一种CRISPR/Cas9编辑水稻香味基因Badh2的方法

摘要

本发明公开了一种CRISPR/Cas9编辑水稻香味基因Badh2的方法，分别以水稻Badh2基因的第2外显子和第7外显子为靶位点，分别设计了保守的特异序列，通过制备Oligo二聚体后，将其构建到CRISPR/Cas9表达载体。构建好的质粒载体利用引物SG‑SR3和PUV4‑R进行PCR扩增，PCR产物经测序后确认sgRNA序列已构建到表达载体中，将其转化到农杆菌感受态EHA105后利用水稻愈伤组织进行遗传转化。本发明方法获得的转基因突变株系，可在转基因后代中分离到无转基因标记的纯合株系，而且其突变特性可稳定遗传给后代，香味成分均显著高于野生型对照，香味性状得到明显改良。