首页> 外文OA文献 >Transthyretin amiloid fibrillumok nanobiofizikai vizsgálata = Nanobiophysical exploration of transthyretin amyloid fibrils
【2h】

Transthyretin amiloid fibrillumok nanobiofizikai vizsgálata = Nanobiophysical exploration of transthyretin amyloid fibrils

机译:运甲状腺素蛋白淀粉样蛋白原纤维nanobiofizikaivizsgálata=运甲状腺素蛋白淀粉样蛋白原纤维的纳米生物物理研究

代理获取
本网站仅为用户提供外文OA文献查询和代理获取服务,本网站没有原文。下单后我们将采用程序或人工为您竭诚获取高质量的原文,但由于OA文献来源多样且变更频繁,仍可能出现获取不到、文献不完整或与标题不符等情况,如果获取不到我们将提供退款服务。请知悉。

摘要

Kísérleteinkben AFM segítségével vizsgáltuk transthyretin (TTR) amiloid fibrillumok amiloidogén fibrillum képződési mechanizmusait. Protofibrillumokon végzett egyedi molekula erőspektroszkópiai mérések eredményeit a natív TTR szerkezeti paramétereivel hasonlítottuk össze annak érdekében, hogy szerkezeti és dinamikai bepillantást nyerjünk a fibrillumok belső elrendezésébe és az összetartó erők természetébe. Időfüggő AFM felvételek segítségével a protofibrillum képződést követő belső szerkezeti változásokat térképeztük fel. Eredményeink szerint a protofibrillum képződés első lépése amorf aggregátumok kialakulása, amelyek idővel gyűrű alakú szerkezetekké állnak össze. Hasonló gyűrű alakú intermediéreket más amiloid fibrillumok esetében is megfigyeltek. A gyűrűk egymáshoz rendeződve tubuláris strukturákat alakítanak ki, amely a protofibrillum kialakulásának további alapját képezi. Az oldat kicserélésére a struktura szétesik, szétzippzározódási lépéseken keresztül. A nanomechanikai mérések arra utalnak, hogy a TTR egységek ß-szálak mentén tekerednek szét, továbbá érett protofibrillumokban az intermonomerikus kapcsolatok megerősödnek. Megfigyeléseink alapján a TTR fibrillogenezis egy szerkezeti modelljét állítottuk fel. | In this work we used AFM to follow the amyloidogenetic pathway of transthyretin (TTR) by imaging the events leading to the formation of amyloid protofilaments. Single-molecule force spectroscopy (SMFS) of protofilaments was compared to naive TTR in order to probe dynamic and structural differences. We observed that the pathway proceeds through the formation of transient amorphous aggregates, followed by the occurrence of annular oligomers (rings or doughnuts). In other types of amyloidoses similar ring structures have been implicated in cytoxicity, but their properties and involvement in the amyloid pathway are poorly understood. We show that the rings have a tendency to stack, forming tubular protofilaments. These tubular protofilaments precede the appearance of amyloid protofilaments. Their height and pitch resemble those of previous structural models for the TTR amyloid protofilament. Upon solvent exchange we also observed amyloid protofilament dissociation. The dissociation appears to proceed through an unzipping mechanism, revealing structures reminiscent of the TTR annular oligomers. SMFS of protofilaments revealed a time-dependent increase in the length of the manipulated structure, suggesting that associations between monomers stabilize with time. Force spectra of native TTR and protofilaments contained transitions spaced 4 nm apart, indicating that the component ß-strands unfold sequentially. Based on our results a model of TTR protofilament assembly is proposed.
机译:在我们的实验中,我们使用AFM研究了运甲状腺素蛋白(TTR)淀粉样蛋白原纤维中淀粉样蛋白原纤维形成的机制。将原纤维的单个分子力光谱测量结果与天然TTR的结构参数进行比较,以便获得对纤维内部结构和内聚力性质的结构和动态分析。原纤维形成后的内部结构变化是使用时间依赖的AFM图像绘制的。我们的结果表明,原纤维形成的第一步是形成无定形聚集体,随着时间的流逝,它们会组装成环状结构。对于其他淀粉样蛋白原纤维,已经观察到类似的环状中间体。环布置在一起以形成管状结构,其进一步形成原纤维形成的基础。为了替换该解决方案,该结构通过拉链步骤分解。纳米力学测量表明,TTR单元沿ß纤维解绕,成熟的原纤维中的单体间键得到增强。基于我们的观察,我们建立了TTR原纤维形成的结构模型。 |在这项工作中,我们使用AFM通过对导致淀粉样蛋白原丝形成的事件进行成像来追踪运甲状腺素蛋白(TTR)的淀粉样蛋白生成途径。为了检测动力学和结构上的差异,将原丝的单分子力谱(SMFS)与原始TTR进行了比较。我们观察到该途径通过瞬态无定形聚集体的形成进行,随后出现环状低聚物(环或甜甜圈)。在其他类型的淀粉样糖中,类似的环结构也涉及细胞毒性,但对它们的性质和参与淀粉样蛋白途径的了解却很少。我们表明,环有堆叠的趋势,形成管状原丝。这些管状原丝先于淀粉样原丝出现。它们的高度和节距类似于TTR淀粉样蛋白原丝的先前结构模型。交换溶剂后,我们还观察到淀粉样蛋白原丝解离。解离似乎是通过拉开机制进行的,揭示了让人联想到TTR环状低聚物的结构。原生丝的SMFS揭示了操纵结构长度的时间依赖性增加,表明单体之间的缔合随着时间稳定。天然TTR和原丝的力谱包含相距4 nm的跃迁,表明组分ß链顺序展开。基于我们的结果,提出了TTR原丝组装的模型。

著录项

相似文献

  • 外文文献
  • 中文文献
  • 专利

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号