Caracteriza??o de amostras atenuadas do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV) tipos 1 e 2 para uso em vacinas

摘要

Este artigo relata a caracteriza??o de duas amostras citopáticas do vírus da Diarréia Viral Bovina (BVDV-1: IBSP-2; BVDV-2: SV-253) submetidas à atenua??o por múltiplas passagens em cultivo celular e exposi??o à radia??o ultravioleta. As amostras foram caracterizadas in vitro (tamanho e morfologia de placas, cinética de replica??o e perfil antigênico) e in vivo (atenua??o e resposta sorológica em bovinos). A caracteriza??o in vitro de popula??es clonadas dos vírus obtidas nas diferentes passagens em cultivo celular (0, 1, 10, 20 e 30), demonstrou que o processo de atenua??o n?o afetou negativamente as características antigênicas e fenotípicas das amostras. N?o foram observadas altera??es significativas no tamanho e morfologia de placas e na cinética de replica??o. A reatividade com 48 anticorpos monoclonais demonstrou que o perfil antigênico n?o doi alterado durante as sucessivas passagens in vitro. A inocula??o intramuscular dos clones de vírus obtidos na passagem 30 (IBSP-2: 10(7,3) DICC50; SV-253: 10(6,8) DICC50) em 12 novilhas soronegativas com idade média de 15 meses, n?o resultou em sinais clínicos, comprovando sua atenua??o. Após a inocula??o, o vírus foi detectado em leucócitos da maioria dos animais inoculados (10/12) entre os dias 3 e 6 pós-inocula??o (pi) e em secre??es nasais de três animais (dias 4, 7 e 8pi). No entanto, n?o ocorreu transmiss?o dos vírus vacinais aos três animais soronegativos mantidos como sentinelas. Todos os animais vacinados soroconverteram aos 14 dias pós-vacina??o (dpv). Títulos moderados a altos de anticorpos neutralizantes foram detectados frente a 5 isolados brasileiros do BVDV-1 (títulos de 80 a > 1280) e quatro isolados do BVDV-2 (títulos de 20 a 640). Em geral, os títulos foram de magnitude superior frente a isolados brasileiros do BVDV-1. Aos 240dpv, os animais receberam uma segunda dose dos vírus vacinais (IBSP-2: 10(7,3) DICC50; SV-253: 10(6,8) DICC50). A revacina??o induziu uma resposta secundária na maioria dos animais, resultando em um aumento dos títulos de anticorpos neutralizantes principalmente frente ao BVDV-2. Esses resultados s?o promissores no sentido da utiliza??o dessas amostras na formula??o de vacinas atenuadas para o controle da infec??o pelo BVDV no Brasil.