一种基因组核苷酸定点替换的方法

摘要

本发明公开了一种基因组核苷酸定点替换的方法。本发明保护一种碱基编辑系统，包括融合蛋白和sgRNA；所述融合蛋白由切刻酶、胞嘧啶核苷脱氨酶PmCDA1和尿嘧啶DNA糖化酶抑制剂UGI组成；所述切刻酶如序列表的序列15自N端第1‑1423位氨基酸所示；所述sgRNA的核苷酸序列如序列表的序列3自5’端第441‑526位所示。本发明首次将高保真酶eSpCas9(1.1)n和优化的sgRNA运用到PmCDA1介导的碱基编辑系统中，大部分靶点提高了C·T碱基替换的替换效率并大幅度降低了脱靶效应。