重组结核分支杆菌16000蛋白抗原(rPA16)的免疫原性研究

摘要

目的:研究结核分枝杆菌重组16000蛋白(rPA16)诱发家兔产生抗体的能力并评价其血清学诊断的价值.方法:家兔按注射的抗原及佐剂的不同分组,皮下多点注射分别进行免疫.6次免疫后采血,双向琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)跟踪兔血清抗体效价的时间效应并检测兔血清与所试各类分支杆菌PPD有无交叉反应;同时检测rPA16与各分支杆菌PPD的免疫羊血清的反应,并用rPA16抗原检测人血清标本,分析该抗原的临床检测的敏感性和特异性.结果:兔血清抗体效价结果显示:5个月后,加佐剂的抗原组的兔免疫血清仍能检测到抗体,不加佐剂组2个月后血清抗体检测即为阴性.ELISA检测兔免疫血清比双向琼脂扩散方法要更敏感,rPA16抗原加佐剂引起的兔血清抗体滴度最高可达1∶6400,不加佐剂组的血清抗体滴度仅为1∶400.ELISA法分析抗rPA16的兔血清的特异性表明其特异性较好,仅与牛、人型结核分支杆菌的PPD呈阳性反应,与其他所试分支杆菌PPD反应均为阴性.同时又分析了rPA16抗原的特异性,与人型PPD相比,该抗原只与所试各类分支杆菌、BCG、牛分支杆菌免疫的血清呈阳性反应,而人型PPD则基本上与结核分支杆菌免疫的血清均呈阳性反应.ELISA检测血清标本结果:肺结核病组中rPA16和PPD检测敏感性分别为64.8%和75.2%;健康组、卡介苗接种阳转健康组、rPA16和PPD检测特异性分别为96.2%、88.5%和94.3%、66.7%.结论:rPA16具有较强的免疫原性和一定的特异性,可能成为结核病血清学诊断试剂之一.