微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法

摘要

本发明公开了一种微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，属于大豆异黄酮的提取方法。酱油渣经粉碎、石油醚脱脂后，按照1：35的质量体积比加入60%的乙醇溶液，调节pH值至4-5之间，放于微波-超声波协同萃取仪中，超声波（600W）常开，微波功率500W，间歇萃取100s,提取液经抽滤、离心取上清液。再经浓缩、烘干，得大豆异黄酮粗品。经检测，大豆异黄酮的提取率可达0.652%。此法工艺简单，集中了微波、超声波的省时、节能、提取率高、产品纯度高、重现性高、污染小等优点，具有广阔的推广应用前景。

说明书

技术领域

本发明涉及微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异黄酮的方法，属于从酱油 渣中提取大豆异黄酮的方法。

背景技术

大豆异黄酮是一类存在于豆科植物中的微量活性成分，包含染料木苷、染 料木黄酮、黄豆苷和黄豆苷元等12种成分。科学研究表明,大豆异黄酮具有很 多重要的生理功能,与人体健康密切相关，除具有抗肿瘤作用外，还对衰老、心 血管疾病、骨质疏松症及更年期综合症具有预防和治疗作用。

酱油酿造的主要原料是大豆、蚕豆、豆饼或豆粕、豌豆、麸皮、小麦和食盐 等，经酿造发酵、抽提酱油后产生大量的废弃的酱油渣。其水分、盐分、脂肪含 量高，还含有一定量的蛋白质、纤维、黄酮、磷脂等。目前对其开发利用有限,主 要用作饲料或肥料的配料,附加值低,对其有效成分如大豆异黄酮等的提取分 离及高值化利用是酱油渣开发利用的一个重要方向。

目前，大豆异黄酮的提取方法主要有溶剂萃取法、超临界CO₂萃取法、超 声辅助提取法、微波辅助提取法。传统溶剂提取法耗时耗能，消耗大量溶剂，经 济与环境成本很高。超临界CO₂流体萃取与传统溶剂提取法相比，提取率高、能 耗低，但对设备要求较高。超声波通过在样品和溶剂之间产生的空穴作用，提高 传质速率，具有省时、低温节能、提取率和产品纯度高的优点。微波辅助提取法 主要是利用微波的温度效应及电磁场效应来提高提取效率，与传统提取方法相比, 可达到强化与优化传热传质的目的,具有选择性高、提取效率高、操作时间短、 重现性好、污染小等优点。

发明内容

本发明的目的是提供一种从酱油渣中提取大豆异黄酮的方法。利用微波和超 声波的协同提取作用，充分发挥了两种提取方法的优点，从而进一步提高酱油渣 中大豆异黄酮的提取率。

本发明所采取的技术方案如下：一种微波—超声波协同提取酱油渣中大豆异 黄酮的方法，具体步骤如下：

（1）酱油渣粉碎脱脂：将新鲜酱油渣在温度60℃的条件下，恒温干燥至含 水低于10%；把烘干的酱油渣，粉碎5min后，过60目筛，得干渣样品；按每克 干酱油渣加入5mL石油醚，密封12小时后去除石油醚；剩余部分放通风处自然 干燥，得到脱脂后的酱渣。

（2）加入乙醇溶液溶解提取酱油渣中的大豆异黄酮，用0.1mol/L盐酸溶液 调节pH到4～5之间；所述乙醇溶液的浓度为60%V/V，酱油渣和乙醇溶液的质 量体积为1：35；

（3）微波—超声波协同提取：将溶液放于微波-超声波协同萃取仪中，在超 声波常开条件下即600W，设定微波功率500W，间歇萃取100s；得萃取的酱油 渣与乙醇的混合液；

（4）大豆异黄酮提取液的处理：将萃取之后的酱油渣与乙醇的混合液抽滤， 滤液以4000r/min的转速离心10min，取上清液；上清液在70℃、50r/min 条件下旋转蒸发10min，得浓缩液，浓缩液放80℃恒温干燥箱烘干12h，得大豆 异黄酮粗品。

将本发明所得大豆异黄酮粗品，溶于NaOH溶液，采用分光光度法测其浓度， 计算所得酱油渣中大豆异黄酮的提取率为0.652%。与采用超声波提取提取率为 0.411%，微波提取所得提取率0.506%，相比较其提取率显著提高。

本发明的有益效果是：该工艺集中了微波、超声波两种提取方法的优点，能 提高酱油渣中大豆异黄酮的提取率；工艺简单、成本经济，具有广阔的推广应用 前景。该方法快速、简便易行，同时克服了超临界CO₂流体萃取法对设备要求高 的缺点。

具体实施方式

原料由徐州恒顺万通食品酿造有限公司提供。

将新鲜酱油渣放在60℃电热恒温干燥箱干燥至含水率低于10%。烘干后的酱 油渣放在手提式粉碎机中，粉碎5min，过60目筛，得干渣样品。准确称取2g 干酱油渣放入100mL烧杯中，加10mL石油醚，用封口胶封住杯口，浸泡12小时， 用移液枪除去石油醚，剩余部分放通风处自然干燥即得脱脂后的酱油渣。

精确称取脱脂后的酱油渣2g放入100mL小烧杯中，加入70mL浓度为60%的 乙醇溶液，用0.1mol/L盐酸溶液调节样品的pH值至4—5之间，将原料倒入250mL 萃取瓶中，用微波-超声波协同萃取仪，在超声波常开条件下（600W），将微波功 率调整到500W，间歇萃取100s。

将样品抽滤，滤液以4000r/min的转速离心10min，取上清液。在70℃、 50r/min条件下旋转蒸发10min，得浓缩液，浓缩液放80℃恒温干燥箱烘干12h， 得大豆异黄酮粗品。

将所得大豆异黄酮粗品，溶于NaOH溶液，采用分光光度法测其浓度，计算 所得酱油渣中大豆异黄酮的提取率为0.652%。