メロンえそ斑点ウイルスを媒介するOlpidium bornovanus 土壌汚染程度の段階的検出法

摘要

メロンえそ斑点ウィルスを媒介するOlpidium bornovanus の土壤中の動態を把握することは，メロンえそ斑点病の 被害回避を図る際に重要である。そこで，nested PCR を用い，被検土壌の本菌汚染程度を段階的に検出する検 出法の開発を試みた。被検土壌から抽出したDNAを鋳型とする直接検出法では，O. bornovanus汚染土壌から nested PCRのsecondary reactionでのみ菌が検出され， 段階的な検出はできなかった。一方，被検土壌を宿主植 物であるメロンへ添加後，1または2週間栽培した宿主 根から抽出したDNAを鋳型とする間接検出法では，菌 の培養期間とnested PCRの段階の組み合わせで検出限 界が異なり，この検出限界の差に基づき，菌の汚染程度 が段階的に検出できる可能性が示唆された。更に，簡易 DNA抽出法や検出能の高いポリメラーゼの利用により 作業や検出日数短縮等の省力化が可能であつた。