所述的制备提取物的原料为假升麻(Aruncus sylvester Kostel.ex Maxim.)根。

4.根据本发明，假升麻根提取物对金黄色葡萄球菌＞沙门氏菌＞大肠杆菌＞链球菌＞枯草芽孢杆菌均有不同程度的抑制作用。

5.根据本发明所述的假升麻根提取物，其特征在于该提取物可作为天然抗菌剂用于食品、药品等行业，代替有毒副作用的合成抗菌剂。

根据本发明，本发明中的“％”是重量百分比。

具体实施方式

本发明所述的制备假升麻根提取物包括以下实施例，下面的实施例可进一步说明本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1：

(1)取假升麻根，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用10倍量85％的乙醇室温下浸提6h后超声1.5h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；

(2)假升麻根经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量85％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；

(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得假升麻根提取物，收率为25％。

实施例2：

(1)取假升麻根，挑去杂物，水洗，烘干或晾干，粉碎，用8倍量75％％的乙醇室温下浸提4h后超声1h，温度为30℃功率为80W，然后用绸布与滤纸分别过滤一次，得到滤液；

(2)假升麻根经(1)处理后的滤渣再分别用6倍量与4倍量75％的乙醇重复(1)步骤各一次，分别得到滤液，合并三次滤液；

(3)将上述(2)滤液回收乙醇，得假升麻根提取物，收率为22％。

药理试验例：假升麻根提取物的抑菌作用

1材料、试剂

1.1材料与试剂

假升麻根提取物、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、分析用水为超纯水。

1.2供试菌种

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、沙门氏菌(Salmonella enterica)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、链球菌(Streptococcus)均由吉林农业大学预防兽医学实验室提供。

2实验方法

2.1试验样品：假升麻根提取物。

2.2假升麻根提取物抑菌试验

2.2.1营养琼脂培养基的制备：牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、NaCl5.0g、蒸馏水1000ml、琼脂20.0g、pH7.0

2.2.2滤纸片法测定最小抑菌浓度(MIC)：将2.1提取物用二倍稀释法进行稀释，培养皿上分别接种金黄葡萄球菌，大肠杆菌，沙门氏菌，巴氏菌，链球菌菌悬液各0.2ml(菌浓度10⁶CFU)，涂布均匀，然后将直径5mm的灭菌滤纸片在提取液中浸泡2h后贴在培养基上，每皿3片等距放置，每菌三份平行，另外，每个菌种用灭菌的滤纸片做一份空白对照及链霉素(100ug/ml)进行阳性对照，置培养箱中37℃下培养24h。用十字交叉法测量并记录抑菌圈的大小，结果取三次重复实验的平均值，得不同浓度提取物对供试菌的抑菌效果，抑菌圈不明显所对应的提取物浓度即为最低抑菌浓度。

2.2.3热和压力稳定性的测定：用试管分装2ml 400mg/ml的提取液，分别置于温度40、60、80、100℃水浴和121℃湿热处理30min，以金黄色葡萄球菌和巴氏菌为指示菌采用滤纸片法测定其抑菌效果。

2.2.4紫外稳定性测定：将2ml 400mg/ml提取液分装于9cm培养皿中，置紫外灯365nm下分别照射5、15、30、45、60min，以金黄色葡萄球菌和巴氏菌为指示菌采用滤纸片法测定其抑菌效果。

2.2.5酸碱稳定性测定：用0.1mol/L稀盐酸和稀氨水溶液将400mg/ml假升麻根提取液的pH值分别调至2、4、6、7、8、10、12，以金黄色葡萄球菌和巴氏菌为指示菌采用滤纸片法测定其抑菌效果。

3结果与分析

3.1最小抑菌浓度(MIC)的测定：抑菌作用结果如表1所示。

表1假升麻根提取液对5种细菌的抑菌作用

Table 1 The antibacterial activities of Syringea Reticulata extract to five bacteria

注：-无抑菌圈出现；+-抑菌圈不明显；+抑菌圈直径为6-7mm；++抑菌圈直径为8-10mm；+++抑菌圈直径为11mm以上.

由表1可知：假升麻根提取物对5种供试菌均有不同程度的抑制作用，其对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3.125mg/ml，对沙门氏菌的最小抑菌浓度为6.25mg/ml，对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和链球菌的最小抑菌浓度均为50mg/ml。

3.2热处理和压力对假升麻根提取液抑菌活性的影响：测定不同温度下假升麻根提取液的抑菌活性结果如图1。由图1可知：假升麻根提取物具有良好的热稳定性，即使经高温121℃处理后，仍具有较高的抑菌活性。

3.3紫外光对假升麻根提取液抑菌活性的影响：测定不同紫外光照时间下假升麻根提取液的抑菌活性结果如图2。由图2可知：假升麻根提取物在紫外光照射的条件下，抑菌活性基本稳定，在紫外光照射60min时仍有一定的抑制效果。

3.4不同pH对假升麻根提取液抑菌活性的影响：测定不同pH下假升麻根提取液的抑菌活性结果如图3。

由图3可知：假升麻根提取物稳定，pH8时其抑菌效果最好。

图1是热处理和压力对假升麻根提取液抑菌活性的影响图；

图2是紫外光对假升麻根提取液抑菌活性的影响图；

图3是pH值对假升麻根提取物抑菌活性的影响图。