一种含有新型前导肽的米黑根毛霉脂肪酶基因及其在毕赤酵母中的表达

摘要

本发明公开了一种含有新型前导肽的米黑根毛霉脂肪酶基因及其在毕赤酵母中的表达。含有新型前导肽的米黑根毛霉脂肪酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过前导肽的改变实现了米黑根毛霉脂肪酶酶活和酶产量的提高，其酶活是野生型米黑根毛霉脂肪酶前导肽存在下的3倍，摇瓶发酵水平达到100U/ml，这在米黑根毛霉脂肪酶的研究领域还属于首次。米黑根毛霉脂肪酶属于真菌脂肪酶，本发明采用毕赤酵母表达系统以及按照毕赤酵母喜好性优化密码子后的脂肪酶基因，更有利于真菌脂肪酶的翻译后折叠、修饰及高效分泌。采用pPIC9K质粒作为表达载体，其含有的高效甲醇诱导强启动子有利于脂肪酶基因高效快速表达，能提高酶活和酶产量。