一种提高赖氨酸脱羧酶活性和稳定性的分子改造方法

摘要

本发明涉及一种提高赖氨酸脱羧酶活性和稳定性的分子改造方法；是在赖氨酸脱羧酶分子LDC的一端连接一段多肽片段EK。包括(1)获得赖氨酸脱羧酶分子的基因片段；(2)将编码EK多肽的基因片段连接到赖氨酸脱羧酶基因的一端；(3)将连接有EK多肽基因的赖氨酸脱羧酶基因连接到表达载体上，转入到宿主中，表达改造后的赖氨酸脱羧酶LDC‑EK。本发明通过对酶分子进行理性的改造，避免了随机突变的不确定性和繁琐的筛选过程；改造后的赖氨酸脱羧酶具有良好的稳定性和催化活性。LDC‑EK催化活性提高2倍，能够在较宽的温度范围内保持较高的活性，并且能够耐多种有机溶剂。方法更易操作，改造后蛋白更易制备。