一种产精氨酸酶工程菌的构建及应用该菌生产L-鸟氨酸

摘要

本发明阐述了一种产精氨酸酶工程菌的构建方法及应用该菌转化L-精氨酸生产L-鸟氨酸，属于生物工程技术领域。本发明通过分子生物学手段从嗜热菌Bacillus caldovelox(DSM411)中克隆获得精氨酸酶基因，将构建好的表达质粒导入E.coli BL21(DE3)，通过卡那霉素抗性平板筛选获得表达载体高拷贝重组的含精氨酸酶工程菌pET28a-ARG。该酶在大肠杆菌内诱导表达后，仍表现出很高的活力。发酵得到的菌体无需破碎，即可直接用于转化，在60℃条件下，工程菌具有较高的透性，更有利于底物的吸收和产物的释放，反应速度得到极大的提高，转化周期仅需2-4h，鸟氨酸产量可达120.1g/L，转化率为98.9％。