一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法

摘要

本发明属于中药材种植技术领域，具体提供了一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法。该方法包括如下步骤首先选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的包装袋放入存储槽内存储，存储条件为：储藏室内温度控制在5-10℃，空气湿度60-80%，存储处理30-60天；将所得种子进行破眠处理后播种于育苗床，待收获种子时用清水冲洗种子，沥干后将新鲜川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用45-60℃温度恒温干燥。本发明解决了现有技术中种植的川贝母中总生物碱含量过低，疗效差的问题。该方法步骤简单，操作方便，是一种经济实用的川贝母种植技术。

说明书

技术领域

本发明属于药物栽培技术领域，具体涉及一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法。

背景技术

川贝母为百合科贝母属多年种植物的干燥鳞茎。《中国药典》2010版收载川贝母为百合 科植物川贝母、暗紫贝母、甘肃贝母、梭砂贝母的干燥鳞茎。川贝母具有喜冷凉的气候条件， 具有耐寒、喜湿、怕高温、喜荫蔽的特性，主产于四川甘孜州、阿坝州、青海、西藏交界地 区。

由于现代中药产业的发展，川贝母市场需求量大，而野生来源的川贝母不能满足市场的 广泛需求。人工引种成为目前解决川贝母供需矛盾的最主要手段，但目前研究对川贝母生理 特性研究较少，如何解决引种和野生抚育碰到的繁殖系数低，产量低，保苗率低及引种后川 贝母有效成分总生物碱含量低等问题还需有待进一步深入研究。川贝母药材原植物来源多， 其分布环境的多样性造成种质差异显著，而不同的引种和抚育方式所产出的川贝母生物碱含 量差异较大，成分组成也有不同的差异，进而导致临床疗效差异较大。因此，在工业化大生 产过程中需要一种能有效提高川贝母生物碱含量的处理方法，从而提高川贝母的临床疗效。

发明内容

为解决现有技术川贝母出苗率低，整齐度差，有效成分总生物碱含量少的问题，通过多 次长期反复实验，筛选出一种能有效提高川贝母总生物碱含量，且出苗率高，齐苗时间短的 川贝母加工处理方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现：

一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，将混合后的种子装 入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的包装袋放入存储槽 内存储，存储条件为：储藏室内温度控制在5-10℃，空气湿度60-80%，存储处理30-60天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为30～40℃的水中浸泡8～12h；将种子 滤出放置在光照强度为4000～8000Lx照射12～24h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，播种于育苗床上，播种密度为800-1000粒/ 平方米，在种子表面覆盖一层3-5cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用45-60℃温度恒温干燥。

优选地，S1步骤所述的种子与腐熟后的牛粪混合，所述混合比例为1:2.5，

优选地，S1步骤所述存储槽底部平铺一层20-25cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋平 放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层10-15cm的腐殖土进行层积。

优选地，S2步骤所述的川贝母种子取出后用温度为40℃的水浸泡12h，将种子滤出放置 在光照强度为6000～8000Lx照射24h。

优选地，S3步骤所述种子与腐殖土混合比例为1:2，播种密度为1000粒/平方米，在种 子表面覆盖一层3cm的腐殖土。

优选地，S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于 光照环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

优选地，S3步骤所述是恒温干燥温度为50℃。

本发明的有益效果是：本发明加工处理方法与现有技术的加工处理方法相比，本发明方 法可提高川贝母总生物碱的含量。在相同给药量前提下，本发明川贝母总生物碱含量高，疗 效更为显著，因此，为获得相同疗效，可以减少本发明川贝母的临床使用量，进而节约了宝 贵药材。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步的描述，本发明的保护范围不局限于以下所述：

实施例1：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，将混合后的种子装 入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的包装袋放入存储槽 内存储，存储条件为：储藏室内温度控制在5-10℃，空气湿度60-80%，存储处理30-60天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为30～40℃的水中浸泡8～12h；将种子 滤出放置在光照强度为4000～8000Lx照射12～24h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，播种于育苗床上，播种密度为800-1000粒/ 平方米，在种子表面覆盖一层3-5cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用45-60℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例2：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层20cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层10cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在5℃，空气湿度60%，存储处理30天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为30℃的水中浸泡8h；将种子滤出放置 在光照强度为4000Lx照射12h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为800粒/平方米，在种子表面覆盖一层3cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用45℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例3：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层22cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层12cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在6℃，空气湿度70%，存储处理35天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为35℃的水中浸泡10h；将种子滤出放置 在光照强度为5000Lx照射14h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为850粒/平方米，在种子表面覆盖一层4cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用50℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例4：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层25cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层10-15cm的腐殖土进行层积。存储条件为： 储藏室内温度控制在10℃，空气湿度80%，存储处理60天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为40℃的水中浸泡12h；将种子滤出放置 在光照强度为8000Lx照射24h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为1000粒/平方米，在种子表面覆盖一层5cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用60℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例5：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层20cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层15cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在5℃，空气湿度80%，存储处理30天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为30℃的水中浸泡8h；将种子滤出放置 在光照强度为4000Lx照射12～24h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为1000粒/平方米，在种子表面覆盖一层3cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用60℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例6：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层22cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层15cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在6℃，空气湿度70%，存储处理40天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为35℃的水中浸泡10h；将种子滤出放置 在光照强度为5000Lx照射16h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为900粒/平方米，在种子表面覆盖一层4cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用60℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例7：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层25cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层15cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在10℃，空气湿度80%，存储处理50天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为35℃的水中浸泡12h；将种子滤出放置 在光照强度为7000Lx照射18h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为1000粒/平方米，在种子表面覆盖一层3cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用45℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

实施例8：一种提高川贝母总生物碱含量的加工处理方法，它包括以下步骤：

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层20cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层10cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在10℃，空气湿度80%，存储处理60天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为40℃的水中浸泡10h；将种子滤出放置 在光照强度为6000Lx照射20h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为950粒/平方米，在种子表面覆盖一层3cm的腐殖土；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用50℃温度恒温干燥。

其中S3步骤所述的育苗床为大棚内育苗床，隔日将大棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照 环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态。

下面通过实验进一步说明本发明的效果：

一、川贝母不同层积填充物的筛选

1、试验材料和方法

1.1试验材料

人工川贝母种子，已腐熟牛粪和园土均采集于甘孜州康定县新都桥镇恩威野生药材扶育 基地。

1.2试验方法

设立牛粪、沙子、园土、混合土（牛粪：园土=1:1）、牛粪：沙子（1:1）、园土：沙子（1:1） 六个处理组，将各处理组与种子混合，将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋 内部的空气，密封袋口，将密封完整的包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层 25cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层15cm 的腐殖土进行层积。储藏室内温度控制在5-10℃，空气湿度60-80%，存储处理60天，将种 子播种于育苗床内，每处理100粒种子，4次重复。

设立0-5℃组，5-10℃组，先用0-5℃低温层积30天后用5-10℃中温层积30天，先用 5-10℃低温层积30天后用0-5℃中温层积30天四个组。填充物采用已腐熟的牛粪，存储处 理60天后播种于育苗床内，每处理100粒种子，4次重复。

2、实验结果

四种不同的填充物在抽去袋内空气保存后，其保湿效果均较好，在真空条件下也有利于 种子的后熟，60天胚的的发育度和发芽率以牛粪与沙子按1:1混合后效果最好。结果见表1。

表1  实验各组种子的胚发育度和发芽率

组别 样本数（粒） 60天胚发育度（%） 发芽率（%） 牛粪 100 58 65 沙子 100 40 35 园土 100 53 56 牛粪：园土（1:1） 100 54 58

牛粪：沙子（1:1） 100 68 71 园土：沙子（1:1） 100 50 54

在川贝母种子层积时，储藏室内不同的温度在层积30天、60天后胚的发育程度均存在 显著性差异，各处理组的发芽率也存在及其显著性差异。结果见表2。

表2  实验各组种子的胚发育度和发芽率

组别 样本数（粒） 30天胚发育度（%） 60天胚发育度（%） 发芽率（%） 0-5℃ 100 17 35 43 5-10℃ 100 26 60 65 先0-5℃后5-10℃ 100 20 43 49 先5-10℃后0-5℃ 100 23 52 57

在层积60天时温度5-10℃层积胚发育度和发芽率最高，表明温度在5-10℃区间的效果 最好。

二、本发明方法对川贝母总生物碱含量的影响

1实验材料

S1：选取黄褐色或褐色的川贝母种子，将种子与腐熟后的牛粪混合，混合比例为1:2.5， 将混合后的种子装入塑料包装袋内，然后抽去包装袋内部的空气，密封袋口，将密封完整的 包装袋放入存储槽内存储，所述存储槽底部平铺一层20cm的腐殖土，将已抽去空气的包装袋 平放在腐殖土表面，然后在包装袋表面平放一层10cm的腐殖土进行层积。存储条件为：储藏 室内温度控制在5℃，空气湿度60%，存储处理30天；

S2：将S1步骤处理后的川贝母种子取出用温度为30℃的水中浸泡8h；将种子滤出放置 在光照强度为4000Lx照射12h；

S3：将S2步骤处理后的种子与腐殖土混合，混合比例为1:2，播种于育苗床上，播种密 度为800粒/平方米，在种子表面覆盖一层3cm的腐殖土，育苗床为大棚内育苗床，隔日将大 棚顶部敞开，让育苗床暴露于光照环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处 于隐蔽状态；

S4：在8月下旬至9月上旬采收川贝母，将新鲜川贝母鳞茎用清水冲洗，沥干后将新鲜 川贝母鳞茎平摊烘盘上，采用50℃温度恒温干燥。

选取通过上述步骤的处理的川贝母种子备用。

2实验仪器及实验试剂

UV-2550紫外分光光度仪，Mettler Toledo PL203型千分之一天平，Mettler Toledo XS105 型十万分之一天平。三氯甲烷（分析纯，北京化工厂），甲醇（分析纯，北京化工厂），氨水 （分析纯，北京化工厂），溴甲酚绿（分析纯，天津市福晨化学试剂厂）。西贝素（供含量检 测用，购于中国药品生物制品检定所。编号：110767-200504）

对照品溶液的制备：紧密称取西北素4.11mg于100ml量瓶中，用三氯甲烷溶解病稀释至 刻度，摇匀，即得（浓度为0.0411mg·ml^-1）。

3实验方法

各精密称取备用川贝母种子2g，加入2倍提交的氨水1h，加入20倍体积的三氯甲烷： 甲醇（4:1）混合溶剂，甲醇各40ml，混匀，于80℃水浴加热回流提取2h，放冷，补足减失 重量，过滤，取滤液20ml，低温挥干，残渣用三氯甲烷溶解，置于5ml量瓶中，加三氯甲烷 稀释至刻度，摇匀，即得。于414nm处测定吸光度。6个批次重复试验。

4实验结果

通过6批次的川贝母种子总生物碱的含量测定，总生物碱的含量平均达到0.10849（%， g·g^-1），详细结果见表3。

表3  6批次川贝母种子总生物碱的含量

样品批次 总生物碱含量（%，g·g^-1） 1 0.11028 2 0.10788 3 0.11105 4 0.10158 5 0.10916 6 0.11080 X±SD 0.10849±0.00168 RSD（%） 3.3%

将S2步骤取消，改换为常规赤霉素进行处理，其余步骤均同实验二其它步骤，通过川贝 母总生物碱含量测定为0.09762（%，g·g^-1），本发明处理方法的川贝母生物总碱的含量明显 高于用赤霉素处理的川贝母。

将S3步骤取消，改换为按常规方法进行通风处理，其余步骤均同实验二其它步骤，通过 川贝母总生物碱含量测定为0.07674（%，g·g^-1），表明将川贝母苗床进行隔日光照，并让育 苗床暴露于光照环境下，光照强度超过8000Lx时关闭大棚顶部，使苗床处于隐蔽状态，有利 于提高川贝母总生物碱的含量。通过隔日进行光照，且将光照强度控制在8000Lx之内，人为 改变川贝母种植大棚的光照、温、湿度环境以提高川贝母总生物碱的含量。

将S4步骤取消，改换为按传统工艺蛤粉加工处理，其余步骤均同实验二其它步骤，通过 川贝母总生物碱含量测定为0.09326（%，g·g^-1）。川贝母传统加工工艺是忌用水洗，因为水 洗川贝母不容易晒干，如果不是连续的晴天则可能发霉变质，但是通过本发明水洗和50℃恒 温干燥后，川贝母不仅不会发霉变质，而且有利于提高川贝母的总生物碱含量，且本发明的 水洗加恒温干燥方法简单可行。

将本发明S2步骤和S3步骤同时去掉，改为常规赤霉素处理加常规光照条件处理，其余 步骤均同实验二其它步骤，通过川贝母总生物碱含量测定为0.05872（%，g·g^-1），表明本发 明S2步骤和S3步骤同时使用则能提高川贝母总生物碱的含量。

取市售川贝母种子，采用实验二的实验方法检测川贝母种子的总生物碱含量，通过3批 次的市售川贝母种子总生物碱的含量测定，总生物碱的含量平均达到0.09361（%，g·g^-1）， 而通过本发明方法所得到的川贝母种子的总生物碱的含量平均达到0.10849（%，g·g^-1），由 此可见，本发明方法所得到的川贝母总生物碱的含量明显高于市售的川贝母种子的总生物碱 含量。