盐酸头孢吡肟原料及其制剂中N－甲基吡咯烷的含量的测定方法

摘要

本发明涉及盐酸头孢吡肟原料及其制剂中N－甲基吡咯烷的含量的测定方法，用于盐酸头孢吡肟原料及其制剂的质量评价，它公开了以羧型阳离子柱为分析柱，以电导检测器进行检测，通过流动相的配制，供试品溶液及对照品溶液的制取，再按测定法，取供试品溶液以及对照品溶液分别注入液相色谱仪，分别记录色谱图，按外标法计算出供试品中N－甲基吡咯烷含量的一种液相色谱法。本发明色谱系统易于平衡，样品测定时间短，保留时间重复性好，基线平稳，柱耐用，N－甲基吡咯烷的色谱峰的质量好，重复性好，测定方法准确，方便，可靠。

说明书

技术领域

本发明涉及盐酸头孢吡肟原料及其制剂的质量检测定方法。

背景技术

N-甲基吡咯烷既是盐酸头孢吡肟合成过程原料又是其降解产物。目前，中国药典2005版暂时未收载头孢吡肟及其制剂。其它品种也暂无N-甲基吡咯烷的测定。国外药典目前只有USP.26，JPXIV收载，均以键合磺酸基的硅胶柱为分析柱的高效液相色谱法，使用该方法测定时，色谱系统很难平衡且测定时间长(检测一个样品约两小时)，保留时间重现性差，基线漂移明显，柱寿命短。中国新药杂志2004年第13卷第8期中“盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷测定方法的比较“中报导”受主药盐酸头孢的影响，供试品溶液中N-甲基吡咯烷峰峰型差，保留时间漂移较大，与对照品溶液中N-甲基吡咯烷峰的保留时间相差常超过10％以上”，“费时，一次进样需2h”，而国内有文献资料报导用气相色谱法测定其含量，但由于N-甲基吡咯烷既是合成的原料又是头孢吡肟的降解产物，且盐酸头孢吡肟为酸性物质，N-甲基吡咯烷为碱性物质，两者共存时部分N-甲基吡咯烷被中和成盐，成盐的N-甲基吡咯烷无法直接气化等特性，使采用气相色谱法测定盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷变得复杂。若采用直接进样，气化时的高温会使盐酸头孢吡肟降解，而成盐的N-甲基吡咯烷不能气化，从而影响测定结果；若采用有机溶剂萃取，一方面样品不溶解会包裹N-甲基吡咯烷，另一方面盐酸头孢吡肟是酸性，在酸性条件下成盐的N-甲基吡咯烷萃取不完全，因此，有机溶剂萃取法也不能准确测定盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷的含量。目前采用气相色谱法并不能准确测得盐酸头孢吡肟中微量N-甲基吡咯烷杂质的含量。

发明内容

本发明的目的是提供一种盐酸头孢吡肟原料及其制剂中N-甲基吡咯烷的含量的测定方法，它是提供一种以羧酸型阳离子柱为分析柱，以电导检测器进行检测的液相色谱法测定盐酸头孢吡肟原料与制剂中N-甲基吡咯烷的含量的方法。

本发明目的可以通过如下措施来实现：

盐酸头孢吡肟原料及其制剂中N-甲基吡咯烷的含量的测定方法，本发明是以羧酸型阳离子柱为分析柱，以电导检测器进行检测的一种液相色谱法：

流动相的配制：0.001mol/L至0.05mol/L的硝酸溶液、0.001mol/L至0.005mol/L硫酸溶液或者是0.01mol/L至0.1mol/L甲基磺酸，配合乙腈、甲醇或者是1％至10％丙酮，其酸与有机溶剂比值是90至100∶10至0；

供试品溶液的制备：取盐酸头孢吡肟原料或者是制剂适量，加稀释剂稀释至每1ml中含1mg至10mg的溶液；

对照品溶液的制备：取N-甲基吡咯烷对照品，加稀释剂稀释至每1ml中含0.1mg至1mg的溶液；

测定法：取供试品溶液10至30ul注入液相色谱仪，记录色谱图，另取对照品溶液10至30ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算出供试品中N-甲基吡咯烷的含量。

以上所述羧酸型阳离子柱为键合羧酸基的硅胶柱，或者是以填料为乙基乙烯基苯与55％的二乙烯基苯交联的羧酸型阳离子柱，或者丙烯酸型羧酸阳离子柱。

本发明所指羧酸型阳离子柱为键合羧酸基的硅胶柱。

以上本发明所述羧酸型阳离子柱的柱温是10℃～50℃。

本发明所述的羧酸型阳离子柱的柱温是35℃。

本发明所述的常选用的流动相：0.01mol硝酸溶液-乙腈，其比值是99∶1。

以上本发明所述的稀释剂是流动相、水、0.001～0.05mol/L硝酸溶液、0.001～0.005mol/L硫酸溶液或者是0.01～0.1mol/L甲基磺酸。

本发明所述的稀释剂是0.01mol硝酸溶液。

以上本发明所述的供试品溶液是每1ml中含头孢吡肟5mg。

以上本发明所述的对照品溶液每1ml中含N-甲基吡咯烷0.5mg。

以上本发明所述的测定法中，取供试品溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，另取对照品溶液20ul注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算出供试品中N-甲基吡咯烷的含量。

本发明相比现有技术具有如下优点：用以羧酸型阳离子柱为分析柱的填充剂的液相色谱法测定N-甲基吡咯烷的含量，在国内外为首创，色谱系统易于平衡，样品测定时间短(检测一个样品约30分钟)，保留时间重复性好，基线平稳，柱耐用，N-甲基吡咯烷的色谱峰的质量好、重复性好，测定方法准确、方便、可靠。

附图说明

图1：N-甲基吡咯烷对照品图谱(6.1010.2X0 METROSEP C 2羧酸基阳离子柱)；

图2：注射用盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷的含量测定图谱(6.1010.2X0METROSEP C 2羧酸基阳离子柱)；

图3：N-甲基吡咯烷对照品图谱(Ionpac cs16羧酸阳离子柱)；

图4：注射用盐酸头孢吡肟中N-甲基吡咯烷的含量测定图谱(Ionpac cs16羧酸阳离子柱)。

具体实施方式

下面列举实施例，对本发明加以进一步说明。

实施例1

1、仪器：日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，包括LC-10AT泵，CDD-10A电导检测器，CTO-10A柱温相，HW-2000工作站，色谱柱：6.1010.2X0 METROSEP C 2。

2、试剂：乙腈：Tidea公司，色谱纯，批号：AS-1122

硝酸：广州化学试剂厂，分析纯，批号：20060512

水：超纯水

3、N-甲基吡咯烷含量测定方法

液相色谱条件与系统适应性：照中国药典高效液相色谱法试验，以键合羧酸基的硅胶柱为分析柱，0.01mol/L硝酸溶液—乙腈(99∶1)为流动相，柱温35℃。取对照品溶液数次进样，其相对标准差(RSD)不得过5.0％。

供试品溶液的制备：精密称取本品适量，加0.01mol/L硝酸溶液制成每1ml含相当于头孢吡肟约5mg的溶液，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：精密称取N-甲基吡咯烷对照品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，精密量取此溶液5ml，加0.01mol/L硝酸溶液稀释成100ml，摇匀，作为对照品溶液。

测定法：准确量取上述两种溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，并记录色谱图。供试品溶液的色谱图(见图2，峰a是N-甲基吡咯烷峰，峰b是精氨酸峰，峰c是头孢吡肟峰)中如出现与对照品溶液色谱图(见图1，峰a是N-甲基吡咯烷峰)相应的N-甲基吡咯烷色谱峰，按外标法测定其含量。

实例2

同实施例1，只是流动相是0.001mol/L硫酸溶液-乙睛(95∶5)，柱温10℃，供试品溶液每1ml中含1mg盐酸头孢吡肟原料或者是制剂的溶液。对照品溶液每1ml中含N-甲基吡咯烷对照品0.1mg的溶液。稀释剂是0.001mol/L硫酸溶液。测定法中，供试品溶液以及对照品溶液均取30ul分别注入液相色谱仪，均记录色谱图。

实施例3

同实施例1，只是流动相是0.05mol/L硝酸溶液-甲醇(90∶10)，柱温50℃，供试品溶液每1ml中含10mg盐酸头孢吡肟原料或者是制剂的溶液。对照品溶液每1ml中含N-甲基吡咯烷对照品1mg的溶液。稀释剂是0.05mol/L硝酸溶液。测定法中，供试品溶液以及对照品溶液均取10ul分别注入液相色谱仪，均记录色谱图。

实施例4

1、仪器：戴安ICS90型离子色谱仪，色谱柱：Ionpac cs16。

2、试剂：乙腈：Tidea公司，色谱纯，批号：AS-1202

硝酸：广州化学试剂厂，分析纯，批号：20060810

水：超纯水

3、N-甲基吡咯烷含量测定方法

液相色谱条件与系统适应性：以填料为乙基乙烯基苯与55％的二乙烯基苯交联，与亲水的羧酸基团键合的多孔树脂为分析柱，0.01mol/L硝酸溶液—乙腈(99∶1)为流动相，柱温35℃。取对照品溶液数次进样，其相对标准差(RSD)不得过5.0％。

供试品溶液的制备：精密称取本品适量，加0.01mol/L硝酸溶液制成每1ml含相当于头孢吡肟约5mg的溶液，作为供试品溶液。

对照品溶液的制备：精密称取N-甲基吡咯烷对照品，加水制成每1ml中含0.5mg的溶液，精密量取此溶液5ml，加0.01mol/L硝酸溶液稀释成100ml，摇匀，作为对照品溶液。

测定法：准确量取上述两种溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，并记录色谱图。供试品溶液的色谱图(见图4，峰a是N-甲基吡咯烷峰，峰b是精氨酸峰，峰c是头孢吡肟峰)中如出现与对照品溶液色谱图(见图3，峰a是N-甲基吡咯烷峰)相应的N-甲基吡咯烷色谱峰，按外标法测定其含量。

实施例5

同实施例4，只是硝酸溶液是0.001mol/L硝酸溶液。

实施例6

同实施例4，只是流动相是0.005mol/L硫酸溶液-丙酮(95∶5)，柱温10℃，供试品溶液每1ml中含10mg头孢吡肟的溶液。对照品溶液每1ml中含N-甲基吡咯烷对照品1mg的溶液。稀释剂是0.005mol/L硫酸溶液。测定法中，供试品溶液以及对照品溶液均取15ul分别注入液相色谱仪，均记录色谱图。

实施例7

同实施例4，只是流动相是0.01mol/L硝酸溶液-甲醇(90∶10)，柱温50℃，供试品溶液每1ml中含10g盐酸头孢吡肟原料或者是制剂的溶液。对照品溶液每1ml中含N-甲基吡咯烷对照品0.6mg的溶液。稀释剂是0.01mol/L硫酸溶液。测定法中，供试品溶液以及对照品溶液均取25ul分别注入液相色谱仪，均记录色谱图。

实施例8

同实施例4，只是流动相是0.03mol/L硝酸溶液。稀释剂是水。

实施例9

同实施例4，只是流动相和稀释剂均是0.05mol/L甲基磺酸溶液。