一种利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊BMPR1B基因的方法

摘要

本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统敲除绵羊BMPR1B基因的方法，包括以下步骤：构建特异性靶向BMPR1B的sgRNA的体外转录载体；通过体外转录得到BMPR1B的sgRNA；体外转录Cas9蛋白的体外转录载体，得到Cas9mRNA；设计合成ssODN；将以上步骤的ssODN、sgRNA及Cas9mRNA纯化后测浓度，混合，注射入绵羊受精卵细胞质中，然后经体外培养后移植入同种雌性绵羊输卵管中，用于生产敲除BMPR1B的转基因绵羊。利用此方法可以快速有效的生产基因编辑绵羊，省时省力。