利用CRISPR/Cas9系统大片段敲除绵羊MSTN基因的方法

摘要

本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统大片段敲除绵羊MSTN基因的方法，本发明首先获得针对绵羊MSTN基因第一外显子,第二外显子和第三外显子的sgRNA识别区的DNA序列；接着分别构建针对绵羊MSTN第一外显子，第二外显子和第三外显子且含T7启动子的sgRNA体外转录载体；利用Cas9和sgRNA的体外转录载体通过体外转录获得Cas9mRNA和sgRNA，通过受精卵注射可用于生产大片段敲除MSTN基因的转基因绵羊。