一种体外定向协同共进化改造L-苯丙氨酸基因工程菌的方法

摘要

本发明一种体外定向协同共进化改造L-苯丙氨酸基因工程菌的方法，将本室构建的一株L-苯丙氨酸基因工程菌上的aroG和pheA基因当做一个整体，采用易错PCR和DNA改组这两种技术相结合的方法进行体外定向协同共进化改造，筛选获得一株L-苯丙氨酸产量提高的114％的突变菌株；本发明通过改造aroG和pheA偶合串联的基因，将L-苯丙氨酸代谢途径中关键酶基因aroG和pheA当作一个整体同时进行定向改造，获取新的代谢平衡，使之表达的酶既有高效的催化活性又能抵抗L-苯丙氨酸反馈抑制，从而筛选获得改造后的高产L-苯丙氨酸新基因工程菌，该方法能为改造任何一种提高氨基酸基因工程菌产酸率提供范例。