未知因子を排除した完全無血清培養法による眼表面再建のための培養ヒト角膜上皮シート

摘要

角膜上皮幹細胞疲弊症による視力低下症例に対し,培養角膜上皮シート移植による治療が行われている.培養角膜上皮シートの従来の培養法は,ウシ血清やフィーダー細胞との共培養が必要であった.そこでこれら未知成分を含まない培養法の開発を試みた.我々はビタミンAが含まれる培養補助因子B27にepidermal growth factor(EGF)を添加した培地を用いて,無フィーダー細胞·無血清培養条件下に重層化した角膜上皮シートが作製できることを見出した.無フィーダー細胞·無血清培養法は,既存の培養法と比較して同等以上の細胞増殖性を示し,本培養法で作製した培養ヒト角膜上皮シートを家兎角膜上皮幹細胞疲弊症眼に移植すると生着し,角膜の透明性を椎持した.以上の結果は, B27にEGFを添加した無フィーダー細胞·無血清培養法は,培養ヒト角膜上皮シート作製を可能にすることを示しており,既知の成分のみで構成された本培養法は,ヒト角膜上皮細胞培養に有用な因子の同定にも応用可能であると考えられた.