以细胞内连接为基础的定向基因重组技术

摘要

本发明涉及生物技术领域一种新的基因重组技术。在目的基因两侧分别引入2～12个碱基的序列特征不同的配对序列，配对序列和载体两个连接点末端的配对序列分别同源。利用T4DNA聚合酶在特定底物缺失时产生的选择性核酸外切酶活性消化目的基因和载体，产生互补序列并互补配对。配对产物直接转入宿主细胞，通过宿主细胞内部的相关酶系进行连接。该技术具有周期短，费用低，操作简单，成功率高，对目的基因内部特征无要求等优点，适合实验室常规基因表达研究和大规模的基因表达操作。