首页> 外文OA文献 >A practical approach on boar sperm cryodamage. Morphofunctional and immunocytochemical study of cryopreserved boar sperm intended for use in artificial insemination
【2h】

A practical approach on boar sperm cryodamage. Morphofunctional and immunocytochemical study of cryopreserved boar sperm intended for use in artificial insemination

机译:一种对公猪精子冷冻损伤的实用方法。用于人工授精的低温保存的公猪精子的形态功能和免疫细胞化学研究

摘要

L'ús d'esperma criopreservada en la inseminació artificial (IA) d'espècies d'interès productiu permet un major control sanitari i la creació de bancs de germoplasma d'alt valor genètic, entre d'altres avantatges. En el mercat porcí la major part de les inseminacions són encara realitzades amb semen refrigerat degut a l'èxit de l'aplicació de diluents de llarga durada i també a causa de la sensibilitat de l'esperma porcina a la criopreservació. Malgrat que aquesta sensibilitat ve donada per característiques particulars de la fisiologia espermàtica en l'espècie, algunes ejaculacions mantenen els paràmetres de qualitat espermàtica després de la criopreservació (ejaculacions amb bona "congelabilitat", GFEs) enfront d'altres que no sobreviuen al procés (ejaculacions amb mala "congelabilitat", PFEs). El primer objectiu de l'estudi va ser comparar ambdós grups en termes de fertilitat in vivo. El segon objectiu va ser testar l'eficiència de la inseminació postcervical (post-CAI) amb l'esperma criopreservada. El tercer objectiu va ser buscar predictors de la congelabilitat de les ejaculacions, tant en les GFEs com en les PFEs i en tres passos del procés de criopreservació (a 17ºC, a 5ºC i a 240 min postdescongelació). Aquest objectiu es va dur a terme mitjançant l'avaluació de paràmetres convencionals de qualitat espermàtica i a través de l'estudi de la localització i la reactivitat sota el microscopi de tres proteïnes (GLUT3, HSP90AA1 i Cu/ZnSOD) relacionades amb la fisiologia espermàtica i amb possibles rols en la congelabilitat. El quart objectiu va ser quantificar l'expressió de les tres proteïnes per transferència western, tant en espermatozoides d'ejaculacions GFEs com en els d'ejaculacions PFEs i en els tres passos abans esmentats, per tal de determinar el seu potencial com a predictores de la congelabilitat. Pel primer i el segon objectiu, 86 truges van ser inseminades per post-CAI amb 26 ejaculacions de mascles Piétrain dividides en una porció refrigerada a 17ºC (tractament control) i una porció criopreservada, ambdues porcions classificades alhora com a GFEs o PFEs. Els resultats més rellevants van demostrar que les probabilitats d'embaràs eren dues vegades menors en inseminacions amb esperma criopreservada d'ejaculacions PFEs (P 0.05) que en inseminacions amb esperma criopreservada d'ejaculacions GFEs, fet que indica que les ejaculacions amb percentatges elevats d'espermatozoides mòbils progressius i d'integritat de membrana (per sobre del 40% en les GFEs) són més favorables a provocar embarassos que no pas aquelles ejaculacions amb una pobra funció espermàtica in vitro (PFEs). Ni el nombre de truges que van donar a llum, ni la quantitat de garrins, ni el risc de reflux espermàtic van ser significativament diferents entre les inseminacions amb esperma criopreservada d'ejaculacions GFEs i les inseminacions control amb semen refrigerat, la qual cosa demostra la bona aplicabilitat de la inseminació post-CAI amb l'esperma criopreservada. Finalment, pel tercer i quart objectius van ser criopreservades 29 i 11 ejaculacions de mascles Piétrain, respectivament. Dos paràmetres cinètics espermàtics, la linealitat (LIN) i la rectitud (STR), van mostrar una hiperactivació de la mobilitat superior en les ejaculacions PFEs que en les GFEs després de 30 min a 5ºC durant la criopreservació. A més, la combinació d'ambdós paràmetres va donar una fiabilitat propera al 72% en la predicció de la congelabilitat de les ejaculacions porcines. Tot i que no va ser possible predir la congelabilitat mitjançant l'avaluació de les tres proteïnes al microscopi, els resultats de transferència western van revelar diferències en l'expressió de la HSP90AA1 en l'esperma a 17ºC, molt possiblement relacionades amb la millor supervivència a la criopreservació dels espermatozoides d'ejaculacions GFEs. Aquests resultats suggereixen que la promoció de la criopreservació d'esperma porcina per la seva aplicació en IA passa pel desenvolupament de tests per la predicció de la congelabilitat en semen refrigerat.
机译:在具有生产意义的物种的人工授精(AI)中使用冷冻保存的精子可以实现更好的卫生控制和具有高遗传价值的种质库的建立,以及其他优势。在养猪市场,由于成功使用了长效稀释剂,并且由于养猪精子对冷冻保存的敏感性,大多数授精仍使用冷冻精液进行。尽管这种敏感性是由该物种精子生理的特定特征赋予的,但是与不存活的其他射精相比,某些射精在冷冻保存后仍保持精子质量的参数(“冷冻性”良好的射精,GFE)。射精的“可冻结性”差,PFE)。该研究的首要目的是比较两组的体内受精能力。第二个目标是测试冷冻保存的精子的宫颈后人工授精(CAI后)的效率。第三个目标是寻找在GFE和PFE中以及在冷冻保存过程的三个步骤(在17ºC,5ºC和解冻后240分钟)射精可冻结性的预测因子。通过评估常规的精子质量参数并在显微镜下研究与精子生理和生理相关的三种蛋白质(GLUT3,HSP90AA1和Cu / ZnSOD)的位置和反应性,从而实现了这一目标。在冻结性方面可能扮演的角色。第四个目标是通过蛋白质印迹法来定量这三种蛋白质在GFE射精的精子和PFE射精的精子中以及上述三个步骤中的表达,以确定它们作为潜在的预测因子的潜力。可冻结性。对于第一个目标和第二个目标,在CAI后对86头Piétrain雄性的精液进行授精,将母猪授精,分为17ºC冷藏部分(对照处理)和冷冻保存部分,这两部分同时归为GFE或PFE。最相关的结果表明,用射精PFE冷冻保存的精子的受精的受孕率比用射精GFE冷冻保存的精子的受孕的低两倍(P <0.05),这表明射精的百分比高进行性活动精子和膜完整性(在GFE中超过40%)的比例比体外精子功能较差的射精(PFE)更容易引起妊娠。射精GFE冷冻保存精子的人工授精和冷冻精液的对照人工授精的分娩母猪数量,仔猪数量和精子返流风险均无显着差异。 CAI后用冷冻保存的精子进行人工授精具有良好的适用性。最后,对于第三个和第四个目标,分别冷冻保存了29例和11例Piétrain男性射精。在低温保存过程中,在5ºC下30分钟后,PFE射精中的两个精子动力学参数线性(LIN)和直线度(STR)显示出比GFE更高的迁移率。此外,在预测猪射精的可冻结性时,两个参数的组合提供了接近72%的可靠性。尽管不可能通过在显微镜下评估三种蛋白质来预测可冻结性,但蛋白质印迹结果显示,在17ºC时精子中HSP90AA1表达的差异,最有可能与更好的存活率有关。从射精GFE中冷冻保存精子。这些结果表明,促进猪精子冷冻保存以用于AI的方法包括开发用于预测冷冻精液可冻结性的测试方法。

著录项

  • 作者

    Casas Roqueta Isabel;

  • 作者单位
  • 年度 2010
  • 总页数
  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 eng
  • 中图分类

相似文献

  • 外文文献
  • 中文文献
  • 专利

客服邮箱:kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备:11010802029741号 ICP备案号:京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有
  • 客服微信

  • 服务号