一种α-淀粉酶的淀粉结合结构域与非淀粉类底物的结合判断方法

摘要

本发明涉及生物领域，具体的说是一种α‑淀粉酶的淀粉结合结构域与非淀粉类底物的结合判断方法，对SBDAmyP亲缘性高的家族代表序列筛选；蛋白的表达和纯化；蛋白与不同类型多糖底物结合；从CAZY数据库筛选结构信息已公布的SBD序列，绘制系统进化树，发现CBM21、CBM48两家族与SBDAmyP亲缘性较高。从与SBDAmyP亲缘性高的两个家族中选取典型代表序列(SBDBEI、SBDAmyA)进行基因克隆和表达纯化。然后利用亲和凝胶检测这两个家族典型代表与非淀粉类多糖底物结合，发现CBM48家族代表SBDAmyA与甘露聚糖、甲基纤维素、海带多糖、木聚糖均不存在结合，不具有非淀粉结合能力。