高产SOD云芝菌丝体深层培养方法

摘要

本发明涉及一种能提高食用菌菌丝体中SOD活性的方法，公开了一种通过深层培养获得高产SOD云芝菌丝体的方法。它采用云芝菌丝体进行液体发酵培养，培养基组成为马铃薯160g/L，葡萄糖16g/L，黄豆粉18g/L，麸皮10g/L，自然pH；培养条件为接种量10％，菌龄3天，培养温度为23～25℃，采用微弱光照，发酵周期为4天。本发明还包括物理应激步骤。本发明成本低、后处理工艺简单，易于实现工业化生产，并可借助本发明开发一种富含SOD的药用真菌类功能保健食品或药剂，为新型SOD保健食品或药剂的开发奠定基础。

说明书

技术领域

本发明涉及一种能提高食用菌菌丝体中SOD活性的方法，具体地说，涉及通过深层培养获得高产SOD云芝菌丝体的方法。

背景技术

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，简称SOD)是一种能够清除超氧阴离子的酶，在机体的抗氧化防御体系中占有重要的地位，广泛存在于动物、植物、所有好氧微生物及少数厌氧微生物体内。SOD可以提高人体对自由基损伤而诱发疾病的抵抗能力及对自由基外界诱发因子的抵抗能力，消除肌体疲劳，增强对超负荷的适应力，具有抗炎、抗衰老和抗辐射作用，已经广泛应用于医疗、保健、食品及日用化学工业等方面。目前，SOD主要来源于动物血液，但其来源有限。

云芝(Coriolus versicolor)是能够治疗疾病、具有很高药用价值的一类药用真菌，在提高人体免疫功能、滋补、抗衰老以及对预防、抑制或治疗疾病等方面的作用，早已受到我国历代医药学家的关注，其医疗价值和保健作用也已引起了世界各国的广泛重视。选择云芝作为产SOD菌株具有发酵周期短、产量高、SOD活力较高、药用价值高、产品风味清香等优点，开发前景广阔。

发明内容

本发明的目的在于针对上述问题，提供一种通过深层培养获得高产SOD云芝菌丝体的方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：高产SOD云芝菌丝体深层培养方法，采用云芝菌丝体进行液体发酵培养，培养基组成为马铃薯160g/L，葡萄糖16g/L，黄豆粉18g/L，麸皮10g/L，自然pH；培养条件为接种量10％，菌龄3天，培养温度为23～25℃，采用微弱光照，发酵周期为4天。

本发明还包括物理方法对培养结束的云芝菌丝体进行应激的步骤。如将培养结束的菌丝体进行30℃热处理2小时后再进行10℃冷处理1.5小时，或用38kHz超声波对培养结束的云芝菌丝体处理40分钟。

本发明选取云芝进行菌丝体的液体发酵培养，通过优化培养工艺，包括培养基成分和含量以及改变菌丝体培养的环境条件、培养方式等提高菌丝中SOD活性。并可通过物理应激方法对云芝菌丝体产SOD进行诱导，使菌丝中SOD活性得到进一步提高。

本发明成本低、后处理工艺简单，易于实现工业化生产，并可借助本发明开发一种富含SOD的药用真菌类功能保健食品或药剂，为新型SOD保健食品或药剂的开发奠定基础。

具体实施方式

下述菌种均为云芝菌株。

对比例

采用常用的马铃薯综合培养基：马铃薯(去皮)200g，葡萄糖20g，磷酸二氢钾3g，硫酸镁1.5g，维生素B₁5～10mg，琼脂20g，水1000mL，24℃、150r/min。

培养条件：普通光照，2天菌龄菌种接种，接种量为10％，培养4天后收获菌丝体。

获得：4.1g干菌体，每克云芝干菌体SOD活力为1.1U/gDW，单位体积发酵液SOD总活力为4.5U/ml。

实施例1

培养基：马铃薯160g/L，葡萄糖16g/L，黄豆粉18g/L，麸皮10g/L，自然pH。24℃、150r/min。

培养条件：普通光照，2天菌龄菌种接种，接种量为10％，培养4天后收获菌丝体。

获得：12.0g干菌体，每克云芝干菌体SOD活力为4.5U/gDW，单位体积发酵液SOD总活力为54.0U/ml。

实施例2

培养基：马铃薯160g/L，葡萄糖16g/L，黄豆粉18g/L，麸皮10g/L，自然pH。

培养条件：接种量10％，菌龄3天，培养温度为23～25℃，采用微弱光照，发酵周期4天。

获得：18.0g干菌体，每克云芝干菌体SOD活力为4.3U/gDW，单位体积发酵液SOD总活力为77.4U/ml。

实施例3

培养基及培养条件同实例3，当培养结束后，对发酵液进行30℃热处理2h后再进行10℃冷处理1.5h。

获得：17.6g干菌体，每克云芝干菌体SOD活力为6.6U/gDW，单位体积发酵液SOD总活力为116.2U/ml。

实施例4

培养基及培养条件同实例3，培养结束后，用38kHz超声波处理云芝发酵液40min。

获得：17.9g干菌体，每克云芝干菌体SOD活力为6.3U/gDW，单位体积发酵液SOD总活力为112.8U/ml。