轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达

摘要

一种轮状病毒Vp6基因与乳酸菌非抗性表达载体的重组与表达，属于生物基因领域，其特征是：将克隆质粒和以thyA基因为选择压力的载体均以SacI、KpnI双酶切，纯化回收后，以T4 DNA连接酶连接，连接产物转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E.coli X13中，在培养基上培养，经生长功能弥补，筛选获得原核重组表达质粒；将阳性菌用苏氨酸诱导表达，重组质粒获得高效表达，融合蛋白的相对分子量约为44.88kD。有益效果是：VP6蛋白为RV组特异性抗原，位于病毒的内壳，占病毒颗粒的51％。由于VP6主要刺激机体产生黏膜免疫抗体sIgA，在黏膜免疫中具有非常重要的作用，因而研制轮状病毒Vp6基因介导黏膜免疫的口服基因工程疫苗具有重要的意义。