一种提高重组N-乙酰葡糖胺转移酶II可溶性表达的方法

摘要

本发明公开了一种提高重组N‑乙酰葡糖胺转移酶II可溶性表达的方法，其中，一种提高重组N‑乙酰葡糖胺转移酶II在大肠杆菌中可溶性表达量的方法，其包括，构建截短型N‑乙酰葡糖胺转移酶II，得GnT‑II‑ΔTM，序列如SEQ ID NO:1所示；构建重组表达质粒；将所述重组表达质粒转化表达宿主菌，构建重组原核表达菌株；培养所述重组原核表达菌株，诱导表达。本发明在大肠杆菌中成功表达并提高重组人源GnT‑II的可溶性表达量，且该酶在体外具有催化活性，解决了哺乳动物膜蛋白GnT‑II原核表达极易降解、纯化困难的技术问题，可以大量制备重组GnT‑II。