Study on the interaction of bovine serum albumin with acid cyanine 5R and its application in analysis

摘要

A supramolecular complex of bovine serum albumin (BSA) with acid cyanine 5R (AC 5R, C.I. acid blue 113, C.I.: 26360) has been shown to form in Tris–HCl buffer solution (pH 7.42) by linear sweep voltammetry (LSV), fluorimetry, and spectrophotometry. The binding ratio and binding constant of BSA with AC 5R have been detected by LSV and fluorimetry. The binding mechanism is also preliminarily discussed. In Tris–HCl buffer solution (pH 7.42), AC 5R can easily be reduced on the mercury electrode, and it has a well-defined LSV peak current (I_p) and peak potential (E_p) at –0.65 V (vs. SCE). In the presence of BSA, the I_p of AC 5R decreases, and the peak potential (E_p) shifts to a more positive potential. The decrease of the second-order derivative of reductive peak current (ΔI_p") of AC 5R is proportional to the logarithm of BSA concentration in the range of 1.54 × 10–8 mol·L–1 – 1.54 × 10–5 mol·L–1 (r = 0.9931 – 0.9977). The limit of detection of BSA is 9.0 × 10–9 mol·L–1. The relative standard deviation is 1.83% (n = 10), and the standard recovery is 97.5%–104.8%. This method can be used to determine BSA concentration on the basis of the interaction of BSA with AC 5R.Key words: bovine serum albumin (BSA), acid cyanine 5R (AC 5R), supramolecule, binding ratio, binding constant, fluorimetry, spectrophotometry, electroanalytical method.La formation d'un complexe supramoléculaire a été observée entre l'albumine sérique bovine (ASB) et le colorant Acide Cyanine 5R (AC 5R, C.I. acid blue 113, C.I. 26360) dans un tampon Tris–HCl (pH 7,42) par voltamétrie à balayage linéaire (VBL), fluorométrie et spectrophotométrie. Le rapport de liaison ainsi que la constante de liaison de l'ASB avec l'AC 5R ont été évalués par VBL et fluorométrie. Le mécanisme de liaison est discuté de façon préliminaire. Dans le tampon Tris–HCl (pH 7,42), l'AR 5R peut facilement être réduit sur une électrode de mercure et révèle un pic de courant (I_p) et un pic de potentiel (E_p) en VBL bien définis à –0.65V (vs SCE). En présence d'ASB, I_p de l'AC 5R diminue et le pic de potentiel (E_p) se déplace vers un potentiel plus positif. La diminution de la dérivée de deuxième ordre du pic de courant réducteur (ΔI_p") de l'AC 5R est proportionnel au logarithme de la concentration d'ASB dans une échelle de concentration de 1,54 × 10–8 mol·L–1 – 1,54 × 10–5 mol·L–1 (r = 0,9931 – 0,9977). La limite de détection de l'ASB est de 9,0 × 10–9 mol·L–1. La déviation standard relative est de 1.83% (n = 10) et le récupération standard est de 97,5%–104,8%. Cette méthode peut être utilisée afin de déterminer la concentration d'ASB sur la base de son interaction avec l'AC 5R.Mots clés : albumine sérique bovine (ASB), acide cyanine 5R (AC 5R), supra molécule, rapport de liaison, constante de liaison, fluorométrie, spectrophotométrie, méthode électroanalytique.[Traduit par la Rédaction]