一种用短串联重复序列位点等位基因阶梯的个体识别DNA鉴定方法及其检测试剂盒

摘要

本发明公开一种用短串联重复序列位点等位基因阶梯的个体识别DNA鉴定方法及其检测试剂盒，其特征是采用三色荧光标记STR位点等位基因阶梯的制备技术，步骤如下：筛选用于个体识别DNA检测的STR位点；设计合成特异PCR扩增普通引物和分组荧光标记引物；收集人体组织样本；提取人基因组DNA；进行PCR反应；电泳检测扩增片段，割胶纯化；将PCR产物连接到载体上，得到各不同等位基因的克隆；用对应的荧光标记引物对每个等位基因进行PCR，制备不同的各等位基因；根据扩增产物的荧光值检测定量各等位基因；混合各STR位点的各等位基因的PCR扩增产物，加入试剂稳定剂，即可得到等位基因阶梯，该等位基因阶梯用于个体识别DNA荧光检测试剂盒，达到基因分型识别的功能。本发明无需反复收集具有不同基因型个体的血标本，具有制作简便、成本低、稳定性好。