茶色素在制备肿瘤放化疗药物增效解毒药物中的应用

摘要

本发明公开了茶色素的药物新用途,即茶色素对肿瘤放疗药物和化疗药物均具有明的增效增敏作用和减毒作用。

说明书

本发明涉及茶色素的药物新用途，具体涉及茶色素在制备对肿瘤放化疗药物具有增效解毒作用的药物中的应用，属于中药领域。

茶色素是从茶叶中提取的植物天然色素，是茶多酚中儿茶素经过氧化而成的一种活性色素复合物。茶色素由茶黄素、茶红素和茶褐素组成。对于茶色素的研究已有文献报道。CN1074618A公开了茶色素及其生产方法。该生产过程为，茶叶经煎煮取汁，碱化，浓缩，酸化，加入乙醇回流，乙醇回流再碱化得到茶色素结晶品，经真空干燥，即得到该茶色素。用该方法制得的茶色素中茶黄素、茶红素和茶褐素三者有恒定的比例，可作为药用。对于茶色素的药用价值报道可以概括为降低血液粘滞度、降血脂、降胆固醇、预防和治疗心血管疾病。但到目前为止尚未见有关茶色素对肿瘤放化疗药物具有增效解毒作用的报道。

本发明的目的是提供茶色素的一种新的制药用途，即茶色素在制备对肿瘤放化疗药物具有增效解毒作用的药物中的应用。

在肿瘤的治疗过程中，化疗药物在杀灭癌细胞的同时，还会大量杀灭人体的正常细胞，特别是抑制骨髓细胞的再生。这是化疗和/或放疗过程中最为棘手的问题之一。放疗治疗同样会带来对骨髓的毒副作用，而且放疗和/或化疗一段时间后，肿瘤患者对治疗药物会产生交叉抗药性，这给肿瘤治疗又增添了难度。

本发明的茶色素一方面可以降低化疗或放疗药物的毒付作用，另一方面对化疗药物还具有增效作用，对放疗药物具有增敏作用。

本发明茶色素的提取方法可以按照已知的提取工艺进行提取，优选是按照下述方法提取的茶色素：

(1)、将茶叶按1∶15-30倍比例加水后，经一次或一次以上的煎煮取汁，煎出液用在水溶液中能产生OH^-离子的化合物进行碱化，调节PH8-10，然后在小于70℃下加热浓缩该碱化液至原体积量的1/4-1/10，得浓缩液；(2)浓缩液用酸调至PH3-6，酸化液加入乙醇1-10体积倍量，回流0.5-2小时，得醇回流液；(3)醇回流液用在水溶液能产生OH^-离子的化合物调节PH7-10，沉淀后过滤，得茶色素结晶，茶色素结晶经真空干燥，即得茶色素产品。

本发明的茶色素是一种药物活性成分，按照常规的制剂工艺，可以以茶色素为主要活性组份，加入常规的赋性剂、调味剂、崩解剂、防腐剂、润滑剂、湿润剂、粘合剂、溶剂、增稠剂、增溶剂等药物辅料，制成任何一种适合于临床上使用的剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液体制剂、注射剂等。

由于本发明首次公开了茶色素对肿瘤放化疗药物的增效、增敏和解毒作用。因此，将茶色素单独或与其他活性组份或辅料配合制成药剂，只要是该药剂用于对肿瘤放疗、化疗药物的增效、增敏和解毒用途，均属于本发明的保护范围。

本发明的茶色素在制成任何一种剂型时，均具有对肿瘤放化疗药物的增效解毒作用。任何药剂，如果其组份中含有茶色素或仅以茶色素单一成分制备成药，在其包装或说明书等标识上或者在其他任何宣传品上只要注明或提示具有对肿瘤放化疗药物的增效解毒作用，则落入本发明的保护范围之内。

本发明的茶色素是来源于药食两用的天然植物茶叶。因此，也可以将茶色素制成保健食品或保健药品。将茶色素制成的保健食品或保健药品，如果在其包装或说明书等标识上注明或提示有对肿瘤放化疗药物的增效解毒作用，也落入本发明的保护范围之内。

实施例1

配方

茶色素      125克

药用淀粉    875克

将上述组份入搅拌机，充分搅拌混匀，用胶囊机装胶囊，每粒装填1克，制得茶色素胶囊1000粒，每粒胶囊含茶色素125毫克。

实施例2

茶色素    250克

蒸馏水    2000毫升

甜菊甙    1克

将茶色素溶干蒸馏水中，充分混匀，加入甜菊甙，再次搅拌混匀，用罐装机装入玻璃瓶中，每瓶装10毫升，灭菌，制得茶色素口服液。

实验例1茶色素在恶性肿瘤放化疗过程中的增效减毒作用

1材料和方法

1.1一般资料1995年6月-1996年6月恶性肿瘤病例共234例，可评价病例数160，男102例，女58例，年龄24-81岁，中位数48.36岁。乳腺癌46例，头颈部癌18例，食道癌27例，肺癌25例，胃癌11例，结肠癌12例、直肠癌21例。国际分期均为Ⅱ-Ⅲ期，卡氏评分≥60，为能接受放、化疗的中晚期恶性肿瘤患者。以上病例随机分成以下二组，各80例(表1)。

茶色素组：放疗和/或化疗加茶色素胶囊

对照组：放疗和/或化疗加利血生和鲨肝醇

两组病例经临床、B超、红外、X线、CT、MRI、内窥镜等3-5项联合检查，均有明显肿块或转移病灶，其中经细胞/或病理切片证实为一级诊断病例占96％。

1.2治疗方法

1.2.1茶色素组：茶色素胶囊由江西绿色制药有限公司提供。恶性肿瘤放化疗同时服茶色素胶囊，口服250mg/次，每日三次，服药疗程一个月，收入本组统汁。

1.2.2对照组：恶性肿瘤放化疗同时口服利血生，20mg/次，鲨肝醇100mg/次，每日二次，服药疗程一个月，收入本组统计。

两组病例根据病变具体情况制定治疗方案。化疗有单药和联合用药，主要为MMC、ADM、CAF、CMF等，放疗采用钴和直线加速器二种。

治疗前经血常规、心肝肾功能检查，抽外周血检测免疫功能，T细胞亚群采用8-P一步染色法，体液免疫IgG、IgA、IgM采用脂肪单向扩散法，结果采用t检验，在放化疗期间每周查复血常规一次，一个月后复查上述所有检查。

                              表1    两组病例基本情况比较

 茶色素组    对 照 组组别男女    102    58    51    29    51    29年龄≥60 40-59 ＜ 40    72    65    23    47    20    13    42    31    7化疗次数≤2轮≥3轮    133    27    46    34    47    33放射野≤2野≥3野    127    33    61    19    57    23分期ⅡⅢⅣ    37    91    32    20    33    27    17    42    21

2疗效判定标准

分完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、无变化(NC)和进展(PD)，以CR+PR为有效。

完全缓解：放化疗期间同时服药后，白细胞保持在4×10⁹/L以上，症状基本消失，肿块消失，且一月内无复发者。

部分缓解：放化疗期间同时服药后，白细胞保持4×10⁹/L以上，症状明显改善，肿块缩小50％以上，白细胞低下者，服药一周后恢复正常，或增1×10⁹/L以上者。

无变化：放化疗致白细胞低下，服药两周日细胞无上升，症状有所改善，肿块缩小不到50％。

进展：白细胞低下，服药两周无变化或继续下降，症状无改善或反而加重者，肿块增大25％以上或出现新病灶者。

3治疗结果

3.1疗效茶色素组通过抗氧疗作用和促进脾淋巴细胞产生集落刺激因子，促使T淋巴细胞大量增殖，以补充放、化疗杀伤的T淋巴细胞，使CD₃、CD₄、NK等升高，与对照组比较显著差异(表2)。

                                  表2    两组治疗疗效比较

例数                     疗    效    CR PR NC PD CR+PR茶色素组对照组8080    8    2 52 35 16 29 4 14 75.00 46.25

P值＜0.05

3.2 T细胞亚群治疗前后可见两组T细胞亚群水平均低，但对照组CD₃、CD₄、CD₄/CD₈比值下降明显，CD₈则上升明显，而茶色素组治疗后无明显下降。

3.3体液免疫对照组IgG、IgA、IgM均低于治疗前，而茶色素组则相对稳定，无下降。

3.4卡氏评分两组采用(Karnofsky)评分法评定生活质量，并观察体重变化，治疗后卡氏评分提高10分或以上者为上升，减低10分或以上者为下降，上下波动在10分以内者为稳定，体重增加＞1.0kg为增加，≤1.0kg为减轻，体重波动于1.0kg≥内者为稳定(表3)。

                                      表3    两组生活质量的比较

                      卡氏评分(％)                     体重(％)  上升  稳定  下降    增加  稳定  减轻茶色素组对照组13(16.25) 2(2.5) 54(67.5) 26(32.5)13(16.25)52(65)    22(27.5)    3(3.75)17(21.25)9(11.25)41(51.25) 68(85)            P＜0.01            P＜0.01

4毒副作用两组放、化疗病人白细胞、血小板、血浆蛋白减少，但茶色素组出现的程度和例数均较对照组轻和少，P值＜0.05，治疗后肝肾功能复查均未发现损害。两组血象变化，相关症状变化见(表4、表5)。

                                     表4    两组血象变化

             WBC(％)            BPC (％)          HGB(％) 4≥4100≥100    ＜10    ≥10茶色素组对照组 21(26.25) 42(52.5) 59(73.75) 38(47.5) 23(28.75) 58(72.5) 57(71.25)22(27.5) 24(30) 68(83.75) 56(70) 13(16.25)    P＜0.01    P＜0.01    P ＜ 0.01

                                            表5    对放化疗相关症状的影响

例数       肢倦动      恶心呕吐    食   欲    腹    泻    便  秘好转不变加重好转不变加重好转不变加重好转下变加重好转不变加重茶色素组对照组80805521 1742 8174718 28 52 510 42 18 26 49 12 13 52 22 24 46412 68 16 12 52 - 12P＜0.05    P＜0.05    P＜0.05      P＜0.05    P＜0.01

5讨论

恶性肿瘤的治疗，目前首选疗法仍然是外科手术切除，但必须配合化疗和/或放疗，以清除手术无法切除的潜伏癌细胞。大量事实证明，单纯肿块切除或扩大切除，不配合化疗和/或放疗、或化疗方案下规范，或用药下当，术后往往复发，但是问题还在于，即使配合了很好的化疗和/或放疗，疗效仍然不理想。

体外实验证明，化疗药物能有效地杀灭癌细胞或抑制癌细胞增生。然而，化学药物进入人体后，因肿瘤病灶及其周围组织的微循环障碍，直接影响着药物进入瘤体，从而降低了药物杀死癌细胞的功效。

化疗药物在杀灭细胞的同时，还会大量杀灭人体的正常细胞，特别是抑制骨髓细胞的再生，严重地损伤人体免疫防御功能，使人体“卫士”-白细胞、血小板等逐渐减少。这是化疗和/或放疗过程中最为棘手问题之一，常使治疗期延长甚至中止治疗，这必将影响整体治疗效果。目前，虽然升白药物品种繁多，但真正有疗效的甚微。

近年来又有新的发现，癌细胞在接触到某种抗癌药物后，可以产生多药抗药性(MDR)，即不但能抵抗曾经接触过的该种药物，还能抵抗同其化学结构相似的其他抗癌药物，此乃所谓交叉抗药性。这就是近年来发现的临床化疗失败的又一重要原因。

我们通过二组资料的对比观察，进一步证实茶色素有肯定的抗凝、促纤容、诱发骨髓细胞增生、增强机体免疫功能和补充人体多种微量元素等功效，从而有效地改善肿瘤病灶及其周围组织的微循环障碍，促进化疗物渗入瘤体内，充分发挥其抗癌和抑癌疗效。在以下三方面茶色素组优于对照组。

(1)茶色素胶囊能缓解骨髓抑制，升白作用明显。这对保护患者的免疫功能起了至关重要的作用。本组患者治疗前，白细胞数平均为4012mm³，治疗后(即茶色素组)白细胞数平均为4536mm³，经统计学处理，P值＜0.01，提示化疗和/或放疗期间配合口服茶色素胶囊，在患者体内可望出现有显著意义的白细胞数升高。

(2)茶色素胶囊能缓解化疗和/放疗时患者胃肠功能的损伤，80例茶色素组患者中，仅有少数病人诉说消化功能欠佳，而对照组几乎全部病人诉说食欲明显下降，充分说明茶色素胶囊能调整菌群失常，纠正胃肠功能紊乱。

(3)茶色素胶囊能提高患者的生活质量。80例茶色素患者中，凡坚持服用茶色素胶囊者，基本上都显示精神状态良好，这同患者体内微循环得以充分改善密切相关。对照组的80例患者中绝大多数的日常生活萎糜不振，缺乏兴趣和性欲。

目前对茶色素防癌抗癌的研究很活跃，已深入到了分子生物学水平。已有资料表明，茶色素不但具有防癌功效，阻断肿瘤的发生，还具有直接的抗癌作用和一定的广谱性。综上所述，我们认为茶色素胶囊配合化疗和/或放疗，能有效地增强抗肿瘤的综合疗效，为肿瘤临床开拓了新的选择和希望。

实施例2茶色素胶囊对恶性肿瘤放射增敏作用的临床观察

放射治疗是肿瘤的常规治疗手段之一，由于放疗技术的下断改进和完善，肿瘤放射治疗的临床疗效有了很大提高。尽管如此，目前的放射治疗仍存在很大的局限性，为提高肿瘤局部的控制率，降低正常组织的损伤，我们自96年元月起采用茶色素胶囊作为放疗的增敏剂，以期进一步改善肿瘤放疗的临床疗效。

临床资料：

本组共收治入院符合本组研究条件，经病理确诊给予放射治疗的肺癌、食管癌、鼻咽癌患者共50例，男性38例，女性12例，平均年龄54.3岁，年龄范围37-69岁。肺癌31例(鳞癌17例，腺癌12例、腺鳞癌2例)、食管癌12例，(鳞癌11例，腺癌1例)，鼻咽癌7例(鳞癌3例，大圆细胞癌及小圆细胞癌各2例)，临床分期，Ⅲ期37例，Ⅳ期13例，其中结合茶色素进行放射治疗22例(简称治疗组)，单纯放射治疗组28例(简称对照组)。本组患者均可根据CT扫描，X线摄片，测量癌肿大小，所有病人均明显可测量肿块。

治疗方法：

一、放射治疗，治疗组和对照组按每种肿瘤的治疗方案设野放疗，全部患者均采用钴60治疗机进行治疗，180-200cGy/次，5次/周，肿瘤组织量DT5000cGy-7000cGy，平均6325cGy，6-8周完成放疗。

二、茶色素治疗方法，采用江西绿色制药有限公司生产的茶色素胶囊，22例患者均在放疗开始后一周内开始口服，每次100mg，每日三次，至少口服三周计入本组。

三、其它治疗，两组其它用药情况基本一致，主要包括口服维生素类药物，静点抗生素类药品。

观察方法：

全组患者治疗前后均行血、尿、便常规、心电图、肝肾功能检查。疗效评定方法采用WHO批准的国际统一标准。

治疗结果：

一、治疗后疗效分析，治疗组有效率为68.2％，对照组为57.1％，治疗组疗效高于对照组。见表Ⅰ。

                                  表Ⅰ    治疗组与对照组疗效分析

总数(例)    CR  PR NC  PD  有效率(CR+PR)治疗组对照组    22    28    5    4 10 12 4 7    2   5 68.2％ 57.1％

二、治疗前后对骨髓功能影响

1、对外周白细胞、血小板的影响，分析揭示治疗组外周白细胞和血小板降低程度小于对照组，见表Ⅱ和Ⅲ。

                               表Ⅱ治疗组与对照组白细胞水平变化

 总数(例) 治疗前G/L 治疗后G/L治疗组    22 6.28×10⁹ 5.61×10⁹对照组    28 6.31×10⁹4.86×10⁹

                        表Ⅲ治疗组与对照组血小板水平变化

  总数(例) 治疗前G/L 治疗后G/L治疗组    22 154.26    147.94对照组    28 148.72    140.23

2、对血红蛋白的影响分析提示，两组患者治疗前后血红蛋白含量均有不同程度下降，但差异不明显，见表Ⅳ。

                          表Ⅳ治疗组与对照组血红蛋白水平变化

 总数(例)    治疗前g/L    治疗后g/L 治疗组    22    144.33    141.35对照组    28    148.47    145.29

讨论：

肿瘤能引起患者血流变学的改变。恶性肿瘤病人血液中的纤维蛋白原含量明显增高，红细胞积聚明显，血液粘滞性增高，由于血液流变性质的变化，使血流中的癌细胞从血管轴心向血管壁处迁移，这样癌细胞就可能陷入血管内壁细胞层不规整处，为分散的癌细胞提供了聚合可能。血流缓慢，血流于滞可使癌细胞停留在局部增加癌瘤间组织漫润的可能性，同时由于肿瘤患者的血液粘滞性增加，导致血流变缓Pao₂和Sao₂下降，使肿瘤乏氧细胞增多，增加了肿瘤对辐射的抗拒性。茶色素具有抗凝，抗纤溶作用，能改善肿瘤患者的血液高凝状态，能抑制血栓形成，改善血流微循环障碍，增加抗肿瘤效果，50例肿瘤病例试用结果提示，治疗组CR22.7％，PR45.8％，而对照组仅14.2％和42.8％，高于对照组，说明茶色素胶囊有一定的增敏、增效作用。

放射治疗对人体骨髓有一定的抑制损害，两组外周血、白细胞、血小板均有不同程度下降，但治疗组下降程度低，可使白细胞保持在一定的高水平上，保证放射治疗的顺利进行，进一步观察，治疗组对白细胞支持回升有一定作用，说明茶色素胶囊对骨髓功能有一定的保护作用。

本实验地位于高海拔地区，根据文献报告，随着海拔升高和大气氧分压降低，反映机体清除氧自由基能力的超氧化物岐化酶(SOD)明显下降，而反映机体氧自由基含量的丙二醛(MDA)显著升高，相关分析表明，SOD与大气氧分压呈明显正相关，MDA与大气氧分压呈明显负相关。表明高原健康人体内存在有明显的氧自由基代谢失衡，MDA具有致突变、致癌的作用，而茶色素能明显升高血清SOD活力，能清除处自由基，保护细胞免受损害，并具有对抗基因突变能力。同时因茶色素胶囊含有硒、锗等微量元素，可以促进新成代谢，增加免疫力，也可减少放射对正常组织的损伤。

茶色素对肿瘤放疗患者在治疗后检查，未发现明显的心电图改变，肝肾功能损伤，因此作者认为茶色素可作为放射治疗中的增效，增敏药物，还可以作为一种安全的防癌药物推广。