用于修复基因突变的基因修复试剂盒及多能干细胞的制备方法

摘要

本发明涉及一种用于修复基因突变的基因修复试剂盒及多能干细胞的制备方法，基因修复试剂盒包括第一sgRNA、第二sgRNA、第一DNA模板和第二DNA模板；所述第一sgRNA和所述第一DNA模板配合用于通过CRISPR/Cas9技术修复目的基因的目标突变并引入第二突变，所述第二sgRNA和所述第二DNA模板配合用于通过CRISPR/Cas9技术修复目的基因的所述第二突变。本发明的基因修复试剂盒通过两次基因编辑，可减少二次切割的发生，最终提高了基因突变的修复效率，且更适用于突变位点在内含子中的基因突变，为修复基因突变提供了一种更加可靠更加高效的途径。另外，相较于构建复杂的同源臂等结构进行同源重组，利用单链核苷酸片段合成更加便捷。