Identifica???§???￡o por espectrometria de massa MALDI-TOF de Salmonella spp. e Escherichia coli isolados de carca???§as bovinas

摘要

RESUMO: O objetivo deste trabalho foi introduzir a t????cnica de espectrometria de massa com fonte de ioniza???§???￡o e dessor???§???￡o a laser assistida por matriz e analisador de tempo-de-voo (MALDI-TOF) para incrementar o m????todo tradicional microbiol???3gico na detec???§???￡o de Salmonella spp. e Escherichia coli em carca???§as bovinas. Foram avaliadas 270 amostras de 90 carca???§as de bovinos. Para isolamento de Salmonella spp. e E. coli , foram utilizadas, respectivamente, as metodologias descritas na ISO 6579:2002 e no Compendium of Methods for the Microbiological Examination of Foods . As an????lises por MALDI-TOF foram realizadas a partir de isolados cultivados em ????gar nutriente ou em caldo triptona de soja, provenientes das amostras com caracter???-sticas bioqu???-micas positivas (n=7), inconclusivas (n=4) e negativas (n=85) para Salmonella spp. e bioqu???-micas positivas (n=37) e negativas (n=85) para E. coli. Os perfis de massas foram adquiridos com o espectr???′metro de massas MALDI-TOF Autoflex III SmartBeam e os espectros brutos foram processados usando o programa MALDI Biotyper (Bruker Daltonics). De acordo com a identifica???§???￡o preliminar, com base na morfologia das col???′nias e nas rea???§???μes bioqu???-micas, sete isolados foram considerados positivos para Salmonella spp. Atrav????s do MALDI Biotyper, esses sete isolados foram classificados como pertencentes ao g???anero Salmonella e, al????m disso, identificados como S. enterica . Quatro isolados que apresentaram caracter???-sticas fenot???-picas n???￡o usuais e resultados inconclusivos nos testes bioqu???-micos para Salmonella foram identificados como pertencentes aos g???aneros Citrobacter e Proteus ap???3s an????lise por MALDI. Para E. coli, 37 amostras foram positivas pelos testes bioqu???-micos da esp????cie, o que foi confirmado por MALDI Biotyper. A metodologia MALDI-TOF permitiu a r????pida confirma???§???￡o da identidade de Salmonella spp. e E. coli , podendo ser utilizada para detec???§???￡o desses microrganismos em isolados bacterianos de carca???§as bovinas.