利用RNA定点重组技术操作PEDV基因组

摘要

猪流行性腹泻病毒(PEDV)给中国和亚洲国家的养猪业造成严重经济损失.感染导致致死性的急性腹泻.直至文章发表前,国际上仍然没有针对PEDV的基因操作系统,影响了该病原的科学研究.本研究中,建立起基于RNA定点重组的PEDV反向遗传操作系统.利用该系统可以对PEDV基因组3'端的结构蛋白或ORF3蛋白基因操作或修饰.利用该系统,发现整个删除ORF3对PEDV在细胞内的复制没有影响.另外,还在病毒基因组的两处位置插入外源基因(GFP及海肾荧光素酶基因)或将外源基因替换ORF3基因,这些外源基因都能获得表达;携带这些外源基因的PEDV可用于检测病毒中和抗体.该系统可用于PEDV结构蛋白和附属ORF3蛋白的功能研究,也可用于PEDV的疫苗设计和研发.