牛分支杆菌免疫原性分泌型蛋白的筛选鉴定方法

摘要

本发明涉及一种牛分支杆菌免疫原性分泌型蛋白的筛选鉴定方法，首先对基因库中牛分支杆菌基因组的蛋白编码基因进行序列分析，将分泌性蛋白和膜蛋白从其他蛋白质组中区分出来，再从已筛选出的蛋白中寻找疏水跨膜螺旋，凡含疏水跨膜螺旋的认定为膜蛋白，以此区分分泌性蛋白和膜蛋白。再根据牛分支杆菌与人结核杆菌具有较高同源性的原理，将与禽分支杆菌同源性小于36％的牛分支杆菌蛋白筛选出来，作为候选蛋白，再对候选的蛋白基因进行PCR克隆、构建表达载体及对表达产物进行免疫原性测定，得到具有免疫原性的牛分支杆菌分泌型蛋白。本发明方法筛选得到具有免疫原性分子的几率大为提高，可为防治我国牛结核病提供新的候选疫苗分子。