一种高活性胆固醇氧化酶的生产方法

摘要

本发明公开了一种高活性胆固醇氧化酶的制备方法，具体包括以下步骤：S1、发酵上清液：取1环产胆固醇氧化酶短杆菌至种子摇瓶，在常温条件下培养10h，之后接至发酵摇瓶，在常温条件下培养38h，离心5min，取上清液100.00g；S2、盐析：在上述质量的发酵上清液中缓慢等量加入硫酸铵，并同时搅拌，使其混合饱和，室温静置4.5h后，用滤纸过滤，将滤液与沉淀物分离，并测定滤液中残留的酶活，并对沉淀物离心5min，用8％发酵液体积的缓冲液A溶解沉淀物，于透析袋中，并在去离子水中过夜；S3、装柱；S4、层析。