轮状病毒Vp4全基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达

摘要

一种轮状病毒Vp4全基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达，属于生物基因领域，其特征是：对重组质粒pGEM－T－Vp4和以thyA基因为选择压力的载体pW425t均以SalI、KpnI双酶切，切胶纯化后，以T4 DNA连接酶连接；连接产物转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中，在普通的LB固体培养基上培养，经生长功能弥补，筛选获得原核重组表达质粒pW425t－Vp4；其有益效果是：将猪A组轮状病毒Vp4全基因进行克隆、测序，与“疫苗级”以thyA基因为选择标记的可在乳酸菌和大肠杆菌之间穿梭表达的载体pW425t进行重组，通过检测，表明外源基因Vp4可以通过表达载体pW425t在大肠杆菌中表达并具有反应原性，为下一步在thyA基因缺陷型的乳酸菌受体菌株中表达提供理论基础和实验依据。